師巧紅樊紅

在臨床輸血工作中，一般采用抗-D(IgM)單克隆試劑檢測受血者Rh血型，極少能發(fā)現(xiàn)受血者D變異型，本例受血者因附屬醫(yī)院檢驗科與輸血科檢測RhD采用不同來源抗-D試劑，兩科試劑檢測結(jié)果不一致，才發(fā)現(xiàn)受血者為D變異型，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 受血者，男，49歲，2011年7月29日確診為胃癌，術(shù)前備血，本地附屬醫(yī)院檢驗科檢驗血型A型RhD陽性，輸血科檢驗血型為A型RhD陰性，因兩個實驗室的RhD檢測結(jié)果不一致，送血站血型室進一步確認患者RhD血型。筆者所在科室采用間接抗人球蛋白法確認為D變異型，輸RhD陰性血，無輸血不良反應。

1.2 試劑與儀器 初篩選用抗-D(IgM)單克隆抗體(來源：上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，批號：20110218)；戴安娜微柱凝膠(批號：1107.02)；DiaMed，微柱凝膠(批號：50093.35.06)；確認試劑為抗 -D1、抗 -D2、抗 -D3，抗 -D1(IgG)；單克隆抗體(來源：上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，批號：20101022)；抗-D2(IgG+IgM，來源：美國美德聲公司，批號：NDMG05602)；抗-D3(IgG+IgM，來源：Millipore UK，批號：BMH0806E)；BASO 2002-2離心機；電熱恒溫水浴箱(北京醫(yī)療設備廠)。

1.3 方法 血型血清學方法，按試劑說明書采用鹽水法、抗人球蛋白法檢測[1]。

2 結(jié)果

2.1 受血者RhD初篩血型，醫(yī)院檢驗科用戴安娜微柱凝膠法檢測為RhD陽性。醫(yī)院輸血科采用Diamed微柱凝膠法檢測為RhD陰性，血站血型室采用鹽水凝集法檢測為RhD陰性。

2.2 受血者RhD血型確認結(jié)果見表1。

表1 受血者RhD血型確認結(jié)果

3 討論

在紅細胞29個血型系統(tǒng)中，Rh血型系統(tǒng)是最具復雜性和多態(tài)性的血型系統(tǒng)，在輸血醫(yī)學中的重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)[2]。Rh血型系統(tǒng)抗原總數(shù)約有45種之多，主要抗原有D、C、E、c和e五種抗原，由于D抗原的抗原性最強，具有高免疫性而最具臨床意義，因此，根據(jù)紅細胞上D抗原的有無，將其分為Rh陽性或Rh陰性，其它抗原強弱依次為E>C>c>e的次序，均顯示劑量效應。RhD血型在不同人種中的分布比例是有差異的，Rh陰性血型在我國漢族和蒙古族屬稀有血型[3]。近年來通過研究發(fā)現(xiàn)，RhD抗原分為D陽性、D陰性和D變異型，而D變異型又分為弱D和部分D；弱D抗原的改變位于細胞膜內(nèi)和膜中，細胞膜外的蛋白質(zhì)沒有改變，只有抗原數(shù)量的改變，而抗原質(zhì)量未改變；部分D抗原的改變則位于細胞膜外，抗原性和數(shù)量都發(fā)生了改變[2]。本例受血者在常規(guī)鹽水法初篩D抗原時為陰性，間接抗人球蛋白試驗確認為陽性，證實存在D抗原，由于血型血清學方法只能檢測抗原與抗體的反應，無法區(qū)別弱D和部分D。D抗原位于RhD基因編碼的RhD多肽上，該多肽帶有6個細胞外環(huán)，貫穿紅細胞膜12次，氨基端和羧基端均位于胞漿中[4]。6個細胞外環(huán)中含有多個具有抗原性的抗原決定簇，當RhD基因發(fā)生突變、缺失，影響D抗原決定簇的質(zhì)或(和)量的表達稱之為D抗原變異型。國際輸血協(xié)會(ISBT)根據(jù)D抗原將D表型分為五型：(1)D表型：即D抗原正常。(2)弱D(DU)表型：抗原數(shù)減少，抗原表位正常。(3)不完全D：抗原數(shù)量正常，但缺乏某些抗原表位。(4)不完全弱D：抗原數(shù)量少，同時缺乏某些抗原表位。(5)增強D：抗原數(shù)量明顯增加，抗原性增強。不同的商品化的抗D試劑與D抗原決定簇結(jié)合位點不同，即使對同一抗原決定簇反應，但其結(jié)合能力也有差別。這就是表達D抗原變異型紅細胞與某些商品化的抗-D試劑在不同條件下反應格局不同的原因。本例受血者在醫(yī)院檢驗科與輸血科采用不同廠家微柱凝膠檢測卡檢測同一份血液，其結(jié)果不同，經(jīng)過筆者所在站血型室進一步檢測，在常規(guī)鹽水法初篩D抗原時為陰性，間接抗人球蛋白試驗確認為陽性，證實存在D抗原。

根據(jù)美國AABB技術(shù)手冊第12版(1996)規(guī)定：Du這術(shù)語不再使用，攜帶弱的D抗原的紅細胞仍被歸類為D陽性，稱之“弱D(weakD)”，原稱之Du紅細胞一部分具有與正常D陽性紅細胞同樣性質(zhì)的D抗原，只是D抗原數(shù)量減少；另一部分原D紅細胞D抗原與正常D抗原相比缺少正常D抗原中1個或多個抗原表位[5]。

本例受血者，在術(shù)中輸4單位ABO同型的RhD陰性冰凍解凍去甘油紅細胞。在臨床輸血中，未發(fā)生溶血性輸血不良反應。

由于D變異型仍具有免疫原性及抗原性，因此，此類人群作為獻血者視為RhD陽性，如果此類人群為受血者則視為RhD陰性。在受血者人群RhD血型檢測時，由于微柱凝膠檢測卡方法其靈敏度高，加之如果反應體系內(nèi)加入廣譜、高效價抗D試劑，易導致部分D變異型誤定為陽性，而給患者輸入RhD陽性紅細胞血液制品，增加產(chǎn)生抗D抗體的幾率。建議醫(yī)院在對患者進行RhD血型篩查時選用單克隆試劑，并且采用鹽水凝集法檢測，有條件的醫(yī)院應采用不同廠家的抗-D試劑進行檢測，以確保輸血安全。

總之，受血者采用常規(guī)鹽水法初篩D抗原即可，如果為D陰性無需做間接抗人球蛋白確認試驗，該受血者需要輸注RhD陰性血液；供血者為D變異型應作RhD陽性論，不應當輸血給RhD陰性的受血者，因此，在血站對供血者做Rh血型檢測，檢測出陰性的標本必須做確認試驗，采用不同批次的抗-D血清進行間接抗人球蛋白實驗，如果是陽性結(jié)果，表明D陽性，按Rh陽性血對待。

[1]李勇，楊貴貞.人類紅細胞血型血清學實用理論與實驗技術(shù)[M].北京:中國科學技術(shù)出版社，1999:82-86.

[2]孫國棟，王曉平.Rh血型系統(tǒng)弱D及部分D研究進展[J].臨床輸血與檢驗，2007，9(2)：183-185.

[3]王華，張洪為，譚芳，等.RhD陰性患者血清學表型和不規(guī)則抗體篩查結(jié)果分析[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2011，8(2)131-133.

[4]孫國棟，段現(xiàn)民，張彥平，等.中國人群眾發(fā)現(xiàn)的主要弱D型-弱D15個體的分子背景研究[J].中國實驗血液學雜志，2006，14(5)：1024-1028.

[5]也應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].南京:東南大學出版社，2006:251.