摘 要：為了選擇適合山東地區(qū)的藥用及保健功能桑樹品種，選取山東省內(nèi)有代表性的桑品種17個(gè)，采用反相高效液相色譜法測(cè)定桑葉的1-脫氧野尻霉素（1-DNJ）含量。結(jié)果表明：桑屬不同種間1-DNJ含量存在顯著性差異，白桑最高；不同桑品種間的1-DNJ含量差別顯著，晉選6號(hào)和秋雨分別是魯桑和白桑中含量最高的品種，達(dá)02777%和03281%，適合直接作為桑葉1-DNJ開發(fā)的專用桑品種或育種材料。

關(guān)鍵詞：1-脫氧野尻霉素；桑品種；反相高效液相色譜法

中圖分類號(hào)：S888.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2012）12-0100-03

Determination of 1-Deoxynojimycin Contents in Leaves

of Some Mulberry Cultivars in Shandong Province

Li HuaXiu1， Chen ChuanJie1， Gu YinYu1， Shi XinQin1*， Li Feng2， Zhu Hong1

（1.Shandong Institute of Sericultural Science， Yantai 264002， China；

2.Department of Personnel， Shandong Academy of Agricultural Sciences， Jinan 250100， China）

Abstract In order to select mulberry cultivars with medicinal and health function adaptable to Shandong area， 17 representative mulberry cultivars were used to determine the 1-deoxynojimycin （1-DNJ） content in leaves by RP-HPLC. The results indicated that there were extremely significant differences between different Morus species， and Morus alba had the highest 1-DNJ content. There were also significant differences between different mulberry cultivars. Jinxuan6 and Qiuyu were the cultivars with the highest 1-DNJ content belonging to M. multicaulis and M. alba respectively with the 1-DNJ content as 0.3281% and 0.2777% respectively， so they were suitable as special cultivars or breeding materials to develop 1-DNJ from mulberry leaves.

Key words 1-DNJ content； Mulberry cultivars； RP-HPLC

1-脫氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，1-DNJ）是一種哌啶類生物堿[1]，對(duì)α-葡萄糖苷酶有抑制作用，可降血糖、治療糖尿病，此外還具有抗病毒、抗腫瘤轉(zhuǎn)移等藥理作用[2]，是桑（Morus alba L）和家蠶（Bombyx mori L）保健品降血糖功能的重要活性物質(zhì)，也是衡量桑、蠶藥用價(jià)值的重要指標(biāo)之一。桑葉中1-DNJ的含量因品種、發(fā)育階段、季節(jié)、地理氣候等因素的不同而存在很大差異[3～11]。

山東省桑樹資源豐富、栽培歷史悠久，有魯桑種、白桑種、廣東桑、山桑和瑞穗桑5個(gè)栽培種、200余個(gè)桑品種，具有廣泛的適應(yīng)性和代表性，因此研究山東桑屬1-脫氧野尻霉素含量與品種間關(guān)系極具代表性。本研究選取代表性的桑品種17個(gè)，采用反相高效液相色譜法測(cè)定其桑葉的1-DNJ含量，從桑種間、桑品種間以及桑不同類型間差異等方面探求1-DNJ含量與分類學(xué)的關(guān)系，對(duì)于篩選1-DNJ高含量的桑資源，培育1-DNJ高的桑品種具有指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

11 試驗(yàn)材料

17個(gè)代表性桑品種樣品均采自山東省蠶業(yè)研究所桑樹資源苗圃（煙臺(tái)，2007年建），其中魯桑9個(gè)品種，包括晉選6號(hào)、牛筋桑、7946、農(nóng)桑14號(hào)、桐鄉(xiāng)青（4X）、桐鄉(xiāng)青（2X）、大雞冠、育711、湖桑32、云桑1號(hào)；白桑6個(gè)品種，包括秋雨、嘉陵16號(hào)、新一之瀨、陜桑305、油匠鐺鐺、遼育164；山桑2個(gè)品種，為山桑、劍持。

2011年6月上旬春蠶期采摘嫩葉，所有樣品50℃烘干，粉碎過100目篩，4℃保存待測(cè)。

12 主要試劑及儀器

1-Deoxynojirimycin-HCl（1-DNJ-HCl，Sigma公司產(chǎn)品），9-Fluorenyl- methyl chloroformate（FMOC-Cl，F(xiàn)luca公司產(chǎn)品），乙腈（色譜純，天津市凱通化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品），試驗(yàn)用水為重蒸水，其它試劑皆為分析純。

UV200Ⅱ高效液相色譜儀（大連依利特），KQ-600型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)）。

13 1-DNJ的測(cè)定方法

樣品中1-DNJ含量采用反相高效液相色譜-紫外檢測(cè)法測(cè)定[12]，每個(gè)處理重復(fù)測(cè)定2次，取平均值。

14 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 90數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

21 不同種間桑葉1-DNJ含量的變化規(guī)律

分別對(duì)1-DNJ標(biāo)樣、17種桑葉粉試樣的衍生化反應(yīng)混合物進(jìn)行HPLC分析，分離圖譜如圖1、圖2所示。測(cè)定白桑、魯桑和山桑3個(gè)栽培桑種嫩葉的1-DNJ含量（表1），可以看出不同栽培桑種間桑葉的1-DNJ含量存在極顯著性差異：白桑的1-DNJ含量最高，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到0219%，山桑最低，僅為0171%。

22 不同品種間桑葉1-DNJ含量的變化規(guī)律

分別測(cè)定9個(gè)魯桑品種、6個(gè)白桑品種和2個(gè)山桑品種的桑葉，其1-DNJ含量見表2～4，不同桑品種間1-DNJ含量存在極顯著性差異：魯桑中晉選6號(hào)1-DNJ含量最高，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)02777%，桐鄉(xiāng)青（2X）含量最低；白桑中秋雨的含量最高，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)03281%，新一之瀨最低為01141%。

3 結(jié)論

我國(guó)桑樹種類多、自然分布廣、栽培歷史悠久，約有15個(gè)種及4個(gè)變種，是世界桑屬植物資源最豐富的國(guó)家之一。桑樹的1-脫氧野尻霉素（1-DNJ）含量因桑品種、栽培地區(qū)和氣候以及樹體藥用部位不同存在很大的差異。

本研究結(jié)果表明：山東桑屬不同栽培種間1-DNJ含量存在顯著性差異，白桑、魯桑中1-DNJ含量明顯高于山桑，而白桑和魯桑間差異性不顯著；同一桑種不同品種間的1-DNJ含量差異顯著，其中晉選6號(hào)和秋雨分別是白桑和魯桑中含量最高的品種，達(dá)02777%和03281%。之前朱見等[5]、劉凡等[3]報(bào)道，魯桑高于白桑和山桑，但差異未達(dá)到顯著水平。結(jié)論不同可能是栽培地區(qū)和氣候不同，也可能是本試驗(yàn)的供試品種較少。

本研究首次發(fā)現(xiàn)同品種桑的染色體倍數(shù)不同，其1-DNJ含量差別顯著。以桐鄉(xiāng)青為例， 4X桐鄉(xiāng)青的含量幾乎是2X桐鄉(xiāng)青的15倍。因此進(jìn)一步對(duì)1-DNJ含量與桑品種的倍性相關(guān)性進(jìn)行研究，可能對(duì)藥桑育種工作具有指導(dǎo)性意義。同時(shí)擴(kuò)大調(diào)查桑種、品種范圍和數(shù)量，可以更全面、準(zhǔn)確地反映桑屬1-DNJ含量變化與桑分類學(xué)的關(guān)系。參 考 文 獻(xiàn)：

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