王 娜 巫冠中

中國(guó)藥科大學(xué)藥理教研室 南京 210009

近年來(lái)氯氮平在糖脂代謝紊亂方面的不良反應(yīng)已受到高度重視，如肥胖及體質(zhì)量增加［1－2］、糖脂代謝異常和2型糖尿病等［3－4］。5－羥色胺（5－HT）在維持葡萄糖內(nèi)環(huán)境和調(diào)節(jié)脂代謝中起著重要作用，5－HT通過(guò)多種途徑參與血糖調(diào)控，研究結(jié)果顯示其具有降低血糖［5－7］和促進(jìn)脂代謝［8］的作用。氯氮平對(duì)5－HT1A、5－HT2C、5－HT2A 受體的親和力明顯高于氟哌啶醇和其他經(jīng)典藥物，而又較多引起糖尿?。?］，因此推測(cè)5－HT在抗精神病藥所致血糖升高中起一定的作用。

1 材料和儀器

1.1 材料 清潔級(jí)ICR小鼠，雄性，體質(zhì)量18～22g，購(gòu)自揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心，合格證號(hào)：SCXK（蘇）2007－0001。飼養(yǎng)溫度（22±2）℃，照明時(shí)間12h／d。普通飼料（南京市青龍山動(dòng)物飼養(yǎng)場(chǎng)）。

1.2 藥品及試劑 氯氮平片（上海信誼藥廠有限公司）、硫酸5羥色胺肌酐（南京奧多福尼生物科技有限公司）、葡萄糖試劑盒（上?？菩郎锛夹g(shù)研究所），總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白試劑盒（中生北控生物技術(shù)有限公司）、胰島素試劑盒（中生北控生物技術(shù)有限公司），其他試劑均為市售分析純。

2 方法

2.1 動(dòng)物的分組和給藥 雄性ICR小鼠，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后按照體質(zhì)量隨機(jī)分為6組，分別為空白對(duì)照組、氯氮平4mg／kg組、氯氮平20mg／kg組、5－HT 20mg／kg組、氯氮平4mg／kg＋5－HT 20mg／kg組和氯氮平20mg／kg＋5－HT 20mg／kg組，每組7只，各組小鼠的體質(zhì)量和基礎(chǔ)血糖值差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。氯氮平用0.5%的CMC－Na混懸，灌胃給藥1次／d，硫酸5－羥色胺肌酐溶于0.9%生理鹽水中，腹腔注射給藥1次／d。

2.2 口服糖耐量（OGTT）的測(cè)定 分別于給藥1周和4周時(shí)，禁食12h（8pm～8am），測(cè)定小鼠的空腹血糖，按各自劑量給藥的同時(shí)灌胃2mg／kg葡萄糖，分別在給藥前（0h）及給藥后0.5h、1h和2h眼眶采血，分離血清后用葡萄糖試劑盒測(cè)定血糖值。繪制糖耐量曲線，計(jì)算曲線下面積（（AUC＝0.25×空腹血糖＋0.5×30min血糖＋0.75×（30min血糖＋0.5×120min血糖））。

2.3 小鼠代謝指標(biāo)的測(cè)定 各組連續(xù)給藥28d，末次給藥后禁食12h（8pm～8am），麻醉后眼眶取血，分離血清，－20℃保存待測(cè)。葡萄糖氧化酶法測(cè)定小鼠血糖，甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL－C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）水平分別用試劑盒測(cè)定。胰島素的測(cè)定采用胰島素（INS）放射免疫分析藥盒進(jìn)行測(cè)定。胰島素 抵 抗 指 數(shù) 用 HOMA－IR 表 示，HOMA－IR＝ （FBG［mmol／L］x insulin［μIU／mL］）／22.5。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（BZ_15_1694_320_1782_360），以t檢驗(yàn)分析組間差異，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 氯氮平單用及與5－HT聯(lián)用對(duì)小鼠血糖的影響

3.1.1 給藥1周小鼠口服糖耐量實(shí)驗(yàn)（OGTT）：氯氮平4 mg／kg組在0.5h和1h時(shí)的血糖值較空白對(duì)照組有所升高差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），氯氮平20mg／kg組各時(shí)間點(diǎn)的血糖值均高于空白對(duì)照組，同時(shí)顯著增加曲線下面積（P＜0.001），其中0.5h和1h的血糖值較空白對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。5－HT＋氯氮平20mg／kg組血糖與氯氮平20mg／kg組相比各時(shí)間點(diǎn)的血糖值均有降低，0h和2 h的血糖值較氯氮平20mg／kg組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），同時(shí)顯著縮小曲線下面積（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 各組氯氮平單用及與5－HT聯(lián)用1周對(duì)小鼠OGTT的影響 （mmol／L，BZ_15_1694_320_1782_360）

3.1.2 給藥4周小鼠口服糖耐量實(shí)驗(yàn)（OGTT）：由表2可見(jiàn)，給藥4周后，與空白對(duì)照組相比，氯氮平4mg／kg組各時(shí)間點(diǎn)的血糖值差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，氯氮平20mg／kg組各時(shí)間點(diǎn)的血糖值均高于空白對(duì)照組，同時(shí)顯著增加曲線下面積（P＜0.01），其中0.5h的血糖值較空白對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。5－HT＋氯氮平4mg／kg組血糖與氯氮平4mg／kg組相比，0h、0.5h和1h時(shí)間點(diǎn)的血糖值均有降低，其中0.5h時(shí)血糖值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。5－HT＋氯氮平20mg／kg組血糖與氯氮平20mg／kg組相比各時(shí)間點(diǎn)的血糖值均有降低，0h和2h的血糖值較氯氮平20 mg／kg組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），同時(shí)顯著縮小曲線下面積（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 各組氯氮平單用及與5－HT聯(lián)用4周對(duì)小鼠OGTT的影響 （mmol／L，BZ_15_1694_320_1782_360）

3.2 氯氮平單用及與5－HT聯(lián)用對(duì)小鼠胰島素的影響 胰島素抵抗用 HOMA－IR評(píng)價(jià)，HOMA－IR值越大，表明機(jī)體對(duì)胰島素敏感性越低，胰島素抵抗程度越嚴(yán)重。如表3所示，與空白對(duì)照相比，給藥28d后，氯氮平20mg／kg組FINS及 HOMA－IR水平升高，5－HT＋氯氮平20mg／kg組與氯氮平20mg／kg組相比FINS及HOMA－IR水平均降低。

表3 各組氯氮平單用及與5－HT聯(lián)用對(duì)小鼠胰島素的影響 （BZ_15_1694_320_1782_360）

3.3 氯氮平單用及與5－HT聯(lián)用對(duì)小鼠血脂的影響 如表4所示，與空白對(duì)照組相比，氯氮平20mg／kg組可以顯著升高小鼠的TG、LDL－C（P＜0.01）和TC（P＜0.05）水平，而氯氮平4mg／kg組除可顯著升高TG（P＜0.05），對(duì)LDL－C、TC、HDL－C的影響差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與氯氮平4mg／kg組相比，5－HT＋氯氮平4mg／kg組對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)明顯影響；與氯氮平20mg／kg組相比，5－HT＋氯氮平20mg／kg組可降低TC和LDL－C水平（P＜0.05），且升高 HDL－C（P＜0.01）。

表4 各組氯氮平單用及與5－HT聯(lián)用對(duì)小鼠血脂的影響 （單位：mmol／L）（BZ_15_1694_320_1782_360，n＝7）

4 討論

氯氮平等非典型性抗精神病藥所引起的糖脂代謝紊亂是臨床治療中醫(yī)患共同需要關(guān)注的問(wèn)題。氯氮平引起的糖脂代謝紊亂的機(jī)制目前尚不明確，氯氮平對(duì)中樞多種神經(jīng)遞質(zhì)受體有親和性，對(duì)5－羥色胺（5－HT）、組胺（H1）、去甲腎上腺素（NE）α1、多巴胺（DA）等受體有不同程度的親和性，影響神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)活動(dòng)（降低胰島素敏感性，升高催乳素水平，瘦素抵抗）以及影響與調(diào)節(jié)進(jìn)食有關(guān)的肽類(lèi)物質(zhì)（NPY＼CRH）［10］。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，糖代謝方面，20mg／kg氯氮平在給藥1周后即可顯著影響小鼠的糖耐量，與單獨(dú)使用氯氮平組相比，5－HT與氯氮平合用可以顯著改善小鼠的糖耐量，曲線下面積減小，抑制血糖波動(dòng)，但是與空白對(duì)照組相比，血糖仍然升高，這可能是因?yàn)榉堑湫涂咕癫∷幰鸬难巧叱伺c其阻斷5－HT受體有關(guān)外，還與藥物對(duì)H 1、α1等受體的拮抗作用有關(guān)。胰島素抵抗是氯氮平造成血糖升高、糖耐量減退的主要原因，氯氮平與5－HT聯(lián)用，可顯著降低HOMAIR。脂代謝方面，氯氮平20mg／kg組可以顯著升高小鼠的TG、LDL－C和 TC水平；與5－HT合用后，可降低 TC和LDL－C水平，且升高HDL－C，起到改善脂代謝的作用。

氯氮平＋5－HT聯(lián)合組與氯氮平單用組小鼠的血糖、血脂、胰島素水平有顯著性差異，這其中的機(jī)制之一可能是5－HT對(duì)葡萄糖代謝［5－7］和攝食調(diào)節(jié)方面有著重要的影響［11－13］。目前就5－HT與血糖水平之間的關(guān)系，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，往肝門(mén)靜脈內(nèi)輸注5－HT或5－HTP都能增加凈肝葡萄糖攝?。∟HGU），且能抑制餐后高血糖，表示5－HT和5－HTP可能都能降低血糖［14］。Furman等［15］研究顯示，5－HTP能誘發(fā)劑量依賴性低血糖，同時(shí)伴有免疫源性胰島素（IRI）升高，考慮低血糖的發(fā)生可能是由于IRI升高所致。Yamada等［16］的研究也表明，5－HT能誘導(dǎo)正常小鼠低血糖發(fā)生，同時(shí)也伴有IRI釋放增加。此外，Tulipano G等［17］體外實(shí)驗(yàn)證明，氯氮平可以完全拮抗α－甲基－5－羥色胺（5－HT2A受體激動(dòng)劑）刺激大鼠骨骼肌葡萄糖攝取，這也進(jìn)一步證明了氯氮平拮抗5－HT受體是其導(dǎo)致糖脂代謝紊亂的重要原因。

綜上所述，氯氮平可以導(dǎo)致血糖升高、糖耐量減退、脂代謝紊亂，產(chǎn)生胰島素抵抗，5－HT可抑制氯氮平引起的血糖升高和脂代謝紊亂。本研究表明氯氮平引起的糖脂代謝紊亂，部分是由于其對(duì)5－HT受體的阻斷作用。值得注意的是，除5－HT外，氯氮平與H1、α1、DA等受體之間與其導(dǎo)致的糖脂代謝紊亂之間的關(guān)系仍需要進(jìn)一步的研究。

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