沙棘SRAP-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化及引物篩選
2012-12-31 00:00:00趙春娥鮑薈宇李賀
湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012年8期
摘要：為建立適合沙棘（Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ Ｌ．）的ＳＲＡＰ－ＰＣＲ反應(yīng)體系，對影響ＳＲＡＰ－ＰＣＲ的Ｍｇ２＋濃度、Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶濃度、引物濃度、ｄＮＴＰｓ濃度、模板ＤＮＡ濃度進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化后的反應(yīng)體系為Ｍｇ２＋ ３．０ ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶２Ｕ／２５ μＬ、引物０．８ μｍｏｌ／Ｌ、ｄＮＴＰｓ ０．２５ ｍｍｏｌ／Ｌ、模板ＤＮＡ ３０ ｎｇ／２５ μＬ，反應(yīng)總體系２５ μＬ。利用此體系從３０對引物組合中篩選出１７對適合沙棘ＳＲＡＰ－ＰＣＲ的引物，有助于沙棘的分子標(biāo)記輔助育種研究。
關(guān)鍵詞：沙棘（Ｈｉｐｐｏｐｈａｅ ｒｈａｍｎｏｉｄｅｓ Ｌ．）；ＳＲＡＰ－ＰＣＲ；優(yōu)化；引物篩選
中圖分類號：Ｓ７９３．６；Ｑ９４３．２文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）08－1691-05
