薛穎昊，席貽龍，張 根

(安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院安徽省高校生物環(huán)境與生態(tài)安全省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蕪湖241000)

粉煤灰污染影響萼花臂尾輪蟲(chóng)(Brachionus calyciflorus)種復(fù)合體空間分布的原因*

薛穎昊，席貽龍＊＊，張 根

(安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院安徽省高校生物環(huán)境與生態(tài)安全省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蕪湖241000)

為探討粉煤灰污染影響萼花臂尾輪蟲(chóng)(Brachionus calyciflorus)種復(fù)合體在灰湖、汀棠湖和鳳鳴湖分布的生態(tài)學(xué)機(jī)制，本文研究了曝氣自來(lái)水(對(duì)照)、20%、40%、60%、80%和100%的澄清灰湖水對(duì)采自三湖泊中的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ和汀棠湖中的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ的種群增長(zhǎng)率、混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)、攜卵雌體數(shù)/不攜卵雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量的影響.結(jié)果顯示，無(wú)論實(shí)驗(yàn)用水中的澄清灰湖水含量如何，來(lái)自三湖泊的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ均具有較高的種群增長(zhǎng)率(0.52～0.85 d－1)和休眠卵產(chǎn)量(1.60～12.11 ind./(4 d·5 ml))，這為輪蟲(chóng)的擴(kuò)散、種群的建立和種群間的基因交流提供了可能.汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ種群中的混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量均極低，對(duì)照組中的混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量均為0，這是存在于汀棠湖和鳳鳴湖中的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ無(wú)法通過(guò)擴(kuò)散而出現(xiàn)在灰湖中的主要原因.澄清灰湖水的含量?jī)H對(duì)汀棠湖中兩輪蟲(chóng)姐妹種的種群增長(zhǎng)率具有顯著的影響.各濃度的澄清灰湖水使輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的種群增長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組，60%、80%和100%的澄清灰湖水使輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ的種群增長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組，這表明粉煤灰污染導(dǎo)致已報(bào)道的相關(guān)水體中輪蟲(chóng)種群密度的下降并非由于其中所含的污染物(較高濃度的堿性氧化物、硫化物和金屬元素等)和水體pH值的改變等對(duì)輪蟲(chóng)的直接毒性作用.

粉煤灰污染;萼花臂尾輪蟲(chóng);種復(fù)合體;生殖;空間分布

粉煤灰(coal ash)是煤炭燃燒的剩余固體顆粒物，其中含有大量堿性氧化物、硫化物和金屬元素等污染物，可能會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染［1］.粉煤灰與水作用后，其中所含的污染物隨水流向環(huán)境中遷移，造成水體中污染物濃度升高，甚至超過(guò)對(duì)生物體的急性或慢性毒性閾值［2］.粉煤灰污染降低了水生植物和動(dòng)物物種多樣性［3］，使水環(huán)境中的魚(yú)類(lèi)和兩棲類(lèi)出現(xiàn)組織病理化、生理功能紊亂以及形態(tài)發(fā)育和行為異常［4］.粉煤灰污染嚴(yán)重破壞了印度德里Yamuna河浮游動(dòng)物群落結(jié)構(gòu)，降低了水體中浮游動(dòng)物尤其是輪蟲(chóng)和原生動(dòng)物的密度［5］;但粉煤灰污染導(dǎo)致輪蟲(chóng)種群密度下降是否與其中的污染物對(duì)輪蟲(chóng)的直接毒性作用有關(guān)尚待研究.

為探討粉煤灰污染對(duì)輪蟲(chóng)種群遺傳分化的影響，張根等［6］曾以安徽蕪湖市境內(nèi)的粉煤灰污染水體(灰湖)與未污染水體(鳳鳴湖和汀棠湖)中的萼花臂尾輪蟲(chóng)(Brachionus calyciflorus)為對(duì)象，通過(guò)rDNA ITS序列測(cè)定和分析，在灰湖萼花臂尾輪蟲(chóng)中僅發(fā)現(xiàn)一個(gè)姐妹種，而兩對(duì)照湖泊均發(fā)現(xiàn)兩個(gè)姐妹種.就三個(gè)湖泊共有的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ而言，粉煤灰污染水體與未污染水體萼花臂尾輪蟲(chóng)種群間保持較高水平的基因流，種群分化不明顯.作者推測(cè)，灰湖萼花臂尾輪蟲(chóng)中僅發(fā)現(xiàn)一個(gè)姐妹種可能是由于粉煤灰污染對(duì)輪蟲(chóng)姐妹種產(chǎn)生的定向選擇作用.但同域性分布的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ?yàn)楹尾荒芡ㄟ^(guò)擴(kuò)散作用而出現(xiàn)在灰湖中?究竟是由于其沒(méi)有通過(guò)有性生殖產(chǎn)生休眠卵而進(jìn)行擴(kuò)散還是由于擴(kuò)散后的休眠卵孵化出的輪蟲(chóng)個(gè)體不能適應(yīng)灰湖水環(huán)境?而輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的情況是否與其相反?所有這些也均需進(jìn)一步研究.本文以萼花臂尾輪蟲(chóng)種復(fù)合體為對(duì)象，比較研究了其在不同含量澄清灰湖水中的孤雌生殖和有性生殖，分析了粉煤灰污染影響萼花臂尾輪蟲(chóng)種復(fù)合體空間分布以及輪蟲(chóng)種群密度的可能原因.

1 材料與方法

1.1 研究水體

灰湖(30°16'12″N，118°12'36″E)是蕪湖市發(fā)電廠濕法排灰的儲(chǔ)灰池，于2000年在原自然水體的基礎(chǔ)上擴(kuò)建而成，庫(kù)容量為3.05×106m3;汀棠湖(31°12'36″N，118°13'12″E)位于蕪湖市汀棠公園內(nèi)，用作景觀水域，同時(shí)兼用于魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖;鳳鳴湖(31°30'00″N，118°13'48″E)位于蕪湖市郊，主要用于魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖.三個(gè)湖泊平均水深分別為6、1.5 和1.2 m，水體面積分別為21.12、13.47 和40.27 hm2.

灰湖水體呈現(xiàn)較強(qiáng)的堿性，pH達(dá)到9.82;可溶性總氮含量低于鳳鳴湖和汀棠湖，可溶性總磷與氨氮含量均高于鳳鳴湖和汀棠湖.鳳鳴湖和汀棠湖水體葉綠素a含量分別高出灰湖4.5和4倍.參照《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(GB 3838-2002)中的Ⅴ類(lèi)水基本項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)限值和集中式生活飲用水地表水源地特定項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)限值，灰湖中As、B、Mo、Se和V元素分別超過(guò)規(guī)定限值的2、4、5、8和6倍，Al、Cr、Li和Se元素含量明顯高于對(duì)照湖泊;三個(gè)湖泊水體中Sb元素含量均超過(guò)限值［6］.

1.2 輪蟲(chóng)的來(lái)源及培養(yǎng)

2009年3-4月，在三個(gè)湖泊中分別采集萼花臂尾輪蟲(chóng)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)于22℃下進(jìn)行“克隆”培養(yǎng);培養(yǎng)液為新鮮配制的 G ilbert培養(yǎng)液［7］;食物為 H B-4培養(yǎng)基［8］培養(yǎng)的、處于指數(shù)增長(zhǎng)期的斜生柵藻(Scenedesmus obliquus).

根據(jù)張根等［6］的研究結(jié)果，本研究所使用的萼花臂尾輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ包括9個(gè)來(lái)自汀棠湖的克隆、11個(gè)來(lái)自灰湖的克隆和10個(gè)來(lái)自鳳鳴湖的克隆，姐妹種Ⅱ包括9個(gè)來(lái)自汀棠湖的克隆.

1.3 3 d種群增長(zhǎng)和4 d休眠卵產(chǎn)量實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)參照Radix等［9］和Snell等［10］的方法，在容積為5 ml的玻璃試管中進(jìn)行.以澄清灰湖水為原液，用曝氣自來(lái)水對(duì)其進(jìn)行一定比例稀釋后獲得的實(shí)驗(yàn)用水分別為20%、40%、60%、80%和100%的澄清灰湖水，并設(shè)1 個(gè)空白對(duì)照(曝氣自來(lái)水);各實(shí)驗(yàn)用水和曝氣自來(lái)水的 p H 依 次為8.57、8.90、9.26、9.53、9.80 和7.57.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，從每個(gè)輪蟲(chóng)克隆中隨機(jī)吸取10個(gè)齡長(zhǎng)小于2 h的輪蟲(chóng)幼體放入玻璃試管中，并添加配制好的各特定稀釋率的澄清灰湖水(內(nèi)含2.0×106cells/ml的斜生柵藻)至5 ml;各湖泊、各姐妹種中的每個(gè)輪蟲(chóng)克隆作為一個(gè)重復(fù)(汀棠湖、灰湖和鳳鳴湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ分別包括9個(gè)、11個(gè)和10個(gè)重復(fù)，汀棠湖姐妹種Ⅱ包括9個(gè)重復(fù)).實(shí)驗(yàn)在溫度為(25±1)℃的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每間隔12 h懸浮一次沉積于試管底部的藻類(lèi)食物，每間隔24 h更換一次內(nèi)含2.0×106cells/ml斜生柵藻的實(shí)驗(yàn)用水.72 h后，對(duì)每個(gè)試管中輪蟲(chóng)的攜卵非混交雌體、攜卵混交雌體和不帶卵雌體分別進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后全數(shù)返回原培養(yǎng)器皿繼續(xù)培養(yǎng)，24 h后對(duì)混交雌體所攜帶的休眠卵及試管底部沉積的休眠卵進(jìn)行計(jì)數(shù).

1.4 雌體類(lèi)型的劃分和鑒別

參照楊家新等的方法［11］.

1.5 有關(guān)參數(shù)的定義和計(jì)算方法

種群增長(zhǎng)率r=(lnNt－lnN0)/t，Nt和N0分別為實(shí)驗(yàn)結(jié)束和實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)的種群密度，t=3 d［9］;混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù):攜卵雌體中混交雌體數(shù)與非混交雌體數(shù)的比值［9］;攜卵雌體數(shù)/不攜卵雌體數(shù):攜卵的雌體數(shù)與不攜卵的雌體數(shù)的比值［9］;休眠卵產(chǎn)量:5 ml培養(yǎng)液中的輪蟲(chóng)在4 d內(nèi)所產(chǎn)的休眠卵數(shù)量［10］.

1.6 數(shù)據(jù)的分析與處理

采用SPSS 16.0軟件和Excel對(duì)各生命表統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)先進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，對(duì)符合正態(tài)分布的參數(shù)通過(guò)單因素方差分析(one-way ANOVA)和多重比較(LSD檢驗(yàn))分析各濃度組與空白對(duì)照組間以及各濃度組之間的差異顯著性;對(duì)汀棠湖姐妹種Ⅱ和姐妹種Ⅰ種群參數(shù)間的差異進(jìn)行獨(dú)立樣方t-檢驗(yàn).

2 結(jié)果

2.1 三湖泊輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的孤雌生殖和有性生殖

無(wú)論實(shí)驗(yàn)用水中的澄清灰湖水含量如何，三個(gè)湖泊輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ均具有較高的種群增長(zhǎng)率(0.52～0.85 d－1)、混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)(0.12 ～0.75)和休眠卵產(chǎn)量(1.60 ～12.11 ind./(4 d·5 ml)).除汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的種群增長(zhǎng)率外，澄清灰湖水含量對(duì)各湖泊輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的所有生殖參數(shù)均無(wú)顯著影響(P＞0.05).汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的種群增長(zhǎng)率在對(duì)照組中最低(表1)，而20%、60%和80%的澄清灰湖水中輪蟲(chóng)的種群增長(zhǎng)率與40%和100%的澄清灰湖水中的無(wú)顯著差異.汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的種群增長(zhǎng)率與澄清灰湖水含量顯著相關(guān)(R2=0.302，P ＜0.01).

當(dāng)實(shí)驗(yàn)用水為60%和80%的澄清灰湖水時(shí)，三湖泊間輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ種群中的混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)均存在顯著差異(P＜0.05)，且均以鳳鳴湖輪蟲(chóng)種群中的混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)顯著高于汀棠湖和灰湖，而后兩個(gè)湖泊間無(wú)顯著差異(表1).

2.2 汀棠湖輪蟲(chóng)兩姐妹種的孤雌生殖和有性生殖

無(wú)論實(shí)驗(yàn)用水中的澄清灰湖水含量如何，汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ種群中的混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量均較低;尤其是對(duì)照組中，混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量均為0.在汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ的所有種群參數(shù)中，僅種群增長(zhǎng)率受澄清灰湖水含量的影響顯著(P＜0.05).其中，60%、80%和100%澄清灰湖水中的種群增長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組和20%澄清灰湖水中的種群增長(zhǎng)率(表1).汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ的種群增長(zhǎng)率與澄清灰湖水含量顯著相關(guān)(R2=0.169，P＜0.01).

兩姐妹種間，除了對(duì)照組中的種群增長(zhǎng)率、80%澄清灰湖水中的混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量、各組中的攜卵雌體數(shù)/不攜卵雌體數(shù)無(wú)顯著差異外，其他各組中輪蟲(chóng)各種群參數(shù)均以姐妹種Ⅰ顯著大于姐妹種Ⅱ(表1).

3 討論

3.1 粉煤灰污染影響萼花臂尾輪蟲(chóng)種復(fù)合體空間分布的原因

一般認(rèn)為，在隔離水體間，單巢目輪蟲(chóng)可以通過(guò)休眠卵借助風(fēng)力和水禽等介質(zhì)進(jìn)行擴(kuò)散.因此，在原棲息的水體中單巢目輪蟲(chóng)有性生殖的發(fā)生以及通過(guò)有性生殖所產(chǎn)生的休眠卵的數(shù)量是決定其能否進(jìn)行有效擴(kuò)散的首要因素，而擴(kuò)散到新的水體中的休眠卵能否孵化以及孵化出的輪蟲(chóng)個(gè)體對(duì)水環(huán)境的適應(yīng)性則是決定輪蟲(chóng)種群建立的重要條件.就本研究中的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ而言，盡管其種群在包括100%澄清灰湖水在內(nèi)的各實(shí)驗(yàn)用水中均能增長(zhǎng)，但無(wú)論實(shí)驗(yàn)用水中的澄清灰湖水含量如何，汀棠湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ種群中的混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量均較低;尤其是對(duì)照組中，混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)和休眠卵產(chǎn)量均為0;這意味著輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ無(wú)法在隔離的水體間進(jìn)行有效的擴(kuò)散;這或許是存在于汀棠湖和鳳鳴湖中的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ沒(méi)有通過(guò)擴(kuò)散而出現(xiàn)在灰湖中的主要原因.另外，即使個(gè)別休眠卵通過(guò)擴(kuò)散進(jìn)入灰湖水體中且成功孵化，較少的個(gè)體數(shù)量和較低的種群增長(zhǎng)率勢(shì)必造成其在有限的食物資源競(jìng)爭(zhēng)中被淘汰［6］.

基因流是一個(gè)群體遷移至另一個(gè)群體時(shí)將某基因帶到新的群體產(chǎn)生的基因流動(dòng).據(jù)此，粉煤灰污染水體與未污染水體中萼花臂尾輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ種群間保持較高水平的基因流意味著三湖泊間輪蟲(chóng)種群存在著遷移.本研究中，汀棠湖和鳳鳴湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ在曝氣自來(lái)水中、灰湖輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ在各濃度的澄清灰湖水中均具有一定的休眠卵產(chǎn)量，為該種輪蟲(chóng)的擴(kuò)散提供了重要的物質(zhì)基礎(chǔ);而三個(gè)湖泊中的輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ在各實(shí)驗(yàn)用水中所具有的較高的種群增長(zhǎng)率和混交雌體數(shù)/非混交雌體數(shù)為輪蟲(chóng)種群在擴(kuò)散水體中的建立和種群間的基因交流提供了保證.

表1 澄清灰湖水含量對(duì)萼花臂尾輪蟲(chóng)種群參數(shù)的影響Tab.1 Effects of volume fraction of settled coal ash water on population parameters of B.calyciflorus

3.2 粉煤灰污染導(dǎo)致輪蟲(chóng)種群密度下降的原因

已有研究表明，粉煤灰污染嚴(yán)重破壞了印度德里Yamuna河浮游動(dòng)物群落結(jié)構(gòu)，降低了水體中浮游動(dòng)物尤其是輪蟲(chóng)和原生動(dòng)物的密度［5］.但粉煤灰污染導(dǎo)致輪蟲(chóng)種群密度下降是否與其中的污染物對(duì)輪蟲(chóng)的直接毒性作用有關(guān)尚不清楚.本研究中，各濃度的澄清灰湖水使輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的種群增長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組，60%、80%和100%的澄清灰湖水使輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ的種群增長(zhǎng)率也顯著高于對(duì)照組，這表明粉煤灰污染導(dǎo)致輪蟲(chóng)種群密度下降并非由于其中所含的污染物(較高濃度的堿性氧化物、硫化物和金屬元素等)和水體pH值的改變等對(duì)輪蟲(chóng)的直接毒性作用，而可能是懸浮的粉煤灰顆粒對(duì)輪蟲(chóng)攝食和消化等的影響、粉煤灰污染導(dǎo)致的可食性藻類(lèi)密度的降低所致.

3.3 粉煤灰污染對(duì)輪蟲(chóng)生殖的影響和污染監(jiān)測(cè)的敏感指標(biāo)

大多數(shù)水體污染物對(duì)輪蟲(chóng)種群增長(zhǎng)的影響表現(xiàn)為抑制作用，少數(shù)污染物如除草劑草甘膦等則表現(xiàn)為促進(jìn)作用［12］.與草甘膦的作用相似，本研究中，各濃度的澄清灰湖水對(duì)輪蟲(chóng)姐妹種Ⅰ的種群增長(zhǎng)具有明顯的促進(jìn)作用，60%、80%和100%的澄清灰湖水對(duì)輪蟲(chóng)姐妹種Ⅱ的種群增長(zhǎng)亦具有明顯的促進(jìn)作用;這也首次表明同一水體中分布的輪蟲(chóng)姐妹種對(duì)粉煤灰污染的敏感性存在著差異.

眾多的研究均表明，種群增長(zhǎng)率是用來(lái)監(jiān)測(cè)水體污染物毒性的一個(gè)較敏感的指標(biāo).但也有研究發(fā)現(xiàn)，輪蟲(chóng)的有性生殖(以混交雌體百分率和休眠卵產(chǎn)量等為指標(biāo))通常比無(wú)性生殖(以種群增長(zhǎng)率為指標(biāo))對(duì)污染物更敏感［9-10，13-16］.然而，本研究結(jié)果表明，僅輪蟲(chóng)的無(wú)性生殖對(duì)粉煤灰污染較敏感.

［1］Singh H，Kolay PK.Analysis of coal ash for trace elements and their geo-environmental implications.Water Air and Soil Pollution，2009，198:87-94.

［2］Burton WH，Pinkney AE.Yellow perch larval survival in the Zekiah Swamp watershed(Wicomico River，Maryland)relative to the potential effects of a coal ash storage facility.Water Air and Soil Pollution，1994，72:235-249.

［3］Brieger G，Well JR，Hunter D.Plant and animal species composition and heavy metal content in fly ash ecosystems.Water Air and Soil Pollution，1992，63:87-103.

［4］Rowe CL，Hopkins WA，Congdon JD.Ecotoxicological implications of aquatic disposal of coal combustion residues in the United States:a review.Environmental Monitoring and Assessment，2002，80(3):207-276.

［5］Walia A，Mehra NK.A seasonal assessment of the impact of coal fly ash disposal on the river Yamuna，Delhi，Ⅱ.biology.Water Air and Soil Pollution，1998，103:315-339.

［6］張 根，席貽龍，薛穎昊等.基于rDNA ITS序列探討粉煤灰污染對(duì)萼花臂尾輪蟲(chóng)種群遺傳多樣性的影響.生物多樣性，2010，18(3):241-250.

［7］Gilbert JJ.Mictic female production in rotifer Brachionus calyciflorus.Journal of Experimental Zoology，1963，153(2):113-124.

［8］黎尚豪，朱 蕙，夏宜琤等.單細(xì)胞綠藻的大量培養(yǎng)實(shí)驗(yàn).水生生物學(xué)集刊，1959，4:462-472.

［9］Radix P，Severin G，Schramm KWet al.Reproduction disturbances of Brachionus calyciflorus(rotifer)for the screening of environmental endocrine disrupters.Chemosphere，2002，47:1097-1101.

［10］Snell TW，Carmona MJ.Comparative toxicity sensitivity of sexual and asexual reproduction in the rotifer Brachionus calyciflrorus.Environmental Toxicology and Chemistry，1995，14(3):415-420.

［11］楊家新，黃祥飛.密度和溫度對(duì)萼花臂尾輪蟲(chóng)產(chǎn)卵量和混交雌體的影響.湖泊科學(xué)，1996，8(4):367-372.

［12］Xi YL，F(xiàn)eng LK.Effects of thiophanate-methyl and glyphosate on asexual and sexual reproduction in the rotifer Brachionus calyciflorus Pallas.Bulletin of Environmental Contamination and Toxicology，2004，73(4):644-651.

［13］Versteeg DJ，Stanton DT，Pence MA et al.Effects of surfactants on the rotifer Brachionus calyciflorus in a chronic toxicity test and in the development of QSARS.Environmental Toxicology and Chemistry，1997，16(5):1051-1058.

［14］Preston BL，Snell TW，Roberston TL et al.Use of freshwater rotifer Brachionus calyciflorus in screening assay for potential endocrine disruptors.Environmental Toxicology and Chemistry，2000，19:2923-2928.

［15］Preston BL，Snell TW.Full life cycle toxicity assessment using rotifer resting egg production:implications for ecological risk assessment.Environmental Pollution，2001，114:399-406.

［16］Marcial HS，Hagiwara A，Snell TW.Effect of some pesticides on reproduction of rotifer Brachionus plicatilis Müller.Hydrobiologia，2005，546:569-575.

Impact on spatial distribution of Brachionus calyciflorus species complex by coal ash pollution

XUE Yinghao，XI Yilong＆ZHANG Gen
(College of Life Sciences，Anhui Normal University，Provincial Key Laboratory of Biotic Environment and Ecological Safety in Anhui，Wuhu 241000，P.R.China)

In order to analyze the ecological mechanism and the effect of coal ash pollution on distribution of Brachionus calyciflorus species complex in three lakes(Lake Hui，Lake Tingtang and Lake Fengming)，the effects of aerated tap-water(control)，and 20%，40%，60%，80%and 100%volume fractions of settled coal ash water diluted by aerated tap-water on population growth rates，ratios mictic females/amictic females，ovigerous females/non-ovigerous females，and resting egg productions of sibling species I have been collected from Lake Hui，Lake Tingtang and Lake Fengming and sibling speciesⅡ have been collected from Lake Tingtang.The results showed that regardless of the volume fraction of settled coal ash water，sibling species I collected from all the three lakes had higher population growth rates(0.52-0.85 d－1)and resting egg productions(1.60-12.11 ind./(4 d·5 ml))which made possible for population spread，population establishment and gene flow.Sibling speciesⅡ collected from Lake Tingtang had much lower ratio mictic females/amictic females and resting egg production，and in the aerated tap-water，both of them were zero，which might be the main reason for that sibling speciesⅡ living in Lake Tingtang and Lake Fengming could not spread into Lake Hui.The volume fraction of settled coal ash water significantly affects only the population growth rates of both two sibling species collected from Lake Tingtang.All the volume fractions of settled coal ash water made the population growth rate of sibling species I higher than that in the control，and 60%，80%and 100%settled coal ash water made the population growth rate of sibling speciesⅡ higher than that in the control，which indicated that the decreased rotifer density in natural water bodies polluted by coal ash did not attribute to the direct toxicity of elevated metal，salt concentrations，and pH level.

Coal ash pollution;Brachionus calyciflorus;species complex;reproduction;spatial distribution

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?2012 by Journal of Lake Sciences

＊ 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30770352、30499341)、安徽省優(yōu)秀青年基金項(xiàng)目(08040106904)、安徽省高校生物環(huán)境與生態(tài)安全省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)項(xiàng)基金項(xiàng)目(2004sys003)和重要生物資源保護(hù)和利用研究安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)項(xiàng)基金項(xiàng)目聯(lián)合資助.2011-01-07收稿;2011 04 09收修改稿.薛穎昊，男，1984年生，碩士研究生;E-mail:xueshan_0512@163.com.

＊＊ 通信作者;E-mail:ylxi1965@yahoo.com.cn.