劉芳盈,王菲菲 ,丁明玉,李 杰 (.淄博市疾病預(yù)防控制中心環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測(cè)所,山東 淄博 5506；.中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院環(huán)境基準(zhǔn)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 000；.山東大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,山東 濟(jì)南 500)

燃煤細(xì)顆粒物對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy926的細(xì)胞毒性

劉芳盈1,王菲菲2*,丁明玉2,李 杰3(1.淄博市疾病預(yù)防控制中心環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測(cè)所,山東 淄博 255026；2.中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院環(huán)境基準(zhǔn)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100012；3.山東大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,山東 濟(jì)南 250012)

以銀川散煤為樣品煤,在實(shí)驗(yàn)室采用固定源稀釋通道采集燃煤 PM2.5,超聲波水浴提取燃煤 PM2.5全顆粒懸液,對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy926進(jìn)行染毒,并采用MTS法檢測(cè)燃煤PM2.5在不同染毒時(shí)間對(duì)EA.hy926細(xì)胞增殖的影響.結(jié)果表明,燃煤PM2.5懸液對(duì)EA.hy926細(xì)胞分別染毒6,12,24h均可抑制細(xì)胞增殖,且12,24h各劑量組和溶劑對(duì)照相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在相同染毒劑量組內(nèi),和6,12h相比,染毒24h對(duì)細(xì)胞存活率抑制更加明顯,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.可見,燃煤 PM2.5可以抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖且具有時(shí)間和劑量依賴性,血管內(nèi)皮損傷是PM2.5致心血管毒性的可能機(jī)制之一.

燃煤細(xì)顆粒物；PM2.5；血管內(nèi)皮細(xì)胞；EA.hy926；細(xì)胞毒性；MTS法

目前,中國(guó)許多大中城市,PM2.5污染十分嚴(yán)重.據(jù)報(bào)道,2005年中國(guó)的總懸浮顆粒物(TSP)、可吸入顆粒物(PM10)和細(xì)顆粒物(PM2.5)的排放量分別是 29.98,15.30,9.79Mt,2000～2005年間的排放增長(zhǎng)率分別是3.4%、4.7%和5.4%[1]. PM2.5主要來源于燃煤排放和汽車尾氣,目前我國(guó)的大氣污染雖然已從煤煙型大氣污染特征轉(zhuǎn)向煤煙和汽車尾氣復(fù)合型大氣污染特征,但仍以煤煙型污染為主[2-3].國(guó)家統(tǒng)計(jì)局發(fā)布的 2009年統(tǒng)計(jì)公報(bào)顯示,中國(guó)煤炭消費(fèi)量為3.02Gt,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于歐盟和世界平均水平[4].直到2050年,煤炭占我國(guó)占一次能源消費(fèi)比重仍會(huì)在 50%左右,主要利用方式為燃燒[5].燃煤排放的污染物以顆粒物為主,其中細(xì)顆粒物(PM2.5)貢獻(xiàn)較大.Dockery等[6]的研究結(jié)果顯示,空氣污染和心血管疾病死亡相關(guān),并且細(xì)顆粒物空氣污染與心肺疾病的死亡增加顯著相關(guān).Pope等[7]的研究結(jié)果表明,在控制各項(xiàng)混雜因素后,PM2.5年均濃度每增加10μg/m3,心血管疾病死亡率增加 8%,且死亡率與空氣動(dòng)力學(xué)粒徑＞2.5μm的顆粒物相關(guān)關(guān)系不明顯.可見, PM2.5可能是與心血管疾病相關(guān)的主要環(huán)境污染物之一.

研究顯示,PM2.5可到達(dá)細(xì)支氣管及肺泡,通過肺部氧化應(yīng)激炎癥反應(yīng)釋放炎癥因子和細(xì)胞因子介導(dǎo)心血管事件,部分組分(如水溶性過渡金屬等)甚至可以穿過肺泡間質(zhì)進(jìn)入循環(huán)產(chǎn)生直接影響心血管系統(tǒng)[8-10].血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC) 具有多種生理功能,血管內(nèi)皮損傷是許多心血管疾病的病理基礎(chǔ).人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞被廣泛用于內(nèi)皮功能的研究中,但 HUVEC原代培養(yǎng)較為耗時(shí),且易出現(xiàn)雜細(xì)胞的污染,傳2～3代后細(xì)胞就開始衰退,難以長(zhǎng)期維持,對(duì)于多種來源顆粒物血管內(nèi)皮細(xì)胞毒性比較研究中存在細(xì)胞數(shù)量和雜細(xì)胞干擾的限制. 因此,一般采用細(xì)胞株研究?jī)?nèi)皮功能.國(guó)內(nèi)相關(guān)研究中有采用ECV304細(xì)胞進(jìn)行顆粒物心血管毒性研究[11-13],但該株細(xì)胞已被證實(shí)為膀胱癌細(xì)胞派生來的上皮樣細(xì)胞而非血管內(nèi)皮細(xì)胞[14-16].實(shí)驗(yàn)選擇人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株EA.hy926作為研究細(xì)胞,EA.hy926是人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和A549融合的細(xì)胞株,是目前內(nèi)皮功能體外研究中最為認(rèn)可的細(xì)胞株[17].

細(xì)胞增殖毒性實(shí)驗(yàn)常規(guī)選擇MTT法.MTT是一種四唑類化合物,自20世紀(jì)80年代出現(xiàn)并得到了廣泛應(yīng)用.此法的主要原理是活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍(lán)紫結(jié)晶物formazan,并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞則無此功能[18].MTS是一種新合成的四唑類化合物,與MTT的應(yīng)用原理相同. MTS被還原后生成的甲瓚產(chǎn)物顏色較深,還原產(chǎn)物穩(wěn)定,且為水溶性物質(zhì),可直接測(cè)定,無需有機(jī)溶劑溶解[19].可見,在對(duì)多種樣品細(xì)胞毒性比較中,MTS試劑盒相比傳統(tǒng)MTT法具有方法簡(jiǎn)便及檢測(cè)狀態(tài)穩(wěn)定的特點(diǎn),細(xì)胞毒性比較結(jié)果更為準(zhǔn)確.實(shí)驗(yàn)選擇銀川散煤為樣煤采集細(xì)顆粒物,以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy926為研究對(duì)象,采用MTS法檢測(cè)不同濃度燃煤PM2.5分別在染毒6,12,24h后對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的毒性作用,為進(jìn)一步探討燃煤PM2.5對(duì)心血管毒性機(jī)制奠定基礎(chǔ).

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞株EA.hy926購(gòu)自美國(guó)ATCC細(xì)胞庫(kù),增殖周期約為31h.

1.1.2 儀器 PM2.5撞擊式中流量顆粒物采樣器(78L/min),METTLER TOLEDO 分析天平(梅特勒-托利多儀器公司,AL104-IC),超聲震蕩儀(江蘇昆山市超聲儀器公司,舒美 KQ500DB),真空冷凍干燥機(jī)(北京亞泰科隆公司,LGJ-18),生物安全柜(美國(guó) Thermo Forma公司),CO2恒溫培養(yǎng)箱(美國(guó)Thermo Forma公司),倒置顯微鏡(日本OLYMPUS公司,TH4-200),D-1型自動(dòng)蒸汽滅菌鍋(北京發(fā)恩科貿(mào)有限公司),Model 680型酶標(biāo)儀(美國(guó) Bio-Rad 公司).

1.1.3 試劑 DMEM培養(yǎng)液(美國(guó) HyClone公司),胎牛血清(美國(guó) HyClone公司),磷酸鹽緩沖液 PBS(美國(guó) HyClone 公司),雙抗青霉素-鏈霉素(華北制藥公司),胰蛋白酶(美國(guó) Sigma公司),MTS試劑盒(美國(guó)Promega公司),石英纖維采樣濾膜(美國(guó)PALL公司).

1.2 方法

1.2.1 燃煤PM2.5的采樣 采樣時(shí)間為2009年11月,采樣地點(diǎn)在中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院氣溶膠實(shí)驗(yàn)室,以銀川散煤為樣煤,采用 PM2.5撞擊式中流量顆粒物采樣器(78L/min)和直徑90mm的石英纖維濾膜,利用固定源稀釋通道對(duì)燃煤排放細(xì)顆粒物進(jìn)行直接采集.采樣時(shí),將銀川散煤塊加工到3～5cm,用焦炭引火,待火焰穩(wěn)定后將采樣通道和燃煤爐連接.然后將已稱量好的煤塊均勻的放于爐內(nèi),同時(shí)開泵開始采樣,直到燃盡,記錄開始5min時(shí)采樣流量和結(jié)束前5min時(shí)采樣流量.石英纖維濾膜采樣前要在馬弗爐中 600℃灼燒 2h,恒溫干燥24h后稱重并用灼燒后的鋁箔包裝,采樣后用鋁箔紙包裝好并在同樣條件下平衡24h,-20℃避光保存.

1.2.2 燃煤 PM2.5的提取和染毒液配制 將載有燃煤 PM2.5的石英纖維濾膜,采樣面朝下置于50mL去離子水中,超聲震蕩 30min×2次(功率500W)以洗脫顆粒物.提取液8層紗布過濾,除去石英纖維濾膜碎片.將濾液分裝到已消毒小瓶中,5mL/瓶,真空冷凍干燥成干粉,稱重后用滅菌PBS配制成100,250,500,1000,2000μg/mL的顆粒物懸液作為染毒母液,于-20℃避光保存?zhèn)溆?

1.2.3 血管內(nèi)皮細(xì)胞EAhy926的培養(yǎng) 將凍存的EA.hy926細(xì)胞移入于含20%胎牛血清、1%雙抗的DMEM培養(yǎng)液中,在37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)復(fù)蘇.待細(xì)胞達(dá)到80%融合時(shí),以0.25%胰酶消化,1:3傳代,用含 10%胎牛血清、1%雙抗的DMEM培養(yǎng)液,在37℃、5%CO2條件下傳代培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期.

1.2.4 細(xì)胞染毒和實(shí)驗(yàn)分組 取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的生長(zhǎng)良好的細(xì)胞,用含 10% 胎牛血清、1%雙抗的 DMEM 培養(yǎng)液將細(xì)胞濃度調(diào)整成3×105/mL細(xì)胞懸液,以每孔100μL接種于96孔板,在37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)24h.將染毒母液超聲震蕩 15min,加入含 0.5% 胎牛血清的DMEM 培養(yǎng)液十倍稀釋[20],終濃度為 10,25,50, 100,200μg/mL,以 PBS為陰性對(duì)照.臨用前超生15min,棄去培養(yǎng)板中原培養(yǎng)液,加入已配制好的染毒液,每個(gè)劑量設(shè)置6個(gè)平行樣.

1.2.5 MTS毒性實(shí)驗(yàn)[20]采用MTS法檢測(cè)細(xì)胞增殖毒性.細(xì)胞染毒結(jié)束前1h分別加入20μL/孔的MTS,將96孔板用鋁箔紙包好后置于37℃孵箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng) 1h,終止培養(yǎng).用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀490 nm測(cè)吸光度OD(參考波長(zhǎng)630 nm,檢測(cè)波長(zhǎng)490nm).實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次后整理分析數(shù)據(jù).按下列公式計(jì)算細(xì)胞存活率:細(xì)胞存活率(%)=OD實(shí)驗(yàn)組/OD對(duì)照組×100%.

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示.多個(gè)樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析,根據(jù)方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果,方差齊性時(shí)選擇LSD法,方差不齊時(shí)選擇Tamhane’s T2法.

2 結(jié)果

2.1 燃煤PM2.5對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞毒性的劑量-反應(yīng)關(guān)系

由表1及圖1可見,燃煤PM2.5作用于EA. hy926細(xì)胞6h,在0～25μg/mL劑量范圍內(nèi)可能存在低劑量興奮效應(yīng),輕微促進(jìn)了細(xì)胞增殖(100%～103.71%),在 50～200μg/mL劑量范圍內(nèi)出現(xiàn)了小幅度的抑制增值(99.92%～96.94%).但各劑量組與陰性對(duì)照組相比,差異均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

表1 不同染毒時(shí)間燃煤PM2.5對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞毒性的比較(n＝6)Table 1 Compared cytotoxicity of coal-fired PM2.5 on EA.hy926 cells exposed for different times(n＝6)

燃煤PM2.5作用于EA.hy926細(xì)胞12h,明顯抑制了細(xì)胞活性,且隨著染毒劑量的增加,細(xì)胞存活率下降越明顯(93.09%～87.88%),呈劑量-反應(yīng)關(guān)系.與陰性對(duì)照組相比,50μg/mL(P＜0.05)、100μg/mL(P＜0.01)和 200μg/mL(P＜0.01)劑量組的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

燃煤PM2.5作用于EA.hy926細(xì)胞24h,細(xì)胞活性抑制程度明顯,且隨著染毒劑量的增加,細(xì)胞存活率下降更加明顯(93.39%～78.04%),呈劑量-反應(yīng)關(guān)系.各劑量組與陰性對(duì)照組相比,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01).

圖1 燃煤PM2.5對(duì)EA.hy926細(xì)胞毒性的劑量-反應(yīng)曲線Fig.1 Dose-effect curve of cytotoxicity of coal-fired PM2.5 on EA.hy926 cells

2.2 燃煤 PM2.5對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞毒性的時(shí)間依賴性關(guān)系

如表 1所示,在同一染毒劑量組內(nèi),10μg/mL劑量組在6,12,24h對(duì)EA.hy926細(xì)胞活性的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;25,50μg/mL劑量組和染毒12h相比,染毒6h對(duì)EA.hy926細(xì)胞活性的差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01或 P＜0.05),而染毒 24h對(duì) EA. hy926細(xì)胞活性的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;100, 200μg/mL劑量組在不同染毒時(shí)間組細(xì)胞存活率結(jié)果的差異均有顯著意義(P＜0.01或P＜0.05).

可見,燃煤PM2.5作用于EA.hy926細(xì)胞,相同染毒時(shí)間時(shí),隨著染毒劑量的增加,細(xì)胞活性抑制程度越高,具有劑量-反應(yīng)關(guān)系;相同染毒劑量時(shí),隨著染毒時(shí)間的增加,細(xì)胞活性抑制程度越高,具有時(shí)間依賴性關(guān)系關(guān)系.綜上所述,染毒劑量越大,染毒時(shí)間越長(zhǎng),燃煤PM2.5對(duì)EA.hy926細(xì)胞活性抑制越明顯,存在時(shí)間依賴和劑量依賴關(guān)系.

3 討論

近年來的一些研究發(fā)現(xiàn),PM2.5對(duì)心血管系統(tǒng)的毒作用可能是其人群健康危害的主要原因,顆粒物引起的心臟病死亡遠(yuǎn)高于呼吸系統(tǒng)的死亡[8,21-23].美國(guó)ANA于2011年綜述100多項(xiàng)研究結(jié)果顯示PM2.5急性或慢性暴露每增加10μg/m3,心血管疾病死亡危險(xiǎn)會(huì)顯著增加(慢性相對(duì)危險(xiǎn)度:1.06～1.76).其中,缺血性心臟病、心率失常、心力衰竭和心臟驟停占主要部分;健康效應(yīng)機(jī)制主要包括肺部炎性反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化加速及自主神經(jīng)功能紊亂[24].而動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是心血管系統(tǒng)疾病中最常見的疾病,也是眾多心腦血管疾病共同的病理基礎(chǔ).現(xiàn)在血管內(nèi)皮的損傷幾乎被公認(rèn)為是 AS發(fā)生的始動(dòng)環(huán)節(jié),血管內(nèi)皮損傷引發(fā)血栓形成是許多心血管病的病理基礎(chǔ).PM誘導(dǎo)的炎癥可以作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞, 導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙,從而加速AS進(jìn)展,可能是顆粒物污染和心血管死亡之間關(guān)系的基礎(chǔ)[25].

目前PM2.5對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞毒理學(xué)研究尚不多,對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)間依賴性的研究更為少見.但已有結(jié)果均表現(xiàn)出PM2.5對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞毒性存在劑量和時(shí)間依賴性.Zhao等[26]將大氣 PM2.5水溶及有機(jī)組分暴露于 HUVECs 24h,結(jié)果顯示水溶及有機(jī)組分均抑制了細(xì)胞生長(zhǎng)且水溶組分抑制作用更強(qiáng),并具有劑量反應(yīng)關(guān)系.Han等[27]研究發(fā)現(xiàn),大氣PM2.5懸浮液、水溶組分和水不溶組分暴露于EA.hy926細(xì)胞24h后,分別抑制了細(xì)胞增殖且存在劑量-反應(yīng)關(guān)系.Mo等[28]研究顯示,大鼠肺動(dòng)脈微血管內(nèi)皮細(xì)胞(MPMVEC)暴露于UFP 12,24,36,48,72h后,12h沒有明顯的毒性,但從 24h開始均顯示了明顯的細(xì)胞毒性且存在時(shí)間反應(yīng)關(guān)系.本研究結(jié)果顯示染毒 6h對(duì) EA. hy926細(xì)胞無明顯毒性,但在12h、24h均顯示出明顯的細(xì)胞毒性,并具有時(shí)間依賴性.兩項(xiàng)研究中出現(xiàn)明顯細(xì)胞毒性的時(shí)間略有差異的原因可能是因?yàn)槿济篜M2.5富集了更多的過渡金屬和有機(jī)成分,更易誘導(dǎo)過氧化損傷[29],介導(dǎo)血管內(nèi)皮損傷.鄭燦軍等[30]采用原代培養(yǎng)的大鼠心肌細(xì)胞,以細(xì)胞存活率為指標(biāo),觀察到PM 及其組分對(duì)心肌細(xì)胞的hormesis效應(yīng),即低劑量刺激(低濃度時(shí)細(xì)胞活力隨劑量的增加而上升),而高劑量時(shí)抑制心肌細(xì)胞的活力(高濃度時(shí),細(xì)胞活力隨劑量增加而降低).本研究中銀川燃煤 PM2.5作用于EA.hy926細(xì)胞6h后,在10和25μg/mL 2個(gè)劑量組觀察到輕微促進(jìn)增殖作用,但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;且染毒 12,24h,燃煤 PM2.5的作用均表現(xiàn)為抑制增殖.燃煤 PM2.5對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞是否存在hormesis效應(yīng),仍需進(jìn)一步探索研究.

顆粒物是一種復(fù)雜混合物體,不同來源的顆粒物由于形成條件和化學(xué)組分不同,其對(duì)健康的影響性質(zhì)和程度也不相同.銀川市采暖期 PM2.5中各種無機(jī)離子和重金屬元素(Fe、Zn、Cd、Pb等)高度富集,顯著高于非采暖期,說明冬季燃煤對(duì)重金屬元素貢獻(xiàn)明顯[31].Ni、Zn、Pb、Co、Fe、As、Cd、Cr等嚴(yán)重危害人體健康的有害重金屬元素高度富集在 PM2.5上[31].研究表明,燃煤顆粒物中富含F(xiàn)e等金屬元素,可誘導(dǎo)豚鼠肺泡巨噬細(xì)胞產(chǎn)生活性氧自由基,引起脂質(zhì)過氧化損傷[29,32].目前大氣顆粒物對(duì)心血管健康效應(yīng)的研究剛剛開展,燃煤源顆粒物成分更為復(fù)雜,有害元素及成分高度富集,但燃煤源顆粒物心血管健康效應(yīng)研究尚處起步,其健康效應(yīng)毒性機(jī)制尚待探討.本研究在體外培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基礎(chǔ)上,觀察了不同染毒劑量和時(shí)間燃煤 PM2.5對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞EA.hy926的毒性作用,結(jié)果顯示隨著染毒劑量增大,燃煤PM2.5可抑制EA.hy926細(xì)胞增殖,具有劑量-反應(yīng)關(guān)系;且染毒時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞存活率顯著降低.這初步顯示燃煤 PM2.5可引起血管內(nèi)皮損傷,其損傷機(jī)制仍需進(jìn)一步探索.

4 結(jié)論

4.1 燃煤PM2.5染毒EA.hy926不同時(shí)間后均對(duì)EA.hy926細(xì)胞活性產(chǎn)生抑制且存在劑量-反應(yīng)關(guān)系.

4.2 相同劑量組比較, 燃煤 PM2.5對(duì) EA.hy926細(xì)胞活性存在時(shí)間依賴關(guān)系,即染毒時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞活性抑制越明顯.

4.3 血管內(nèi)皮損傷可能是燃煤 PM2.5致心血管毒性機(jī)制之一,但仍需深入探討.

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Cytotoxicity assessment of fine particles from coal combustion on EA. hy926 vascular endothelial cells.

LIU Fang-ying1, WANG Fei-fei2*, DING Ming-yu2, LI Jie3(1.Zibo Municipal Center For Disease Control and Prevention, Zibo 255026, China；2.State Key Laboratory of Environmental Criteria and Risk Assessment, Chinese Research Academy of Environmental Sciences, Beijing 100012, China；3.School of Public Health, Shandong University, Jinan 250012, China). China Environmental Science, 2012,32(1)：156～161

The coal sample taken from Yinchuan, coal-fired PM2.5was sampled by fixed source dilution channel and PM2.5suspension was extracted by ultrasonic water-bath method. Human umbilical vein endothelial cells were treated with PM2.5suspension at various concentrations and exposed for different times (6h, 12h, and 24h). The MTS assay was used to measure the effect of PM2.5on cell proliferation of EA. hy926. Coal-fired PM2.5suspension decreased the viability of vascular endothelial cells at different times and exposure time groups of 12h and 24h showed significance statistically in comparison to the solvent control. Compared with the same concentration group of 12h and 6h, exposure time groups of 24h had statistically significant differences. Coal-fired PM2.5could significantly decrease the viability of hman umbilical vein endothelial cells in dose-dependent and time-dependent manner. Vascular endothelial injury might be one of the possible mechanisms of cardiovascular toxicity caused by coal-fired PM2.5.

coal fine particles；PM2.5；vascular endothelial cell；EA.hy926；cytotoxicity；MTS assay

2011-03-21

中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)專項(xiàng)(2009KYYW05)

* 責(zé)任作者, 助理研究員, wangff@craes.org.cn

X111.5

A

1000-6923(2012)01-0156-06

劉芳盈(1984-),男,山東東營(yíng)人,碩士,研究方向?yàn)榄h(huán)境毒理學(xué).發(fā)表論文2篇.