摘要：設(shè)計一對３′端互補、５′端帶酶切位點的引物，用ＰＣＲ擴增唾液富組蛋白５（Ｈ５）基因（ｈ５），將載體ｐＧＥＸ４Ｔ－２和ｈ５雙酶切、連接、轉(zhuǎn)化ＤＨ５α，將篩選鑒定的重組質(zhì)粒ｐＧＥＸ４Ｔ－２-ｈ５轉(zhuǎn)化ＢＬ２１（ＤＥ３）。誘導(dǎo)重組菌ＢＬ２１（ＤＥ３）－ｐＧＥＸ４Ｔ－２－ｈ５表達，純化融合蛋白ＧＳＴ－Ｈ５，用Thrombin切去ＧＳＴ標簽獲取重組Ｈ５（ｒＨ５），測試rH5抗白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）活性。試驗成功構(gòu)建了重組載體ｐＧＥＸ４Ｔ－２－ｈ５，在３７ ℃重組菌ＢＬ２１（ＤＥ３）－ｐＧＥＸ４Ｔ－２－ｈ５生長至ＯＤ６００ ｎｍ＝０．６時用１ ｍｍｏｌ／Ｌ ＩＰＴＧ于２０ ℃誘導(dǎo)９ ｈ，可獲得高水平表達的融合蛋白GST-H5；酶切后獲得的ｒＨ５對白色念珠菌生長有較強的抑制作用，ｒＨ ５產(chǎn)率約２ ｍｇ／Ｌ。

關(guān)鍵詞：唾液富組蛋白５（Ｈ５）；融合蛋白ＧＳＴ－Ｈ５；原核表達；白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）

中圖分類號：Q78文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）08－1696-03