摘要：文章以百里香為材料，采用水蒸氣蒸餾法提取百里香揮發(fā)油，并對(duì)其揮發(fā)油的主要應(yīng)用進(jìn)行研究。在提取揮發(fā)油的過(guò)程中分別考察了蒸餾時(shí)間和加水量?jī)煞N因素對(duì)揮發(fā)油提取率的影響。然后在接種了大腸桿菌的平板中分別放入沾了四個(gè)不同濃度揮發(fā)油和無(wú)菌水的濾紙片，放置在30℃溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)。實(shí)驗(yàn)證明，百里香揮發(fā)油對(duì)大腸桿菌具有抑菌作用。

關(guān)鍵詞：百里香揮發(fā)油；水蒸氣蒸餾法；抑菌性

中圖分類號(hào)：TQ461 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-0432（2012）-12-0033-1

百里香屬唇形科，是常用中藥，傳統(tǒng)藥理認(rèn)為百里香具有抗菌、抗痙攣、抗昆蟲(chóng)毒液、殺菌、強(qiáng)身、促結(jié)疤的作用。百里香含揮發(fā)油含量高，品質(zhì)優(yōu)，在醫(yī)藥、食品加工、精細(xì)化工及日常生活中被廣泛應(yīng)用[1]。本實(shí)驗(yàn)采用水蒸氣蒸餾法從百里香中提取揮發(fā)油[2]，分別考察了蒸餾時(shí)間和加水量?jī)煞N因素對(duì)揮發(fā)油提取率的影響，并進(jìn)行了體外抑菌作用的研究[3]。

1 材料與方法

1.1 材料

百里香、大腸桿菌、濾紙。藥品：蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉、瓊脂、無(wú)水乙醇等。儀器：恒溫水浴鍋、高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫振蕩培養(yǎng)箱等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 百里香揮發(fā)油的提取 分別取經(jīng)粉碎、過(guò)40目篩后的百里香樣品，稱取50g，設(shè)蒸餾時(shí)間分別為150min、180min、210 min、240min和270min。而加水量分別為250mL、300mL、500mL、600ml，各進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)，觀察結(jié)果并記錄[5]。

1.2.2 接種培養(yǎng)基的制備 將保存的大腸桿菌置于30℃溫箱中培養(yǎng)1天，在超凈臺(tái)里將菌種試管斜面注入適量無(wú)菌水（約5mL），接種環(huán)輕刮菌落，搖晃混勻制成菌懸液，分別用移液器取0.1mL菌懸液注入平板，用三角耙涂布均勻，涂三個(gè)平板，放入30℃溫箱中，2天后觀察是否有菌落生長(zhǎng)。

1.2.3 濾紙片實(shí)驗(yàn)法 由于百里香揮發(fā)油難溶于水，故先用無(wú)水乙醇按照1：1的比例稀釋后，再用無(wú)菌水依次稀釋成濃度為5%、2.5%、1.25%、0.625%，備用。分別配置不同濃度的乙醇溶液作為對(duì)照，在超凈工作臺(tái)里將平板劃分成五個(gè)區(qū)，每?jī)蓮垶V紙片（直徑0.6cm）為一帖，用鑷子夾著濾紙片在不同濃度的揮發(fā)油中和無(wú)菌水中輕輕粘一下后，取出貼在平板的指定位置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為30℃，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 出油率按以下公式計(jì)算：出油率（%）=揮發(fā)油得率/供試品量×100%，重復(fù)測(cè)定3次取其平均值。計(jì)算公式：生長(zhǎng)率=（對(duì)照組菌落直徑-給藥組菌落內(nèi)徑）/對(duì)照組菌落直徑×100%，抑制率=1-生長(zhǎng)率

2 結(jié)果與分析

2.1 不同蒸餾時(shí)間對(duì)揮發(fā)油的提取結(jié)果

由表1可知，蒸餾時(shí)間為210分鐘時(shí)出油率最高。所以確定最佳蒸餾時(shí)間為210min。

2.2 不同加水量對(duì)揮發(fā)油的提取結(jié)果

由表2可看出，百里香揮發(fā)油出油率的多少與加水量有很大的關(guān)系。若投料量為50克時(shí)，加水量以10倍左右出油率最高。

2.3 百里香揮發(fā)油對(duì)大腸桿菌的抑菌作用

由表3可看出，接有大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基中都產(chǎn)生了抑菌圈且直徑隨揮發(fā)油濃度的增加而增大。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用水蒸氣提取法對(duì)百里香揮發(fā)油進(jìn)行提取，操作簡(jiǎn)便安全，而且不污染環(huán)境[9]。提取揮發(fā)油時(shí)，不同的外界因素，如提取過(guò)程中投料量、加水量及蒸餾時(shí)間等對(duì)揮發(fā)油的提取都有很大的影響。多次的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明：百里香揮發(fā)油提取時(shí)，最佳的加水量應(yīng)為投料量的10倍左右，最佳蒸餾時(shí)間為210分鐘。通過(guò)抑菌試驗(yàn)表明，百里香對(duì)大腸桿菌具有抑制性且抑菌圈直徑的大小隨著百里香揮發(fā)油濃度的提高而增大。

參考文獻(xiàn)

[1] 彭夢(mèng)俠，劉小玲，黃思敏，陳惠.水蒸氣蒸餾實(shí)驗(yàn)的改進(jìn).嘉應(yīng)學(xué)院化學(xué)與環(huán)境學(xué)院，2009，13（6）.

[2] 謝捷，曹銘希，朱興一，王平.閃式輔助水蒸氣蒸餾提取陳皮揮發(fā)油工藝的優(yōu)化研究.浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院制藥工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，2008.

[3] 劉曉輝.四種香料植物揮發(fā)油的提取及應(yīng)用研究[碩士學(xué)位論文].吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[4] 張抒.百里香精油成分含量及組分的比較研究.東北林業(yè)大學(xué)園林植物與觀賞園藝，2007.

[5] 趙秋堂，施健，丁亞明.玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)提取.無(wú)錫衛(wèi)生高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院，2010.

作者介紹：王紅濤（1981-），女，吉林白山人，通化師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院助教，研究方向：分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)與基因工程、環(huán)境微生物學(xué)研究。