劉靈芝

鄭州人民醫(yī)院心血管內(nèi)科 鄭州 450003

衰老是一個(gè)受多因素影響的復(fù)雜自然生理過程，有關(guān)衰老機(jī)制的眾多研究中，自由基學(xué)說和細(xì)胞凋亡學(xué)說越來越受到重視［1］。丹紅注射液作為一種活血化瘀藥物，其是否也具有抗氧化作用尚未見報(bào)道。作者采用生化法檢測(cè)了應(yīng)用丹紅注射液后自然衰老大鼠心臟、大腦組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）的水平，探討其對(duì)自然衰老大鼠的抗氧化作用。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器 丹紅注射液（批號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z20026866）購(gòu)自菏澤步長(zhǎng)制藥有限公司，維生素E（Vit E）注射劑（批號(hào)：110412）購(gòu)自上海通用藥業(yè)股份有限公司，SOD、MDA、GSH－Px、考 馬 斯 亮 蘭 蛋 白 測(cè) 試 盒 （批 號(hào) 均 為：20110709）均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。722型分光光度計(jì)為上海第三分析儀器廠產(chǎn)品，BP121S電子天平為德國(guó)Sartorius公司產(chǎn)品。

1.2 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 健康18月齡雄性Wistar大鼠，體質(zhì)量387～412g，購(gòu)自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組及給藥方法 入組40只Wistar大鼠隨機(jī)均分為衰老組、Vit E組（Vit E 50mg／kg）、丹紅注射液大劑量組（丹紅注射液1.0mL／kg）和丹紅注射液小劑量組（丹紅注射液0.5mL／kg）4組，每組10只。自然衰老組大鼠皮下注射0.85%生理鹽水2mL／kg，3個(gè)處理組注射相應(yīng)濃度藥物2mL／kg，1次／d，連續(xù)12個(gè)月。

1.4 SOD、MDA和GSH－Px檢測(cè) 各組大鼠末次給藥1h后，腹腔注射1%戊巴比妥鈉麻醉，取出心臟、大腦組織，4℃生理鹽水沖洗，濾紙吸干，將大腦及心臟左心室組織制成勻漿，3 000r／min離心15min，取適量上清液，按試劑盒說明測(cè)定SOD、MDA和GSH－Px。總蛋白量測(cè)定采用考馬斯亮蘭法。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定量數(shù)據(jù)用BZ_15_1694_320_1782_360表示，比較采用單因素方差分析及LSD法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。

2 結(jié)果

與衰老組相比，3個(gè)處理組大鼠心臟、大腦組織SOD、GSH－Px水平升高、MDA水平降低（P＜0.05）；丹紅注射液大劑量組、Vit E組與丹紅注射液小劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1、2。

表1 丹紅注射液對(duì)自然衰老大鼠心臟SOD、MDA及GSH－Px水平的影響

表2 丹紅注射液對(duì)自然衰老大鼠大腦SOD、MDA及GSH－Px水平的影響

3 討論

隨著年齡的增長(zhǎng)，自由基產(chǎn)生增多，清除能力卻下降，進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)自由基過剩，從而促進(jìn)機(jī)體的衰老，這就是經(jīng)典衰老的自由基理論［1］。有研究［2－5］表明，衰老的自由基理論是研究最徹底、得到認(rèn)可最多的衰老形成機(jī)制，其認(rèn)為機(jī)體內(nèi)的自由基產(chǎn)生和清除在正常情況下處于一種動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，既發(fā)揮了自由基的生物學(xué)作用，又避免了自由基過剩對(duì)機(jī)體造成的損害，然而當(dāng)機(jī)體隨著年齡的增長(zhǎng)，自由基的產(chǎn)生或清除過程出現(xiàn)反常行為時(shí)，就導(dǎo)致了體內(nèi)過剩的自由基，從而造成機(jī)體各種器官的衰老和功能喪失或消弱，例如當(dāng)機(jī)體的自由基清除劑SOD及GSH－Px水平下降時(shí)，體內(nèi)就會(huì)蓄積大量的自由基，這些過量的自由基可以造成機(jī)體生物膜的損傷，促進(jìn)脂質(zhì)過氧化的進(jìn)展，使體內(nèi) MDA水平升高，而MDA的升高既是機(jī)體氧自由基損傷的標(biāo)志，同時(shí)其本身也能對(duì)生物膜造成損傷。

本文結(jié)果顯示：3個(gè)處理組較衰老組大鼠心臟、大腦組織SOD、GSH－Px水平升高、MDA水平降低，提示丹紅注射液對(duì)衰老大鼠具有抗氧化作用，能降低脂質(zhì)過氧化程度，同時(shí)也進(jìn)一步驗(yàn)證了Vit E的抗氧化作用；丹紅注射液大劑量組和Vit E組的SOD、GSH－Px、MDA相似，而丹紅注射液小劑量組的SOD、GSH－Px低于前2組，MDA高于前2組，提示丹紅注射液的抗氧化作用具有一定的劑量依賴性，且一定量的丹紅注射液具有與Vit E相似的作用?？傊?，通過本研究我們可以發(fā)現(xiàn)，丹紅注射液對(duì)衰老大鼠具有抗氧化作用，這說明其可能通過抗氧化來發(fā)揮抗衰老作用。

［1］顧冰 .原花青素在D－半乳糖致衰老大鼠大腦、心臟組織中的抗氧化作用［J］.中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2011，14（22）：1－3.

［2］Li XM，Shi YH，Wang F，et al.In vitro free radical scavenging activities and effect of synthetic oligosaccharides on antioxidant enzymes and lipid peroxidation in aged mice［J］.J Pharm Biomed Anal，2007，43（1）：364－370.

［3］Li XM，Ma YL，Liu XJ.Effect of the Lycium barbarum polysaccharides on age－related oxidative stress in aged mice［J］.J Ethnopharmacol，2007，111（3）：504－511.

［4］Zhang R，Kang KA，Piao MJ，et al.Cytoprotective effect of the fruits of Lycium chinense Miller against oxidative stress－induced hepatotoxicity［J］.J Ethnopharmacol，2010，130（2）：299－306.

［5］李愛紅，陳鑫，郭愛松 .白靈菇真菌多糖對(duì)衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力、腦組織超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影響［J］.臨床神經(jīng)病學(xué)雜志，2012，25（2）：126－128.