張君孝， 王晨亮， 黃美近， 傅新暉， 盧碧燕， 鄧艷紅△， 劉煥亮△

(1 中山大學(xué)胃腸病學(xué)研究所，2 中山大學(xué)附屬第六醫(yī)院，廣東 廣州510655)

伊立替康(irinotecan，CPT－11)是喜樹堿半合成衍生物，在體內(nèi)經(jīng)羧酸酯酶(carboxylesterases，CE)水解轉(zhuǎn)化為7－乙基－10－羥基喜樹堿(7－ethyl－10－h(huán)ydroxy－camptothecin，SN－38)，SN－38 為DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ抑制劑，作用于細(xì)胞周期S 期，抑制DNA 單鏈斷裂后的修復(fù)，干擾DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng)［1］。伊立替康是目前治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌(metastatic colorectal cancer，mCRC)最有效的化療藥物之一［2］。國外臨床研究表明采用伊立替康為基礎(chǔ)的化療方案可以提高患者的化療有效率、無疾病進(jìn)展生存時(shí)間(progression－free survival，PFS)和總生存時(shí)間(overall survival，OS)［3－4］。

雖然伊立替康治療mCRC 的效果較好，但是由于可能發(fā)生嚴(yán)重的血液毒性和消化道毒性而應(yīng)用受到限制。伊立替康的劑量依賴性毒性主要為遲發(fā)性腹瀉和中性粒細(xì)胞減少，兩者發(fā)生率分別可達(dá)到約46%和30%，甚至可以導(dǎo)致患者死亡［3］，其中藥物代謝的遺傳多態(tài)性是造成個(gè)體間不良反應(yīng)差異的主要因素之一。伊立替康在體內(nèi)的主要代謝部位為肝臟，經(jīng)靜脈注射后，在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性更強(qiáng)的活性代謝產(chǎn)物SN－38，SN－38 經(jīng)尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶家族(uridine diphosphate glucuronosyltransferases，UGTs)滅活為葡萄糖醛酸產(chǎn)物SN－38G 后，經(jīng)膽汁排泄進(jìn)入腸道，在腸道細(xì)菌β－葡萄糖醛酸酶(β－glucuronidase)作用下轉(zhuǎn)換為SN－38，引發(fā)腸黏膜損傷及遲發(fā)性腹瀉;而腸道內(nèi)的UGTs 酶又可再度催化SN－38 為SN－38G 進(jìn)行解毒，UGTs 酶的表達(dá)及其活性，與伊立替康的療效及不良反應(yīng)密切相關(guān)［5］。

國外臨床研究表明在高加索人群應(yīng)用伊立替康的患者中，UGT1A1 基因啟動(dòng)子區(qū)TATA 重復(fù)序列的變化即UGT1A1*28 的雜合突變型TA6/7 和純合突變型TA7/7 顯著增加患者發(fā)生嚴(yán)重粒細(xì)胞減少和腹瀉的風(fēng)險(xiǎn)［6－7］。然而UGT1A1*28 基因多態(tài)性的分布存在著明顯的種族差異，UGT1A1*28 的純合突變型TA7/7 在亞洲人中僅為0%～5%［8－9］，遠(yuǎn)低于在非洲人和高加索人中的頻率12% ～27% 和5% ～15%［10］。因此，UGT1A1*28 基因多態(tài)性能否作為在中國患者中的不良反應(yīng)預(yù)測指標(biāo)存在爭議。另外，近年的研究顯示在亞洲人群應(yīng)用伊立替康進(jìn)行治療的患者中UGT1A1*6(第1 外顯子211 位)雜合突變型G/A 和純合突變型A/A 顯著增加患者發(fā)生3 ～4級中性粒細(xì)胞減少、血小板減少及腹瀉的風(fēng)險(xiǎn)［11－14］。UGT1A1*6 突變在亞洲人群中的發(fā)生率高達(dá)13%～23%［10］，我們認(rèn)為預(yù)測中國患者不良反應(yīng)的發(fā)生應(yīng)綜合考慮UGT1A1*6 和UGT1A1*28 位點(diǎn)基因多態(tài)性的影響。本研究通過對207 例消化道腫瘤患者的UGT1A1*6 和UGT1A1*28 基因多態(tài)性進(jìn)行檢測，探討UGT1A1 基因多態(tài)性在中國人群中的分布，并對其中56 例采用含伊立替康方案化療的mCRC 患者情況進(jìn)行分析，探討UGT1A1 基因多態(tài)性與伊立替康化療的不良反應(yīng)和療效之間的關(guān)系。

材 料 和 方 法

1 材料

收集2010 年4 月至2012 年3 月期間在我院做基因檢測的207 例消化道腫瘤患者的外周血樣標(biāo)本，進(jìn)行UGT1A1*6 和UGT1A1*28 基因多態(tài)性的檢測。觀察記錄其中56 例采用含伊立替康方案化療的mCRC 患者在化療中出現(xiàn)不良反應(yīng)的情況、腫瘤進(jìn)展時(shí)間及化療療效。56 例患者中男35 例，女21例，均為漢族，年齡21 ～78 歲(中位年齡55.5 歲)?；颊呔?jīng)病理和(或)CT 證實(shí)為mCRC，無合并嚴(yán)重心、肺、肝、腎及造血功能障礙;無黃疸及消化道梗阻;未伴發(fā)急性感染;Karnofsky Performance Status(KPS)評分90 ～100 分43 例，70 ～80 分13 例;均采用二線化療方案，其中采用FOLFIRI 方案33 例，XELIRI 方案8 例，靶向藥物+FOLFIRI 方案11 例，靶向藥物+XELIRI 方案4 例。

2 方法

2.1 UGT1A1 基因分型 化療前收集患者血液2 mL 抗凝，采用RelaxGene Blood DNA System 試劑盒(北京天根生化科技有限公司)，嚴(yán)格按照說明書操作分批次統(tǒng)一提取基因組DNA，并測定濃度。PCR擴(kuò)增UGT1A1 基因的目的片段，擴(kuò)增引物序列為:正向引物5’－TCCCTGCTACCTTTGTGGAC－3’，反向引物5’－ATGGCACAGGGTACGTCTTC－3’;PCR 反應(yīng)采用40 μL 體系包括DNA 模板10 ng(2 μL)，PCR mix 預(yù)混液(上?；巧锟萍加邢薰?20 μL，ddH2O 14 μL 及正向引物和反向引物各2 μL;反應(yīng)條件為:初始變性94 ℃5 min，94 ℃30 s，64 ℃30 s，72 ℃30 s，共40 個(gè)循環(huán)，最后72 ℃7 min。電泳觀察PCR 產(chǎn)物是否清晰單一，符合標(biāo)準(zhǔn)后送上海英駿生物技術(shù)有限公司進(jìn)行直接測序。UGT1A1*28 測序引物為:5’－ ATGGCACAGGGTACGTCTTC－3’;UGT1A1*6 測序引物為:5’－ ACCTCTGGCAGGAGCAAAG－3’。測序結(jié)果采用DNAStar 軟件顯示，人工校讀分析UGT1A1*28 和UGT1A1*6 基因型。

2.2 數(shù)據(jù)收集 在每一個(gè)化療周期，通過查閱病史、體格檢查、影像學(xué)檢查和常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢查(包括生化檢查、血液檢查和腫瘤標(biāo)志物檢查)對患者的不良反應(yīng)、化療療效進(jìn)行評估并記錄腫瘤進(jìn)展時(shí)間(time to progression，TTP)。

2.3 藥物毒性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 依據(jù)美國國立癌癥研究所(National Cancer Institute，NCI)提出的NCI－CTC Classification (Version 3.0)對藥物的毒性進(jìn)行評價(jià)和分級。

2.4 療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 依據(jù)美國國立癌癥研究所提出的實(shí)體腫瘤療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors，RECIST)進(jìn)行療效評價(jià)。

2.5 研究終點(diǎn)和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 主要研究終點(diǎn)為腫瘤進(jìn)展時(shí)間，次要研究終點(diǎn)為化療方案反應(yīng)率、總生存時(shí)間和不良反應(yīng)事件。應(yīng)用SPSS17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同基因型之間不良反應(yīng)和療效的比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher’s 精確概率法，生存分析采用Kaplan－Meier 方法，不同基因型之間腫瘤進(jìn)展時(shí)間的比較采用log－rank 檢驗(yàn)，以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 UGT1A1* 28 基因多態(tài)性分布情況

本組207 例患者中，164 例(79.2%)UGT1A1 基因啟動(dòng)子區(qū)TA 序列呈6 次重復(fù)，為野生型TA6/6;41 例(19.8%)基因型為TA 序列6 次和7 次重復(fù)的雜合突變型TA6/7;2 例(1.0%)基因型為TA 序列7次重復(fù)的純合突變型TA7/7。56 例接受伊立替康化療的mCRC 患者中，47 例(83.9%)為野生型TA6/6;8 例(14.3%)為雜合突變型TA6/7;1 例(1.8%)為純合突變型TA7/7;基因型分布與總體207 例分布相似(P ＞0.05)。多態(tài)性測序結(jié)果見圖1。

2 UGT1A1* 6(第1 外顯子211 位)基因多態(tài)性分布情況

本組207 例患者中，154 例(74.4%)UGT1A1 基因第1 外顯子211 位為野生型G/G;51 例(24. 6%)UGT1A1 基因第1 外顯子211 位為雜合突變型G/A;2例(1.0%)UGT1A1 基因第1 外顯子211 位為純合突變型A/A。56 例接受伊立替康化療的mCRC 患者中，38 例(67.9%)為野生型G/G;18 例(32.1%)為雜合突變型G/A;基因型分布與總體207 例分布相似(P ＞0.05)。多態(tài)性測序結(jié)果見圖2。

Figure 1. Representative sequencing diagram of UGT1A1* 28 genotypes.A:TA6/6 wild－type genotype;B:TA 6/7 heterozygous genotype;C:TA7/7 homozygous genotype.圖1 UGT1A1* 28 3 種基因型TA6/6、TA6/7 和TA7/7 的代表性測序圖

Figure 2. Representative sequencing diagram of UGT1A1* 6 genotypes.A:G/G wild－type genotype;B:G/A heterozygous genotype;C:A/A homozygous genotype.圖2 UGT1A1* 6 3 種基因型G/G、G/A 和A/A 的代表性測序圖

3 mCRC 患者UGT1A1 基因型和藥物不良反應(yīng)情況

56 例患者中，UGT1A1*28 野生型(TA6/6)47例，其中出現(xiàn)3 ～4 級腹瀉9 例;3 ～4 級白細(xì)胞減少8例;3 ～4 級中性粒細(xì)胞減少16 例;3 ～4 級血紅蛋白減少8 例;3 ～4 級血小板減少1 例;UGT1A1*28 突變型(TA6/7 和TA7/7)9 例，其中出現(xiàn)3 ～4 級腹瀉1 例;3 ～4 級白細(xì)胞減少3 例;3 ～4 級中性粒細(xì)胞減少6 例;3 ～4 級血紅蛋白減少3 例;3 ～4 級血小板減少3 例;UGT1A1*6 野生型G/G 38 例，其中出現(xiàn)3～4 級腹瀉3 例;3 ～4 級白細(xì)胞減少6 例;3 ～4 級中性粒細(xì)胞減少11 例;3 ～4 級血紅蛋白減少6 例;3 ～4 級血小板減少4 例;UGT1A1*6 突變型(G/A 和A/A)18 例，其中出現(xiàn)3 ～4 級腹瀉7 例;3 ～4 級白細(xì)胞減少5 例;3 ～4 級中性粒細(xì)胞減少11 例;3 ～4 級血紅蛋白減少5 例。統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，UGT1A1*28 突變型可以增加患者發(fā)生3 級以上血小板減少的風(fēng)險(xiǎn)，UGT1A1*6 突變型可以增加患者發(fā)生3 級以上腹瀉和中性粒細(xì)胞減少的風(fēng)險(xiǎn)，見表1。

4 mCRC 患者UGT1A1 基因型與療效的關(guān)系

56 例接受伊立替康化療的mCRC 患者中，療效在UGT1A1 各基因型之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表1 UGT1A1 基因型和藥物不良反應(yīng)情況Table 1. Adverse drug reaction in different UGT1A1 genotypes

表2 UGT1A1 各基因型的療效情況Table 2. Response to treatment with regard to UGT1A1 genotypes

5 腫瘤進(jìn)展時(shí)間與UGT1A1 基因型之間的關(guān)系

UGT1A1*28 野生型(TA6/6)和突變型(TA6/7和TA7/7)的中位腫瘤進(jìn)展時(shí)間分別為8.8 個(gè)月和8.1 個(gè)月，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05);UGT1A1*6野生型(G/G)和突變型(G/A 和A/A)的中位腫瘤進(jìn)展時(shí)間分別為10.8 個(gè)月和8.1 個(gè)月，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)，見圖3。

討 論

伊立替康不良反應(yīng)的發(fā)生存在明顯的個(gè)體差異，UGT1A1 是伊立替康在體內(nèi)代謝的最主要代謝酶［15］，其基因多態(tài)性與伊立替康的療效和毒性有密切的關(guān)系。

本研究中207 例漢族消化道腫瘤患者的UGT1A1*28 基因多態(tài)性分布情況為野生型TA6/6，164 例 占79. 2%;雜 合 突 變 型TA6/7，41 例 占19.8%;純合突變型TA7/7，2 例占1%，與Zhang等［8］報(bào)道的對539 例和馬冬等［9］報(bào)道的對317 例中國人中UGT1A1*28 的基因多態(tài)性分布情況相一致。UGT1A1*28 雜合突變型TA6/7 和純合突變型TA7/7的頻率明顯低于在高加索人群(雜合突變型TA6/7頻率為35% ～50%，純合突變型TA7/7 頻率10% ～15%)和非洲人群(雜合突變型TA6/7 頻率為44% ～52%，純合突變型TA7/7 頻率12% ～27%)中的突變率［10］。UGT1A1*6 的基因多態(tài)性分布情況為野生型G/G，154 例占74. 4%;雜合突變型G/A，51 例占24.6%;純合突變型G/G，2 例占2.0%，與Nakamura等［16］在日本人群、Han 等［17］在韓國人群及Jada 等［14］在亞洲人群中的UGT1A1*6 基因多態(tài)性研究結(jié)果相似，但是UGT1A1*6 基因突變頻率在高加索人群和非洲人群中突變頻率非常低［10］。本研究結(jié)果提示在中國漢族人群中，UGT1A1*6 基因突變型(G/A 和A/A)的頻率為(26. 6%)高于UGT1A1*28 基因突變型(TA6/7 和TA7/7)的頻率(20.8%)，顯得更為普遍。

Figure 3. Comparison of time to progression (TTP)between UGT1A1 wild type and mutant.A:comparison of TTP between UGT1A1* 28 wild type (TA6/6)and mutant (TA6/7 and TA7/7);B:comparison of TTP between UGT1A1* 6 wild type (G/G)and mutant (G/A and A/A).圖3 UGT1A1* 28 和UGT1A1* 6 野生型和突變型之間腫瘤進(jìn)展時(shí)間的比較

本研究中對56 例采用含伊立替康方案化療的mCRC 患者的不良反應(yīng)和UGT1A1 基因多態(tài)性關(guān)系分析發(fā)現(xiàn):UGT1A1*28 的突變型(TA6/7 和TA7/7)與野生型TA6/6 相比，可以增加患者發(fā)生3 級以上血小板減少(33.3% vs 2.1%，P ＜0.05)的風(fēng)險(xiǎn)，但不會(huì)增加患者發(fā)生3 級以上白細(xì)胞減少和中性粒細(xì)胞減少的風(fēng)險(xiǎn);消化道毒性方面，UGT1A1*28 的突變型(TA6/7 和TA7/7)與野生型TA6/6 相比，不會(huì)增加患者發(fā)生3 級以上腹瀉的風(fēng)險(xiǎn)(11.1% vs 19.1%，P ＞0.05)。我們的研究結(jié)果與Schulz 等［18］和馬冬等［9］的研究一致，分析沒有發(fā)現(xiàn)UGT1A1*28 突變型(TA6/7 和TA7/7)可以增加患者發(fā)生3 級以上腹瀉的風(fēng)險(xiǎn)可能是因?yàn)閁GT1A1*28 在中國人群中突變頻率太低所造成的。

UGT1A1*6 突變型(G/A 和A/A)與野生型G/G相比，可以增加患者發(fā)生3 級以上中性粒細(xì)胞減少(61.1% vs 29. 0%，P ＜0. 05)和腹瀉(38. 9% vs 7.9%，P ＜0.05)的風(fēng)險(xiǎn)，與多項(xiàng)在日本的臨床研究結(jié)果一致［11－14］。原因可能是因?yàn)橐亮⑻婵档幕钚孕问綖镾N－38，為拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ抑制劑，可抑制DNA 單鏈斷裂后修復(fù)，干擾DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，肝和腸內(nèi)的代謝酶UGT1A1 可將SN－38 代謝為滅活產(chǎn)物SN－38G，UGT1A1*6 突變型可以使UGT1A1 的活性下降30% ～70%［19－20］，使腸道內(nèi)SN－38 轉(zhuǎn)換為SN－38G 的速率下降，導(dǎo)致SN－38 在腸道內(nèi)蓄積產(chǎn)生細(xì)胞毒性，直接作用于腸粘膜引起組織損傷，導(dǎo)致嚴(yán)重腹瀉。

本研究結(jié)果顯示UGT1A1*28 和UGT1A1*6 基因多態(tài)性和療效之間無相關(guān)性(P ＞0.05 和P ＞0.05);UGT1A1*28 野生型TA6/6 的中位TTP 為8.8月，突變型(TA6/7 和TA7/7)的中位TTP 為8.1 月，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0. 05);UGT1A1*6 野生型G/G 的中位TTP 為10.8 個(gè)月，突變型(G/A 和A/A)的中位TTP 為8.1 個(gè)月，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05);我們的研究結(jié)果與Schulz 等［18］和Seo 等［21］的研究結(jié)果一致，未發(fā)現(xiàn)UGT1A1*6 和UGT1A1*28基因型與TTP 之間的相關(guān)性?；煰熜г诟骰蛐椭g沒有差別的原因可能是因?yàn)楸狙芯恐袠颖玖枯^少和納入的患者化療方案均為二線化療方案所致，我們將進(jìn)一步收集樣本，觀察病人的遠(yuǎn)期療效，分析UGT1A1 基因多態(tài)性和伊立替康療效之間的關(guān)系，并進(jìn)行機(jī)制方面的實(shí)驗(yàn)研究。

綜上所述，本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在中國漢族人群中UGT1A1*28 突變型可以增加患者發(fā)生3 級以上血小板減少的風(fēng)險(xiǎn);UGT1A1*6 突變型可以增加患者發(fā)生3 級以上腹瀉和中性粒細(xì)胞減少的風(fēng)險(xiǎn);UGT1A1*6突變頻率明顯高于UGT1A1*28，提示UGT1A1*6 與中國人群中伊立替康的毒性反應(yīng)更為密切，因此，在臨床伊立替康毒性預(yù)測中，應(yīng)綜合考慮UGT1A1*6和UGT1A1*28 基因多態(tài)性檢測，從而更好地指導(dǎo)臨床醫(yī)生優(yōu)化化療方案，以達(dá)到個(gè)體化醫(yī)療的目的。

［1］ Toffoli G，Cecchin E，Corona G，et al. Pharmacogenetics of irinotecan［J］. Curr Med Chem Anticancer Agents，2003，3(3):225－237.

［2］ Ulukan H，Swaan PW. Camptothecins:a review of their chemotherapeutic potential［J］. Drugs，2002，62(14):2039－2057.

［3］ Douillard JY，Cunningham D，Roth AD，et al. Irinotecan combined with fluorouracil compared with fluorouracil alone as first－line treatment for metastatic colorectal cancer:a multicentre randomised trial［J］. Lancet，2000，355(9209):1041－1047.

［4］ Saltz LB，Cox JV，Blanke C，et al. Irinotecan plus fluorouracil and leucovorin for metastatic colorectal cancer.Irinotecan Study Group［J］. N Engl J Med，2000，343(13):905－914.

［5］ Hahn KK，Wolff JJ，Kolesar JM. Pharmacogenetics and irinotecan therapy［J］. Am J Health Syst Pharm，2006，63(22):2211－2217.

［6］ Ando Y，Saka H，Ando M，et al. Polymorphisms of UDP－glucuronosyltransferase gene and irinotecan toxicity:a pharmacogenetic analysis［J］. Cancer Res，2000，60(24):6921－6926.

［7］ Martinez－Balibrea E，Abad A，Martinez－Cardus A，et al. UGT1A and TYMS genetic variants predict toxicity and response of colorectal cancer patients treated with first－line irinotecan and fluorouracil combination therapy［J］.Br J Cancer，2010，103(4):581－589.

［8］ Zhang A，Xing Q，Qin S，et al. Intra－ethnic differences in genetic variants of the UGT－glucuronosyltransferase 1A1 gene in Chinese populations［J］. Pharmacogenomics J，2007，7(5):333－338.

［9］ 馬 冬，張緒超，楊冬陽，等. 中國人UGT1A1*28 的基因多態(tài)性以及與伊立替康毒性和療效的關(guān)系［J］. 中山大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2011，32(4):495－499.

［10］ Kaniwa N，Kurose K，Jinno H，et al. Racial variability in haplotype frequencies of UGT1A1 and glucuronidation activity of a novel single nucleotide polymorphism 686C ＞T(P229L)found in an African－American［J］. Drug Metab Dispos，2005，33(3):458－465.

［11］ Onoue M，Terada T，Kobayashi M，et al. UGT1A1*6 polymorphism is most predictive of severe neutropenia induced by irinotecan in Japanese cancer patients［J］. Int J Clin Oncol，2009，14(2):136－142.

［12］ Takano M，Kato M，Yoshikawa T，et al. Clinical significance of UDP－glucuronosyltransferase 1A1*6 for toxicities of combination chemotherapy with irinotecan and cisplatin in gynecologic cancers:a prospective multi－institutional study［J］. Oncology，2009，76(5):315－321.

［13］ Minami H，Sai K，Saeki M，et al. Irinotecan pharmacokinetics/pharmacodynamics and UGT1A genetic polymorphisms in Japanese:roles of UGT1A1*6 and*28［J］.Pharmacogenet Genomics，2007，17(7):497－504.

［14］ Jada SR，Lim R，Wong CI，et al. Role of UGT1A1*6，UGT1A1*28 and ABCG2 c. 421C ＞A polymorphisms in irinotecan－induced neutropenia in Asian cancer patients［J］. Cancer Sci，2007，98(9):1461－1467.

［15］ Iyer L，King CD，Whitington PF，et al. Genetic predisposition to the metabolism of irinotecan (CPT－11). Role of uridine diphosphate glucuronosyltransferase isoform 1A1 in the glucuronidation of its active metabolite (SN－38)in human liver microsomes［J］. J Clin Invest，1998，101(4):847－854.

［16］ Nakamura Y，Soda H，Oka M，et al. Randomized phase II trial of irinotecan with paclitaxel or gemcitabine for non－small cell lung cancer:association of UGT1A1*6 and UGT1A1*27 with severe neutropenia［J］. J Thorac Oncol，2011，6(1):121－127.

［17］ Han JY，Lim HS，Shin ES，et al. Comprehensive analysis of UGT1A polymorphisms predictive for pharmacokinetics and treatment outcome in patients with non－small－cell lung cancer treated with irinotecan and cisplatin［J］. J Clin Oncol，2006，24(15):2237－2244.

［18］ Schulz C，Heinemann V，Schalhorn A，et al. UGT1A1 gene polymorphism:impact on toxicity and efficacy of irinotecan－based regimens in metastatic colorectal cancer［J］. World J Gastroenterol，2009，15(40):5058－5066.

［19］ Udomuksorn W，Elliot DJ，Lewis BC，et al. Influence of mutations associated with Gilbert and Crigler－Najjar type II syndromes on the glucuronidation kinetics of bilirubin and other UDP－glucuronosyltransferase 1A substrates［J］. Pharmacogenet Genomics，2007，17(12):1017－1029.

［20］ Gagne J F，Montminy V，Belanger P，et al. Common human UGT1A polymorphisms and the altered metabolism of irinotecan active metabolite 7－ethyl－10－h(huán)ydroxycamptothecin (SN－38)［J］. Mol Pharmacol，2002，62(3):608－617.

［21］ Seo BG，Kwon HC，Oh SY，et al. Comprehensive analysis of excision repair complementation group 1，glutathione S－transferase，thymidylate synthase and uridine diphosphate glucuronosyl transferase 1A1 polymorphisms predictive for treatment outcome in patients with advanced gastric cancer treated with FOLFOX or FOLFIRI［J］. Oncol Rep，2009，22(1):127－136.