林 謙 戴求仲 賓石玉 蔣桂韜 張建華 王向榮 張 旭

(1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，湖南長(zhǎng)沙 410131；2.廣西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣西桂林 541004；3.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410128)

在畜牧養(yǎng)殖業(yè)迅猛發(fā)展的今天，抗生素在畜禽飼料生產(chǎn)中大量使用已成為常態(tài)，有數(shù)據(jù)顯示，全球抗生素總產(chǎn)量的一半左右被用于畜牧養(yǎng)殖行業(yè)。但抗生素使用所產(chǎn)生的在畜產(chǎn)品中殘留對(duì)人類健康的危害、過量排泄對(duì)環(huán)境的污染、長(zhǎng)期使用導(dǎo)致耐藥菌株產(chǎn)生等問題也成為人們?nèi)找骊P(guān)注的焦點(diǎn)。很多國(guó)家已經(jīng)禁止或限制了抗生素在飼料中的應(yīng)用，無抗畜禽產(chǎn)品將成為發(fā)展主流。目前，復(fù)合酶制劑及益生菌制劑作為安全、綠色的飼料添加劑引起了極大關(guān)注，本試驗(yàn)即研究復(fù)合酶制劑、益生菌制劑和抗生素對(duì)黃羽肉雞血液生化指標(biāo)、激素指標(biāo)及免疫功能的影響，考察復(fù)合酶制劑與益生菌制劑合用是否具有協(xié)同效應(yīng)及其替代抗生素飼料添加劑的可行性，尋求提高黃羽肉雞生產(chǎn)性能及改善其品質(zhì)的最佳添加劑組合，為促進(jìn)黃羽肉雞的科學(xué)養(yǎng)殖和提高該產(chǎn)業(yè)的綜合效益提供參考和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

益生菌制劑為復(fù)合芽孢桿菌制劑，含枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌，由武漢市雄峰科技有限公司提供，有效活菌含量約為5×1010CFU/g。

酶制劑為固體復(fù)合酶，由上海尤特爾生化有限公司提供,主要成分為酸性纖維素酶(酶活≥2 000 IU/g)、木聚糖酶（酶活≥30 000 IU/g）。

抗生素采用抗敵素（硫酸粘桿菌素），由廣州興達(dá)動(dòng)物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，純度為10%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

選擇675羽遺傳背景相同、同批次、發(fā)育正常的5日齡健康雌性黃羽肉雞，隨機(jī)分為5個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)為27羽雞。各組雞初始體重?zé)o明顯差異（P＞0.05）。試驗(yàn)在湖南省畜牧獸醫(yī)研究所試驗(yàn)雞場(chǎng)內(nèi)進(jìn)行，整個(gè)試驗(yàn)期按試雞日齡分為5～28日齡和29～53日齡兩個(gè)階段，全期共48 d。

采用單因素隨機(jī)設(shè)計(jì)試驗(yàn),具體分組方案見表1。其中Ⅰ組飼喂基礎(chǔ)日糧,作為空白對(duì)照組,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組分別在基礎(chǔ)日糧中添加25 g/t益生菌制劑、150 g/t復(fù)合酶制劑、150 g/t復(fù)合酶制劑+25 g/t益生菌制劑以及300 g/t抗敵素。試雞前期采用粉料飼喂，后期采用顆粒料飼喂。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧與營(yíng)養(yǎng)水平

試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參照NRC(1994)和《NY/T 33—2004雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》中的黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)需要，選用玉米、豆粕、次粉、油糠、菜粕等原料配制而成，由湖南光大牧業(yè)科技有限公司飼料廠加工生產(chǎn)。其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

1.4 飼養(yǎng)管理

試雞采用網(wǎng)上平養(yǎng)，人工持續(xù)光照，育雛時(shí)采用紅外燈供暖，保持正常溫度，第1周33～34℃，第2周27～31℃，其后視具體氣溫情況供暖；雞舍自然通風(fēng)，定期打掃雞舍衛(wèi)生，相對(duì)濕度保持在55%～65%；自由飲水和采食（計(jì)量不限量），按常規(guī)免疫。

1.5 測(cè)試指標(biāo)與方法

1.5.1 血液相關(guān)激素及生理生化指標(biāo)

在未提前停飼的情況下于肉雞54日齡時(shí)上午8：00從每處理隨機(jī)抽取10羽肉雞（每重復(fù)2羽），翼靜脈采血8 ml左右，注入10 ml離心管傾斜放置，讓血液自然凝固。在血凝0.5 h后以3 000 r/min離心15 min分離血清，收集離心管上層血清，于-20℃下保存，以測(cè)定相關(guān)生理生化指標(biāo)。

表2 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

血清中葡萄糖(GLU)含量采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定,甘油三酯(TG)含量采用甘油氧化酶法測(cè)定,乳酸(LAC)含量采用乳酸脫氫酶法測(cè)定,總膽固醇(CHO)含量采用膽固醇氧化酶法測(cè)定,尿素氮(BUN)含量采用尿素酶法測(cè)定,天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量采用酶動(dòng)力學(xué)法測(cè)定,所有測(cè)定都在CX4 Pro全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó),Beckman Coulter公司生產(chǎn))上進(jìn)行；生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素(Ins)含量均采用放射性同位素免疫法(RIΑ),在 γ-放免儀上測(cè)定。

1.5.2 免疫功能

1.5.2.1 免疫器官指數(shù)

于54日齡早晨，從每處理隨機(jī)選取10只接近該處理平均體重的黃羽肉雞（每重復(fù)2羽），稱活重后屠宰，取其胸腺、脾臟、法氏囊稱重，并計(jì)算試雞胸腺、脾臟和法氏囊的免疫器官指數(shù)。

1.5.2.2 血液免疫指標(biāo)

在步驟1.5.1獲得的試雞血清樣本基礎(chǔ)上，采用雙縮脲法及溴甲酚綠法在CX4 Pro全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)，Beckman Coulter公司生產(chǎn)）上分別檢測(cè)血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量，然后用測(cè)得的總蛋白（TP）及白蛋白（ALB）值計(jì)算血清球蛋白（GLO）含量，即血清球蛋白含量=總蛋白（TP）含量-白蛋白(ALB)含量，并計(jì)算分析白球比(A/G)=白蛋白（ALB）/球蛋白(GLO)。同時(shí)，血液中游離三碘甲腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)均采用放射性同位素免疫法(RIΑ)，在γ-放免儀上測(cè)定，并計(jì)算游離三碘甲腺原氨酸/游離甲狀腺素（FT3/FT4）值。

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003軟件進(jìn)行初步處理后,采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA),若組間差異顯著,則采用Duncan's法進(jìn)行多重比較,顯著水平為0.05。試驗(yàn)結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 益生菌與酶制劑及其組合添加對(duì)黃羽肉雞血液生化指標(biāo)、激素指標(biāo)的影響（見表3）

表3 各處理對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表3可見,抗生素(Ⅴ)組以及益生菌與酶制劑組合添加(Ⅳ)組較空白對(duì)照組(Ⅰ)組及酶制劑(Ⅲ)組或益生菌(Ⅱ)組有提高血清中葡萄糖(GLU)含量的趨勢(shì),但各組間無明顯差異(P＞0.05)。試驗(yàn)Ⅱ～Ⅴ組較空白對(duì)照Ⅰ組血清甘油三酯(TG)濃度均有不同程度下降,下降幅度分別為 18.96%(P＞0.05)、43.13%(P＜0.05)、39.81%(P＜0.05)、63.51%(P＜0.01)；同時(shí),添加抗生素的Ⅴ組比單獨(dú)添加益生菌的Ⅱ組能明顯降低血清TG的含量(P＜0.05),Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間血清TG含量差異不顯著(P＞0.05)。益生菌與酶制劑單獨(dú)添加的Ⅱ、Ⅲ組較組合添加的Ⅳ組和抗生素Ⅴ組分別極顯著(P＜0.01)與顯著(P＜0.05)地降低血清膽固醇(CHO)濃度,且與空白對(duì)照Ⅰ組相比血清CHO含量也有所下降(P＞0.05)；而Ⅳ、Ⅴ組間血清CHO含量差異不顯著(P＞0.05),并且均顯著高于空白對(duì)照Ⅰ組(P＜0.05)。Ⅳ組降低了血清中乳酸(LAC)的含量,較空白對(duì)照Ⅰ組下降了32.97%(P＜0.05),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間血清LAC含量差異不顯著(P＞0.05),較空白對(duì)照Ⅰ組也均有所降低。血清尿素氮(BUN)濃度各組間無明顯差異(P＞0.05),但單獨(dú)添加酶制劑以及酶與益生菌制劑的組合使用有降低血清BUN濃度的趨勢(shì)。各組間，Ⅳ組血清天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量最高，且較空白對(duì)照Ⅰ組高出18.47%，差異顯著(P＜0.05),其余各組間血清AST含量無明顯差異(P＞0.05)。

對(duì)于血清生長(zhǎng)激素(GH)含量，Ⅴ組最低，但Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間血清GH含量差異不顯著（P＞0.05）；同時(shí)，空白對(duì)照Ⅰ組與Ⅱ組兩者間血液GH含量差異也不明顯（P＞0.05），但均極顯著高于Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清GH的含量（P＜0.01）。而對(duì)于血清胰島素（Ins）含量而言，Ⅰ、Ⅱ和Ⅴ組接近，且高于Ⅲ、Ⅳ兩組，但各組間胰島素含量差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 益生菌與酶制劑及其協(xié)同效應(yīng)對(duì)黃羽肉雞免疫性能的影響(見表4)

表4的結(jié)果顯示,Ⅲ組的試雞胸腺指數(shù)最高,但各組間胸腺指數(shù)差異不顯著(P＞0.05)。Ⅲ組及Ⅴ組的法氏囊指數(shù)較其它組高，但各組間法氏囊指數(shù)也無明顯差異(P＞0.05)。脾臟指數(shù)酶制劑Ⅲ組最高,較空白對(duì)照Ⅰ組和Ⅴ組分別提高11.64%(P＞0.05)和26.35%(P＞0.05),Ⅳ組的脾臟指數(shù)也很高，且較Ⅴ組提高了13.77%(P＞0.05)，但各組間脾臟指數(shù)差異不明顯(P＞0.05)。

血清總蛋白（TP）含量以Ⅲ組最低，且顯著低于Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ 3 組（P＜0.05），Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組間血清 TP含量差異不顯著（P＞0.05）。血清白蛋白（ALB）含量以Ⅳ組及Ⅴ組較高，且分別顯著（P＜0.05）和極顯著（P＜0.01）高于Ⅲ組，而Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組間血清白蛋白含量無顯著差異（P＞0.05）。血清球蛋白（GLO）含量以空白對(duì)照Ⅰ組及Ⅳ組最高，且均顯著高于Ⅲ組，Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組間血清球蛋白含量差異不顯著（P＞0.05）。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間白球比較接近，但以Ⅲ組最高，且顯著高于空白對(duì)照Ⅰ組（P＜0.05）。

游離三碘甲腺原氨酸（FT3）濃度以Ⅱ組最高，空白對(duì)照Ⅰ組次之，但均顯著高于Ⅴ組(P＜0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組間血清FT3濃度無顯著差異(P＞0.05)。血清游離甲狀腺素（FT4）含量Ⅴ組最高，為 6.85 fmol/ml，Ⅳ組和Ⅲ組次之，分別為6.60 fmol/ml和6.19 fmol/ml,3組間血清FT4含量無顯著差異(P＞0.05),同時(shí),Ⅴ組FT4含量顯著高于Ⅰ、Ⅱ兩組(P＜0.05)。FT3/FT4空白對(duì)照Ⅰ組與Ⅱ組一致，且最高，分別極顯著高于Ⅴ組（P＜0.01）及顯著高于Ⅳ組（P＜0.05），Ⅲ組與其他各組間FT3/FT4均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 各處理對(duì)黃羽肉雞免疫功能的影響

3 討論

3.1 益生菌與酶制劑及其協(xié)同效應(yīng)對(duì)黃羽肉雞血液生化、激素指標(biāo)的影響

動(dòng)物機(jī)體的代謝過程是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的變化過程，血液中的許多生理生化參數(shù)受生長(zhǎng)發(fā)育階段、日糧營(yíng)養(yǎng)水平和自身內(nèi)分泌狀況等因素的影響，因而它們也可以作為反映機(jī)體生理狀況的良好指征。

血清葡萄糖，主要是飼糧中的糖類被消化進(jìn)入血液，以保障機(jī)體對(duì)葡萄糖的需要量，是機(jī)體主要的供能物質(zhì)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，雖然各組血清葡萄糖含量差異不顯著(P＞0.05),但是益生菌與酶制劑組合添加組的血糖濃度相對(duì)較高且與抗生素組的水平相當(dāng)，說明益生菌與酶制劑兩者組合使用可增加由腸道吸收入血液的葡萄糖量，有提高機(jī)體能量代謝水平的趨勢(shì)。

血清甘油三酯水平可以反映機(jī)體脂類代謝水平，其含量升高可引發(fā)多種疾病，對(duì)機(jī)體健康不利，可當(dāng)脂類消化吸收不良時(shí)，甘油三酯水平明顯下降，可能由于氧化反應(yīng)，尤其是β-氧化過程的增強(qiáng)，血清三酰甘油含量升高，從而降低脂肪酸氧化供能途徑，增加脂肪酸合成三酰甘油，結(jié)果使血清總脂含量反而提高。本試驗(yàn)中，飼喂基礎(chǔ)日糧組的血清甘油三酯含量明顯高于其他各組，飼糧添加抗生素的處理組甘油三酯含量低于其他各組，酶與益生菌制劑及兩者合用的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ3組的血清甘油三酯濃度無明顯差異（P＞0.05），且處于中間水平，而過高、過低的血清甘油三酯濃度均不利于機(jī)體生長(zhǎng)及健康，提示可能抗生素的添加不利于機(jī)體對(duì)脂類的消化吸收；而空白對(duì)照組有明顯升高血清甘油三酯濃度的趨勢(shì)，不利于動(dòng)物體的健康，在飼糧中加入益生菌與酶制劑使機(jī)體甘油三酯維持在了一個(gè)適宜的水平，且兩者合用表現(xiàn)出了一定的協(xié)同效應(yīng)。

膽固醇是動(dòng)物細(xì)胞各種膜相結(jié)構(gòu)及神經(jīng)髓鞘的重要組成部分,是膽汁酸、類固醇激素及VD3的前體,還是血液中脂類轉(zhuǎn)移系統(tǒng)的必需因子,具有重要的生理功能。血清膽固醇維持在相對(duì)較高的水平,對(duì)于飼養(yǎng)周期短、新陳代謝旺盛的動(dòng)物來說,對(duì)其快速生長(zhǎng)應(yīng)該是有益的。本試驗(yàn)中,單獨(dú)添加益生菌顯示有明顯降低血清總膽固醇含量的趨勢(shì)，這與前人研究結(jié)果基本一致,這可能與微生物對(duì)膽固醇的吸收及益生菌的添加提高了機(jī)體脂肪酶活性,并使游離膽酸鹽與膽固醇共沉淀,同時(shí)限制了內(nèi)源性膽固醇的合成有關(guān)。而益生菌與酶制劑組合使用組的血清膽固醇含量明顯高于其他各組,有研究報(bào)道,血清膽固醇是反映日糧中脂肪或脂肪酸含量的重要指標(biāo),二者呈正相關(guān),而高能量日糧脂肪含量更高。因酶與益生菌聯(lián)用可顯著提高日糧的能量水平及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,從而可影響血清膽固醇含量,同時(shí)血清高膽固醇含量對(duì)本研究試驗(yàn)動(dòng)物(快長(zhǎng)型黃羽肉雞)及飼養(yǎng)周期(全期飼養(yǎng)48 d)等條件來說表現(xiàn)出了較好的適應(yīng)性，能夠滿足試雞快速生長(zhǎng)及旺盛的新陳代謝需要。這與作者所做的飼養(yǎng)試驗(yàn)及代謝試驗(yàn)所得結(jié)果也基本吻合，不過益生菌與酶制劑合用提高肉雞血清膽固醇含量的機(jī)理有待進(jìn)一步研究確定。

目前，關(guān)于肉雞血清乳酸含量與其生長(zhǎng)性能之間關(guān)系的研究報(bào)道非常少。蔣桂韜報(bào)道，在小麥型日糧中添加木聚糖酶在一定程度上提高了黃羽肉仔雞血清乳酸含量，但差異不顯著（P＞0.05）。血乳酸濃度的變化可以反映出機(jī)體對(duì)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)和利用的動(dòng)態(tài)平衡狀況及能量代謝水平。在代謝過程中乳酸脫氫酶將丙酮酸轉(zhuǎn)換為乳酸。在一般的新陳代謝過程中乳酸不斷被產(chǎn)生，但是其濃度維持一種動(dòng)態(tài)平衡，一般不會(huì)上升，只有在乳酸產(chǎn)生加快，而又無法被及時(shí)運(yùn)走時(shí)其濃度才會(huì)提高。若當(dāng)組織所需的能量無法通過有氧呼吸得以滿足，及組織無法獲得足夠的氧或是無法足夠快地處理氧的情況下乳酸的濃度會(huì)上升。而有氧呼吸產(chǎn)生的供給機(jī)體的能量比生成乳酸的無氧呼吸過程高很多。在本試驗(yàn)中，益生菌與酶制劑組合使用獲得了最低的血清乳酸濃度，且顯著低于飼喂基礎(chǔ)日糧的Ⅰ組（P＜0.05），說明益生菌與酶制劑的組合使用明顯提高了試雞有氧呼吸的水平，減少了機(jī)體的無氧呼吸，從而使機(jī)體的能量代謝水平提高，這與生產(chǎn)性能及真代謝能試驗(yàn)結(jié)果相吻合。同時(shí)，單獨(dú)添加復(fù)合酶制劑未見使血清乳酸含量升高，這與蔣桂韜研究的結(jié)果不一致，可能是由于酶制劑類型、添加比例、日糧結(jié)構(gòu)等不同所造成的差異。添加益生菌的Ⅱ組血清乳酸含量也較高，分析原因可能是芽孢桿菌可以產(chǎn)生乙酸、丙酸、丁酸等降低了消化道pH值，利于乳酸菌生長(zhǎng)繁殖，而乳酸菌產(chǎn)生的乳酸被試雞機(jī)體吸收從而升高了血清乳酸濃度,但具體機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

尿素氮是體內(nèi)氨基酸分解代謝的最終產(chǎn)物之一，有報(bào)道指出，機(jī)體蛋白質(zhì)代謝良好時(shí)，血液尿素氮濃度降低，還有肉雞日糧中氨基酸總量和精氨酸比例適宜時(shí)，血清尿素氮最低，同時(shí)經(jīng)動(dòng)物體腎臟排出的非蛋白氮50%是尿素氮，因此，血清尿素氮是反映機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝情況、日糧中氨基酸的平衡情況及動(dòng)物體腎臟功能正常與否的重要標(biāo)志。本試驗(yàn)中，各組血清尿素氮濃度無顯著差異（P＞0.05），但Ⅲ組及Ⅳ組有降低血清尿素氮含量的趨勢(shì)，說明在兩組試雞體內(nèi)氨基酸代謝旺盛，蛋白質(zhì)分解減少而合成代謝加強(qiáng)，氮沉積增加，飼料中蛋白質(zhì)利用率上升，這也與粗蛋白真代謝率的結(jié)果基本吻合。同時(shí)，血清尿素氮結(jié)果還說明肉雞日糧中的氨基酸總量與精氨酸的比例平衡沒有受到益生菌、酶制劑添加劑的破壞，且各處理對(duì)試雞腎臟功能也無不良影響。

天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶在體內(nèi)分布廣泛，但主要存在于肝臟、腎臟、心臟等組織器官細(xì)胞中，是參與肝臟氨基代謝的重要酶，在非必需氨基酸的合成中起重要的中介作用，其活性是反映肝臟、心臟等功能的重要且靈敏的指標(biāo)。本試驗(yàn)中，益生菌與酶制劑組合添加組的天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性最高，且顯著高于空白對(duì)照組，說明益生菌與酶制劑組合使用能提高血清代謝酶酶活，增加肉雞肝臟合成蛋白的能力以及維持肝臟的正常功能，使機(jī)體內(nèi)非必需氨基酸的轉(zhuǎn)化和生成增加，促進(jìn)了蛋白質(zhì)的沉積。

生長(zhǎng)激素的功能主要有刺激骨骼生長(zhǎng)，促進(jìn)黏多糖及膠原的合成，還可影響蛋白質(zhì)、糖類、脂類的代謝，最終影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能；胰島素可促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞,使糖元的合成加強(qiáng),亦可促進(jìn)脂肪沉積和蛋白質(zhì)、核酸的合成，有利于肌肉發(fā)育，加強(qiáng)了機(jī)體內(nèi)的合成代謝，從而達(dá)到改善肉雞的胴體性狀，促進(jìn)生長(zhǎng)的效果。本試驗(yàn)的結(jié)果顯示，空白組及益生菌組的血清生長(zhǎng)激素濃度極顯著地高于其他3組(P＜0.01),血清胰島素濃度各組間無顯著差異（P＞0.05），但是空白組的胰島素濃度最高，這與劉燕強(qiáng)等、高峰等、艾曉杰等、宋凱等和羅定媛等報(bào)道的研究結(jié)果不一致，分析原因可能與試雞的日齡、所處生長(zhǎng)階段及日糧營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)有關(guān)。有研究指出，在大麥型或小麥型日糧中加入酶制劑能提高雛雞血液生長(zhǎng)激素及胰島素水平，而本試驗(yàn)飼喂的是玉米-豆粕-雜粕型日糧，且在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)試雞采血測(cè)定血液激素指標(biāo)，結(jié)合參考本研究飼養(yǎng)試驗(yàn)及血液常規(guī)生化指標(biāo)結(jié)果分析，酶制劑及其與益生菌組合使用在本試驗(yàn)條件下具有調(diào)節(jié)動(dòng)物體的內(nèi)分泌，迅速提升雛雞機(jī)體的基礎(chǔ)生長(zhǎng)代謝水平的作用；而在生長(zhǎng)后期，酶制劑及其與益生菌組合使用組試雞已處在一種同化作用與異化作用都較強(qiáng)的代謝水平下，即合成與分解代謝在一種新的較高的水平上達(dá)到了相對(duì)平衡的狀態(tài)，此時(shí)血液生長(zhǎng)激素、胰島素含量也建立并保持在一種新的動(dòng)態(tài)平衡內(nèi)。同時(shí)，空白組與益生菌組血清較高含量的生長(zhǎng)激素及胰島素從另一個(gè)側(cè)面說明兩組試雞后期機(jī)體養(yǎng)分吸收及代謝利用水平低，不能滿足機(jī)體生長(zhǎng)需要，出現(xiàn)“供不應(yīng)求”的現(xiàn)象，從而反饋調(diào)節(jié)使機(jī)體激素水平升高來促進(jìn)對(duì)養(yǎng)分的同化吸收利用，使機(jī)體成長(zhǎng)。

3.2 益生菌與酶制劑及其協(xié)同效應(yīng)對(duì)黃羽肉雞免疫性能的影響

法氏囊是禽類特有的體液免疫中樞免疫器官，胸腺是細(xì)胞免疫中樞器官，兩者分別是B和T淋巴細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所,脾臟是禽類最大的外周免疫器官,參與全身的非特異性及特異性免疫,中樞及外周免疫系統(tǒng)器官的發(fā)育狀況直接決定著畜禽機(jī)體的免疫水平。免疫器官重量增加一般認(rèn)為是其自身細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育和分裂增殖所致,為免疫增強(qiáng)的表現(xiàn),其指數(shù)的提高表明該器官成熟快。而Rivas等報(bào)道，胸腺、脾臟和法氏囊的重量可用于評(píng)價(jià)雛雞的免疫狀況。因此,免疫器官指數(shù)是反映機(jī)體免疫功能的一個(gè)重要指標(biāo)。在本試驗(yàn)中，各處理試雞胸腺、法氏囊、脾臟指數(shù)均無明顯差異(P＞0.05),說明在本試驗(yàn)條件下益生菌、酶制劑及抗生素對(duì)免疫器官指數(shù)均無較大影響,不過添加復(fù)合酶制劑較其他各處理組更有改善免疫器官指數(shù)的趨勢(shì)。

血清蛋白質(zhì)是血液的重要成分，可反映機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀況，維持體液的膠體滲透壓，保持機(jī)體的恒常性，并具有免疫、離子轉(zhuǎn)運(yùn)、凝血抗凝血及修補(bǔ)組織等功能。血清總蛋白由白蛋白與球蛋白構(gòu)成，總蛋白及白蛋白含量升高是蛋白質(zhì)代謝旺盛的體現(xiàn)，表明氨基酸、蛋白質(zhì)的吸收利用率提高，機(jī)體肝臟的蛋白質(zhì)合成代謝及組織蛋白質(zhì)的沉積作用增強(qiáng)，進(jìn)而提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。血清白蛋白還可補(bǔ)充體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)，有助于升高抗體水平，提高免疫力，防止白細(xì)胞減少及貧血等。球蛋白占血清總蛋白的比例較大，主要由單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)產(chǎn)生,機(jī)體循環(huán)抗體水平升高時(shí),血清球蛋白數(shù)量也增加,其能與外來的特異性抗原起免疫反應(yīng)而保護(hù)機(jī)體,其含量的高低可在一定程度上反映動(dòng)物的免疫水平及生理狀況,它的含量升高也可引起總蛋白含量上升。白球比反映脾臟的功能狀況,同時(shí)也是衡量機(jī)體免疫水平的一項(xiàng)指標(biāo)。白蛋白/球蛋白值的下降說明機(jī)體特異性免疫應(yīng)答水平提升,抗病力在增強(qiáng)。已有很多研究報(bào)道,益生菌與酶制劑能提高動(dòng)物機(jī)體血清蛋白含量,本試驗(yàn)中,益生菌與酶制劑組合添加的Ⅳ組較其他組明顯提高了試雞血液總蛋白含量，Ⅳ組的白蛋白含量與添加抗生素的Ⅴ組相當(dāng)，較空白對(duì)照Ⅰ組提高了7.79%(P＞0.05)，球蛋白含量較Ⅴ組提高了2.77%(P＞0.05),白球比Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組間差異不顯著(P＞0.05),說明益生菌與酶制劑的協(xié)同效應(yīng)具有提升血液總蛋白、白蛋白、球蛋白含量，增進(jìn)機(jī)體免疫力的效果。值得一提的是Ⅲ組的總蛋白、白蛋白、球蛋白濃度明顯低于其他各組,白球比也最高，這與王佳麗等的研究結(jié)果存在差異,而與張金生等報(bào)道的結(jié)果類似,本試驗(yàn)認(rèn)為，造成這種差異的原因可能如White等的研究報(bào)道：血清蛋白的迅速轉(zhuǎn)換和長(zhǎng)期限制蛋白質(zhì)攝入量可引起血清白蛋白含量下降。本試驗(yàn)中酶制劑的添加可能使得肉雞的蛋白質(zhì)分解與合成代謝水平提高,血液蛋白的轉(zhuǎn)換速度加快,進(jìn)而降低血清白蛋白、總蛋白含量；另一種原因可能是酶制劑的添加使得養(yǎng)分在前腸段就被充分分解,為動(dòng)物機(jī)體吸收利用,而使得進(jìn)入后腸段可供后腸微生物利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少,從而使腸道微生態(tài)平衡出現(xiàn)紊亂,腸道微生物的屏障保護(hù)作用消失,病原體及有害物質(zhì)進(jìn)入機(jī)體,進(jìn)而影響肉雞血液蛋白含量及免疫水平。但具體原理需要進(jìn)一步研究。

甲狀腺素對(duì)DNA和蛋白質(zhì)的合成具有重要作用，主要促進(jìn)器官和組織的分化。同時(shí)甲狀腺激素又能增強(qiáng)糖原、蛋白質(zhì)、脂肪的分解，有利于機(jī)體的供能，還具有免疫增強(qiáng)作用，是調(diào)節(jié)機(jī)體代謝、生長(zhǎng)發(fā)育和免疫功能不可或缺的內(nèi)分泌激素。一般認(rèn)為，三碘甲腺原氨酸（T3）是發(fā)揮生理功能的主要激素，其生理效價(jià)是甲狀腺素（T4）的數(shù)倍，是影響肉雞生長(zhǎng)發(fā)育的重要因子，T3一部分由甲狀腺直接分泌，另一部分則來源于T4在5'-脫單碘酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)門3。血循環(huán)中的T3、T4絕大部分為結(jié)合態(tài)，但真正發(fā)揮生理作用的卻是游離態(tài)的T3、T4。夏東等的研究表明，觀察雞的甲狀腺分泌功能除了看T3、T4的測(cè)定值外還需要觀察T3/T4值，該值的大小可反映出T4向T3的轉(zhuǎn)化能力，并且在一定程度上反映肉雞機(jī)體的蛋白質(zhì)合成代謝水平和胴體增重情況。多項(xiàng)研究報(bào)道了益生菌與酶制劑添加于肉雞飼糧中均具有提升機(jī)體T3、T4水平，調(diào)節(jié)機(jī)體代謝及免疫的效應(yīng)。在本試驗(yàn)中，游離的T4濃度Ⅴ組及Ⅳ組較高,空白對(duì)照Ⅰ組及Ⅱ組較低,而游離的T3則是益生菌Ⅱ組、空白Ⅰ組明顯高于Ⅴ組(P＜0.05),Ⅳ組的FT3濃度也高于Ⅴ組及Ⅲ組。而FT3/FT4值Ⅰ、Ⅱ兩組一致且明顯高于組合添加Ⅳ組(P＜0.05)和Ⅴ組（P＜0.01），說明Ⅰ、Ⅱ兩組肉雞機(jī)體內(nèi)T4向T3大量轉(zhuǎn)化。同時(shí)研究證實(shí)，T3、T4的含量與血清生長(zhǎng)激素、胰島素水平密切相關(guān)，本研究中血清FT3、FT4的含量與之前測(cè)得的試雞血清生長(zhǎng)激素、胰島素含量數(shù)據(jù)也基本吻合，即Ⅱ組與空白對(duì)照Ⅰ組的血清生長(zhǎng)激素、胰島素、FT3、FT4以及FT3/FT4值均較高，這些表明空白對(duì)照Ⅰ組及Ⅱ組兩組試雞可能正處于生長(zhǎng)發(fā)育旺盛期，合成代謝在增強(qiáng)，但是結(jié)合該兩組試雞生產(chǎn)性能水平并不比Ⅳ組好的結(jié)果，分析產(chǎn)生這種差異的原因可能是益生菌與酶制劑組合添加組試雞機(jī)體的基礎(chǔ)代謝水平在飼養(yǎng)試驗(yàn)后期已達(dá)到比空白對(duì)照Ⅰ組及Ⅱ組高很多的水平，在這種新的較高的代謝水平上，酶與益生菌合用組試雞機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)的激素產(chǎn)生也達(dá)到一種新的適宜的平衡狀態(tài)，這就可能使得益生菌與酶制劑組合添加組血清激素水平不如Ⅰ、Ⅱ兩組高而生產(chǎn)性能卻獲得較優(yōu)的結(jié)果，但是否真如猜想這般，還需要進(jìn)一步研究證實(shí)。

4 結(jié)論

在黃羽肉雞飼糧中添加抗生素、益生菌、酶制劑以及酶與益生菌組合使用，對(duì)試雞血液生理生化指標(biāo)及免疫功能均有不同程度的改善作用，但益生菌與酶制劑聯(lián)用的協(xié)同效應(yīng)表現(xiàn)出了一定的優(yōu)勢(shì)，并表現(xiàn)出具有較強(qiáng)的替代抗生素飼料添加劑的潛能。

（參考文獻(xiàn)88篇，刊略，需者可函索）