王愛萍 鄭茂東 趙秀花 顏 娟 王曉云
(河北北方學院附屬第一醫(yī)院藥劑科,河北 張家口 075000)
銀紫消癜湯中綠原酸提取工藝的研究
王愛萍 鄭茂東 趙秀花 顏 娟 王曉云
(河北北方學院附屬第一醫(yī)院藥劑科,河北 張家口 075000)
分光光度法,紫外線;綠原酸;分析;金銀花;蒲公英;湯劑
1.1 儀器與試劑 TU-1901紫外分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司);BS210S電子天平(北京賽多利斯儀器有限公司);綠原酸對照品(購自中國藥品生物制品檢定所);金銀花、蒲公英(購自河北省張家口市張垣飲片有限公司),實驗用試劑均為分析純。銀紫消癜湯藥物組成:金銀花30 g,紫草30 g,蒲公英20 g,連翹15 g,紫花地丁15 g,茜草20 g,白茅根20 g,生槐花15 g,生地榆15 g,甘草10 g。
1.2 方法
1.2.1 因素、水平的確定 根據制備工藝中影響提取的因素及中藥材傳統(tǒng)提取經驗[2-3],確定考察因素為提取次數、提取時間、提取溫度及加水量,采用L6(34)正交表安排試驗。因素及水平見表1。
表1 因素水平
1.2.2 綠原酸的提取 精密稱取樣品9份,每份20 g,按正交試驗設計,進行水浴提取,提取液過濾得供試液,備用。共進行3次重復試驗。
1.2.3 綠原酸的含量測定
1.2.3.1 測定波長的選擇[4]取樣品供試液10 mL于25 mL量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度,作為供試品溶液。另取綠原酸對照品5.0 mg于25 mL量瓶中,加無水乙醇至刻度,作為對照品溶液。以無水乙醇為空白,將供試品溶液和對照品溶液分別在紫外可見分光光度計上進行光譜掃描,測得兩者的最大吸收在327 nm處,故選擇檢測波長為327 nm。
1.2.3.2 工作曲線制備與樣品測定 精密吸取綠原酸對照品溶液1.5、3.0、4.5、6.0、7.5、9.0 mL分別置25 mL量瓶中,加無水乙醇至刻度,混勻。按分光光度法,在327 nm處測定吸光度。以吸光度A為縱坐標,質量濃度 C (mg/mL)為橫坐標,進行線性回歸。其回歸方程為A=8.88 C+0.106,r=0.999 1(n=6)。取供試品溶液依法在327 nm處測定吸光度,代入回歸方程,計算綠原酸含量。
L6(34)正交試驗結果見表2。
表2 L6(34)正交試驗結果
由表2可見,以綠原酸為考察指標時,銀紫消癜湯中綠原酸提取工藝的影響規(guī)律為A>C>B>D,A因素對提取工藝的影響非常顯著,即提取次數是影響提取工藝最大的因素。通過正交實驗銀紫消癜湯中綠原酸提取工藝的最佳條件為A3B3C2D3,即提取3次、提取時間為40 min、提取溫度為60℃、加水量為藥材16倍量。
在金銀花等處理過程中,溫度應控制在90℃以下,加熱時間在1 h以內,選用蒸餾水,能有效地提高綠原酸的含量,防止其分解破壞,影響臨床用藥效果在此基礎上通過正交試驗法對中綠原酸的提取工藝進行了優(yōu)化,正交結果分析后得到最佳因素水平為A3B3C2D3,即提取3次、提取時間為40 min、提取溫度為60℃、加水量為藥材16倍量。
[1]劉小銳,朱國麗,賈紅麗,等.羅布麻愈傷組織中綠原酸的提取與測定[J].藥物分析雜志,2009,29(12):2116-2119.
[2]劉圣,陳禮明,李矗,等.正交試驗優(yōu)選-大孔樹脂分離葛根總黃酮工藝[J].中國醫(yī)院藥學雜志,2006,26(6):664-666.
[3]黃真,胡瑛瑛.正交試驗法優(yōu)選三葉青中總黃酮的提取工藝[J].中國現代應用藥學,2008,25(1):34-36.
[4]李娜,高曉燕,范強,等.金銀花提取液中綠原酸的快速定量[J].中國中藥雜志,2007,32(4):312-314.
R284.1;R289.5;R916.4
A
1002-2619(2012)08-1220-02銀紫消癜湯由金銀花、連翹、蒲公英、紫草、甘草等多種中藥組成,具涼血活血祛瘀、清熱解毒之效,可有效治療過敏性紫癜及預防其復發(fā)。方中主藥金銀花、蒲公英均含綠原酸,綠原酸是許多中草藥及中藥復方制劑抗菌、抗病毒、清熱解毒的主要活性成分,目前已成為中藥制劑質量控制的主要指標之一[1]。故以綠原酸為檢測指標,考察了不同提取次數、提取溫度、提取時間以及加水量對其含量的影響,確保銀紫消癜湯的質量。
王愛萍(1974—),女,主管藥師,學士。研究方向:藥物分析及醫(yī)院制劑。
2012-04-27)