周春麗，呂玲琴，蘇虎，李玉萍

（江西科技師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，江西 南昌 330013）

長(zhǎng)期以來(lái)，人們只知道NO是一種環(huán)境污染物,污染空氣，形成酸雨，破壞臭氧層,對(duì)人類的危害引起全球的關(guān)注。而在生物活性分子一氧化氮于1987年被Palmer等用化學(xué)發(fā)光方法證實(shí)其本質(zhì)是NO[1-2]后。NO受到人們高度重視，成為研究的熱點(diǎn)。1992年被Science評(píng)為“年度明星分子”[3]。而在1998年，F(xiàn)urchgott、Ignarro和Murad也對(duì)NO作了相應(yīng)的研究，并獲得了當(dāng)年的諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。NO也是植物體中普遍存在的關(guān)鍵信號(hào)分子，參與植物細(xì)胞的多種生理過程。其在園藝產(chǎn)品保鮮作用也陸續(xù)展開研究。如：Leshem和Wills[4]首次報(bào)道NO對(duì)草莓果實(shí)成熟和衰老影響和控制作用，NO與植物細(xì)胞中的脂氧合酶[5]、漆酶[6]、過氧化氫酶[7]、抗壞血酸氧化酶[8]的反應(yīng)，從而影響植物細(xì)胞的成熟與衰老。

截止到2010年，氣調(diào)保鮮仍然是蔬菜保鮮的主要方式，NO用于氣調(diào)保鮮是近年來(lái)農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮的一個(gè)研究熱點(diǎn)，近來(lái)，有學(xué)者用SNP（硝普鈉）研究了對(duì)蒜苔和馬鈴薯保鮮效果的影響[9-10]，并觀察其保鮮效果。但NO對(duì)果蔬類具體的作用機(jī)理，迄今還少有更系統(tǒng)、更完整的研究。本文將從以下幾個(gè)方面概述NO對(duì)果蔬的作用機(jī)理及其研究展望。

1 NO的物理化學(xué)特性

1.1 NO的物理特性

一氧化氮是氮氧化合物，化學(xué)式NO，分子量30，氮的化合價(jià)為+2。無(wú)色氣體，難溶于水。能助燃，有毒，具刺激性。根據(jù)共振理論，NO有以下幾種共振形式[11]：

圖1 NO的幾種共振形式Fig.1 Several resonance form in nitric oxide

NO有一個(gè)處于2p-Ⅱ反鍵軌道的單電子，是一個(gè)自由基，得到一個(gè)電子，生成NO-；失去一個(gè)電子生成了一氧化氮正離子NO+。在標(biāo)準(zhǔn)條件下（在水中，25℃，101 kPa），它的熔點(diǎn)為163.6℃，沸點(diǎn)為151.8℃，溶解度為1.8×103mol/dm3。其他一些物理化學(xué)性質(zhì)見表1[12]。

表1 一氧化氮的物理化學(xué)性質(zhì)Table 1 Physichemical property of NO

1.2 NO的化學(xué)特性

NO具有強(qiáng)氧化性。與易燃物、有機(jī)物接觸易著火燃燒。遇到氫氣爆炸性化合。接觸空氣會(huì)散發(fā)出棕色有氧化性的煙霧。一氧化氮較不活潑，但在空氣中易被氧化成二氧化氮或是三氧化二氮[13]。水溶液中NO的自養(yǎng)化是非常復(fù)雜的過程，存在兩個(gè)可能的機(jī)制[14]。在機(jī)制I中ONOO是反應(yīng)產(chǎn)生的第一個(gè)中間產(chǎn)物，接著連續(xù)發(fā)生 四 步 化 學(xué) 反 應(yīng) 分 別 生 成 ONOONO、NO2、N2O3和2NO2-。機(jī)制II是從NO的二聚化反應(yīng)開始生成N2O2，接著加氧反應(yīng)生成N2O4，N2O4轉(zhuǎn)變?yōu)閮煞肿覰O2，NO2繼續(xù)和NO發(fā)生反應(yīng)生成N2O3，N2O3發(fā)生水解生成NO2-。但是水溶液中NO與O2的總反應(yīng)式與氣相中N2O3溶于水后的總反應(yīng)式相同。NO與O2-反應(yīng)生成ONOO-，其質(zhì)子化產(chǎn)物為化學(xué)活性很強(qiáng)的過氧亞硝（ONOOH）。后者可與甲硫氨酸或巰甲基化合物反應(yīng)產(chǎn)生NO2、OH-、乙烯等[15]。

2 植物體內(nèi)一氧化氮的來(lái)源

2.1 內(nèi)源NO的來(lái)源

2000年以后，很多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)在油菜、菠菜、玉米、甘蔗煙草等多種植物內(nèi)中檢測(cè)到NO的存在。表明植物體內(nèi)至少存在3條形成NO的途徑，包括一氧化氮酶（NOS）合成NO；硝酸還原酶或亞硝酸還原酶（NR/NiR）形成NO；以及非酶途徑形成NO。具體形成的方式和步驟如圖2[16]。

圖2 內(nèi)源NO的來(lái)源Fig.2 The origin of nitric oxide invegetables and fruits

2.1.1 一氧化氮酶合成NO

現(xiàn)今，對(duì)動(dòng)物的NOS已經(jīng)有了比較明確的認(rèn)識(shí)，認(rèn)為動(dòng)物細(xì)胞中有神經(jīng)NOS（nNOS）、內(nèi)皮細(xì)胞NOS（eNOS）和可誘導(dǎo)的NOS（iNOS）等3種NOS[17]。在哺乳動(dòng)物中，NO是由L-精氨酸、NADPH和氧分子通過NOS催化形成的，該反應(yīng)需要輔因子四氫生物素喋呤，反應(yīng)的終產(chǎn)物為L(zhǎng)-瓜氨酸、NO和NADP+。自從在豆科植物中檢測(cè)到類似哺乳動(dòng)物類型的NOS以來(lái)，植物NOS的研究取得顯著進(jìn)展，先后在煙草、大豆、小麥、玉米和紫杉等植物中也發(fā)現(xiàn)了類似NOS的活性存在，這種活性受到動(dòng)物NOS抑制劑的抑制。目前，人們已經(jīng)對(duì)植物中NOS的編碼基因、cDNA序列以及與動(dòng)物NOS高度同源的蛋白的分離等方面展開研究。最近，煙草NOS被成功地分離鑒定，認(rèn)為它是甘氨酸羧酶P蛋白的一種變體形式。這是在植物中第一次發(fā)現(xiàn)與哺乳動(dòng)物NOS相似的酶[18]。今后更多植物內(nèi)源NOS的分離鑒定及其編碼基因的確認(rèn)將會(huì)為植物NOS的存在和NO產(chǎn)生機(jī)制提供充分的證據(jù)。

2.1.2 硝酸還原酶合成一氧化氮

通過實(shí)驗(yàn)，已經(jīng)在原核生物中發(fā)現(xiàn)3種不同的NR家族[19]，即NASI、NAR和NAP。其中NASI位于胞質(zhì)區(qū)域[20]。而高等植物中的NR/NiR是氮代謝的關(guān)鍵酶。NR/NiR催化硝酸鹽或亞硝酸鹽和NADH或NADPH形成NO[21]，具體如圖3，目前已經(jīng)在向日葵、菠菜等中發(fā)現(xiàn)NR催化形成NO[21-22]，而硝酸還原酶催化產(chǎn)生NO的研究已經(jīng)在完整的植株如大豆、太陽(yáng)花葉片、菠菜葉片等廣泛開展。

圖3 植物體內(nèi)由NR催化形成NO的途徑[23]Fig.3 The path of formation nitric oxide by nitrate reductase catalysis in plants

2.1.3 非酶促途徑

非酶促反應(yīng)產(chǎn)生NO在植物組織中占有重要地位。大多數(shù)情況下，在酸化的區(qū)域或組織中NO多經(jīng)非酶途徑形成[22]。NO可以經(jīng)由反硝化作用和生物固氮形成，硝化作用和反硝化作用將N2O氧化形成NO，由類胡蘿卜素轉(zhuǎn)化的光介導(dǎo)非酶反應(yīng)產(chǎn)生NO，抗壞血酸或光參與時(shí)由NO2形成NO，NO也是植物呼吸作用的副產(chǎn)品，植物甚至可以感知土壤微生物產(chǎn)生NO。NO還可在外界脅迫條件下如除草劑處理后產(chǎn)生，受脅迫的植物細(xì)胞中伴隨氧爆（oxidative burst）也可以迅速產(chǎn)生NO[17]。

一般來(lái)說，有氧條件下以來(lái)NR的途徑是形成NO的主要方式，酸化區(qū)域或組織則多是非酶途徑形成NO[22]。

2.2 外源NO的來(lái)源[13]

一些化學(xué)反應(yīng)可以得到NO

銅和稀硝酸反應(yīng) 3Cu+8HNO3=3Cu（NO3）2＋2NO＋4H2O

二氧化氮通到水中H2O+3NO2=NO+2HNO3

在空氣中高壓放電N2+O2=2NO

再比如KI、硫酸與KNO2三者混合反應(yīng)（KNO2與NO之間的比例為1∶1）

2KNO2+2KI+2H2SO4→2NO+I2+2H2O+2K2SO4

亞硝酸和抗壞血酸（ascorbic acid ASA）等在酸性條件下反應(yīng)也可以產(chǎn)生一氧化氮。其方程式如下：

此外，可以從釋放NO的載體化合物中獲得，比如硝普鈉（sodium nitroprusside，SNP）和S-亞硝基-N-乙?；梗⊿－nitroso－N－acetyl－pennicillamine，SNAP）。

3 NO對(duì)果蔬的作用機(jī)理

目前NO延長(zhǎng)綠色蔬菜保鮮保鮮期的研究主要集中在2個(gè)方面，一方面是NO的最佳處理?xiàng)l件，如濃度、時(shí)間等因素的研究；另一方面是NO的釋放研究。關(guān)于NO延長(zhǎng)果蔬保存期的機(jī)理也主要存在2個(gè)途徑，一方面認(rèn)為NO處理抑制了果蔬內(nèi)源乙烯的合成，從而延緩其成熟，達(dá)到延長(zhǎng)保鮮的效果[24]；另一方面認(rèn)為NO處理使得果蔬抗氧化酶系，如超氧化物歧酶（Super oxide dismasts，SOD），過氧化物酶（Peroxidase，POD）等活性增強(qiáng)，提高了抗氧化能力，從而達(dá)到延長(zhǎng)保鮮期的效果[25]。

3.1 NO抑制內(nèi)源乙烯的形成

乙烯在果實(shí)成熟過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用，這種作用是通過乙烯生成量的增加和組織對(duì)乙烯敏感性的改變而實(shí)現(xiàn)的。

ACO也是植物衰老過程中乙烯生物合成的一個(gè)關(guān)鍵酶。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，NO作為一種生物活性小分子，可以有效的抑制植物組織中ACS和ACO的活性[24-27]，見圖4，從而顯著抑制了乙烯的生物合成。從而延緩綠色蔬菜的衰老。

圖4 NO和過氧化硝酸的乙烯合成調(diào)控模型Fig.4 Proposed mode of NO and peroxynit rite down regulation of ethylence

植物體內(nèi)乙烯受體是乙烯生物合成和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)因子，可以感知乙烯的作用，并誘導(dǎo)ACO基因的表達(dá)，表現(xiàn)為外源乙烯處理后蔬果的ACO活性迅速升高和乙烯生成量的增加。NO還可以通過調(diào)控ACC合成酶及ACC氧化酶而抑制乙烯的合成[28]。Leshem和Haramaty[29]用KNO3等反應(yīng)產(chǎn)生的NO熏蒸豌豆葉片，并在部分處理的溶液中加入乙烯前體物質(zhì)ACC，2 h后發(fā)現(xiàn)無(wú)論施用ACC與否，NO與乙烯均同時(shí)釋放，在未以ACC處理的實(shí)驗(yàn)中，乙烯和NO釋放均下降，但NO釋放量多于乙烯。低濃度NO促進(jìn)豌豆葉片的伸展，高濃度則有使其縮小的趨勢(shì)，將葉片直接置于純NO中時(shí)出現(xiàn)明顯生長(zhǎng)下降趨勢(shì)。于此，可以推斷出，乙烯濃度的變化對(duì)蔬果成熟與衰老有很大的影響。

Leshem等[30]采用N－叔丁基－α－苯基硝酮（PBN）和3－嗎啉－斯德酮亞胺（3－morpholinosydnonimine，SIN－1）等所釋放的一定濃度的外源NO來(lái)處理鱷梨、香蕉、櫻桃、番茄、獼猴桃、柿和甜橙后，發(fā)現(xiàn)未成熟果實(shí)產(chǎn)生的內(nèi)源NO量均顯著高于成熟的果實(shí)，鱷梨和香蕉的未成熟組織中NO含量分別是其成熟果實(shí)的約10倍和4倍，證明外源NO均可延遲其成熟衰老。外源乙烯可以促進(jìn)內(nèi)源乙烯的生成，而NO可以抑制外源乙烯對(duì)內(nèi)源乙烯的作用，從而達(dá)到抑制綠色蔬菜成熟與衰老。2007年，劉孟臣等證實(shí)了NO顯著抑制了果實(shí)內(nèi)源乙烯的生物合成，并且NO處理可以顯著抑制外源乙烯所引起的果實(shí)中乙烯的生物合成[31]。2009年劉國(guó)華等，已經(jīng)驗(yàn)證了NO可能作為H2O2、Ca2+對(duì)介導(dǎo)信號(hào)來(lái)誘導(dǎo)氣孔的關(guān)閉，調(diào)節(jié)乙烯的濃度，從而延緩蔬果的衰老，達(dá)到保鮮效果[32-33]。具體蔬果內(nèi)的NO是怎樣起作用的，見圖5。

圖5 植物體內(nèi)NO作用途徑Fig.5 The path nitric oxide action in plants

圖5是參照Leshem[34]和張文利[35]，并略有改動(dòng)。ACC：1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸，ACO：順烏頭酸酶，ACS：ACC合成酶，ADPRC：ADP-核糖環(huán)化酶，Ap：抗壞血酸過氧化物酶，cADPR：環(huán)式ADP-核糖，CAR：類胡蘿卜素，CAT：過氧化氫酶，CHS：苯基苯乙烯酮合成酶，COX：細(xì)胞色素氧化酶，F(xiàn)R：自由基，cGC：鳥苷酸環(huán)化酶，GST：谷胱苷肽硫轉(zhuǎn)移酶，IRP：鐵調(diào)節(jié)蛋白，NOS：-氧化氮合酶，NR：硝酸還原酶，PAL：苯丙氨酸解氨酶。PR.1：病程相關(guān)蛋白-1，SA：水楊酸，SAM：S一腺苷甲硫氨酸，SIPK：水楊酸誘導(dǎo)蛋白激酶，cGMP：環(huán)鳥苷單磷酸，（＋）：促進(jìn)作用，（-）：抑制作用，（…）：尚需確定的步驟。

3.2 NO與自由基和各酶對(duì)延緩蔬果的成熟與衰老的機(jī)理

衰老自由基學(xué)說認(rèn)為，自由基產(chǎn)生與清除的平衡對(duì)維持生物體正常物質(zhì)代謝起作用，衰老是自由基過度氧化的過程，任何降低自由基過度氧化的措施都可以延緩衰老。NO可能通過調(diào)節(jié)植物體內(nèi)抗氧化酶的活性調(diào)節(jié)ROS含量。已有研究表明NO可通過影響植物體內(nèi)的抗氧化酶體系影響活性氧含量，從而調(diào)控植物體的衰老進(jìn)程。

NO對(duì)生物體有雙重作用。一方面，低濃度NO能迅速清除超氧陰離子（O2－）和脂質(zhì)自由基（R－），阻斷包括脂質(zhì)過氧化在內(nèi)的ROS參與的各種傷害反應(yīng)，誘導(dǎo)抗氧化酶基因的表達(dá)，起保護(hù)作用[36-37]。另一方面，高濃度NO與O2-相互作用生成大量的過氧亞硝酸陰離子（ONOO-），后者質(zhì)子化形成強(qiáng)氧化性的過氧亞硝酸ONOOH，破壞生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能，最終具有生物毒性[36]。Lurie S等研究表明，蔬果在采收后H2O2的活性氧代謝加強(qiáng)，對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒害，導(dǎo)致細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的破壞，從而使果實(shí)軟化衰老加快[38]。H2O2可氧化金屬形成高價(jià)金屬氧代物等強(qiáng)氧化劑，引起膜脂過氧化造成細(xì)胞損傷[39]。H2O2可能通過兩個(gè)途徑來(lái)減緩這種傷害：一方面，SNP釋放的H2O2既能直接與生物分子發(fā)生相互作用，又能與超氧化物或氧反應(yīng)生成氮氧化合物（RONS）來(lái)間接地發(fā)生硝化作用和氧化作用等[40]，使采后草莓果實(shí)維持較高的CAT活性，通過增強(qiáng)CAT活性來(lái)消除H2O2引起的膜功能和結(jié)構(gòu)的破壞，使之能更好地維持細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)的區(qū)域化作用和膜結(jié)構(gòu)的完整。另一方面，植物組織膜脂過氧化作用的啟動(dòng)需要LOX[41]，SNP處理明顯地抑制了LOX酶活性，其原因可能是NO與在LOX活性位點(diǎn)上的非血紅素離子發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，把這種高價(jià)化合物還原到低價(jià)狀態(tài)，改變了LOX酶的部分立體結(jié)構(gòu)[42]，導(dǎo)致LOX酶的活性降低，延遲脂質(zhì)過氧化作用的啟動(dòng)，保護(hù)膜結(jié)構(gòu)的完整，延緩果實(shí)軟化。2005年朱樹華等在NO對(duì)草莓果實(shí)衰老的影響中，證明了NO可以抑制纖維素酶和LOX活性，提高CAT活性，表現(xiàn)出延緩草莓果實(shí)軟化衰老的生理作用[7]。2009年，朱先波等用NO處理了馬鈴薯，并得出NO可以顯著降低馬鈴薯的失重率、腐爛率和萌芽率；延緩VC含量和可溶性固形物含量的下降；抑制還原糖的生成；提高了SOD酶的活性，顯著降低了乙烯釋放速率、呼吸強(qiáng)度、淀粉酶活性和PPO的活性。研究說明NO處理可以改善馬鈴薯的貯藏品質(zhì)[10]。

由此，可以推斷出NO的處理影響果實(shí)內(nèi)自由基、CAT、SOD、POD、LOX等酶的活性，從而延緩果蔬的成熟與衰老，但其具體的作用機(jī)理，還有待進(jìn)一步的研究。

4 研究展望

當(dāng)前，果蔬產(chǎn)品貯藏保鮮中常用低溫貯藏保鮮技術(shù)和氣調(diào)貯藏保鮮技術(shù)。低溫貯藏保鮮是以控制溫度為條件來(lái)抑制果蔬生理活性、抑制微生物的繁殖，其缺點(diǎn)是在貯藏中果蔬尚存在部分微生物繼續(xù)活動(dòng)，并發(fā)生萎縮現(xiàn)象。氣調(diào)貯藏是較先進(jìn)的果蔬保鮮法，發(fā)展較快，可以延緩果蔬衰老，減少乙烯對(duì)果蔬的刺激，降低腐爛率等，成為正在興起的研究熱潮。

NO廣泛存在于生物體中，不僅影響著物的生長(zhǎng)發(fā)育等一系列生理過程，而且在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中擔(dān)任關(guān)鍵角色。適宜濃度NO處理具有效果明顯、省時(shí)省力、節(jié)約成本等優(yōu)點(diǎn)。因此，研究NO在果蔬產(chǎn)品貯藏保鮮中的應(yīng)用技術(shù)有一定的理論和實(shí)際意義，開發(fā)潛力很大，值得深入探討。

今后可考慮從以下幾個(gè)方面深入研究：

1）對(duì)果蔬保鮮方面的機(jī)理進(jìn)一步研究，并捕獲NO調(diào)控過程中保鮮基因表達(dá)水平與蔬菜保鮮效果之間的聯(lián)系。

2）調(diào)控內(nèi)源NO代謝過程中含量變化進(jìn)行產(chǎn)品保鮮的技術(shù)措施以及以NO保鮮不同園藝產(chǎn)品條件的優(yōu)化和技術(shù)體系的構(gòu)建。

3）NO參與成熟衰老過程中的乙烯調(diào)控及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程，以及通過控制乙烯來(lái)延緩果蔬成熟與衰老的作用機(jī)理。

4）調(diào)控內(nèi)源NO的含量代謝途徑和具體的作用機(jī)理。

5）NO通過對(duì)果蔬體內(nèi)各種酶的作用機(jī)理，來(lái)延緩果蔬的衰老。

[1]Furchgott R F，Zawadzki J V.The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acethylcholine[J].Nature，1980，288(5789):373-376

[2]Palmer R M，F(xiàn)errige A G，Moncada S Nitric.Oxide release accounts for the biological activity of endothelium-derived relaxing facto[J].Nature，1987，327(6122):52-526

[3]Koshland D E Jr.The molecular of the year[J].Science,1992,258(5090):1861

[4]Leshem Y Y,Wills RBH.Harnessing senescence delaying gases nitric oxide and nitrous oxide;a novel approach to postharvest control of fresh horticultural produce[J].Biol Plant,1998,41(1):1-10

[5]Nelson M J.The nitric oxide complex of ferrous soybean lipoxygenase-1,substrate,pH and ethanol effects on the active site iron[J].J Bio chem,1987,262(25):12137-12141

[6]Marthi C T,Morse R H,Kanne R M,et al.Reactions of nitric oxide with tree and fungal laccase[J].J Bio chemistry,1981,20(18):5147-5155

[7]朱樹華,周杰,束懷瑞.一氧化氮對(duì)草莓果實(shí)衰老的影響[J].園藝學(xué)報(bào),2005,32（4）：589-593

[8]Van Leeuwen F X P,Wever R,Van Gelder B F,et al.The interaction of nitric oxide with ascorbate oxidease[J].Bio chemistry Biophys Acta,1975,403(2):285

[9]屠蔭華,慧偉,李彩香,等.硝普鈉（SNP）對(duì)蒜苔保鮮效果的影響[J].食品工業(yè)科技，2008,9(10)：244-247

[10]朱先波,任小林,劉硯璞.NO處理馬鈴薯保鮮的影響[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，18（2）：237-240

[11]柳忠全,尚筱潔,羅海清,等.一氧化氮化學(xué)性質(zhì)的研究進(jìn)展[J].有機(jī)化學(xué)，2006,26（9）：1317-1321

[12]Butler A R,Williams D,Lyn H.The physiological role of nitric oxide[J].Chemical society reviews,1993,22(4):233-41

[13]朱樹華,周杰,束懷瑞.植物中一氧化氮與園藝產(chǎn)品的成熟和衰老[J].植物生理學(xué)通訊，2004，40（6）：733-740

[14]Czapski G,Goldstein S.The role of the reactions of NO with superoxide and oxygen in biological systems:a kinetic approach[J].Free Radic Biol Med,1995,19(6):785-94

[15]Squadrito GL，Pryor WA.0xidative chemistry of nitric oxide：the roles of superoxide，peroxynitrite，and carbon dioxide[J].Free Radic Biol Med，1998，25(4/5)：392-403

[16]Wojtaszek P.Nitric oxide in plants to NO or not to NO[J].Phytochemistry,2000,54(1):1-4

[17]柯世省.植物體內(nèi)一氧化氮的來(lái)源和生理效應(yīng)[J].生物教學(xué)，2008，33(11):7

[18]鄭金洲.課堂教學(xué)變革的十個(gè)要點(diǎn)[J].教育理論與實(shí)踐,2007,27(6)：28-33

[19]劉新,張蜀秋,婁成后.植物體內(nèi)一氧化氮的來(lái)源及其與其它信號(hào)分子之間的關(guān)系[J].植物生理學(xué)通訊，2003,39(5):513-514

[20]Richard D J,Berks B C,Russell D A,et al.Functional,biochemical and genetic dibersity of prokaryotic mitratere ductases[J].Cell Mol Life Sci,2001,58(2):165-178

[21]Rockel P,Strube F,Rockel A，et al.Regulation of nitric oxide production by plant nitrate reductase;in vitro and in vitro[J].J Exp Bot,2002,53（366）:103-110

[22]Yamasaki H,SakihamaY.Simultaneous production of nitric oxide and peroxynitrite by plant nitrate reducetase;in vitro evidence for the NR dependent formation of active nitrogen species[J].FEBSLett,2000,468(1):89-92

[23]Yamasaki H,Sakihama Y，Takahashi S.An alternative pathway for nitric oxide prduction in plants:New features of an old enzyme[J].Trends Plant Sci,1999，4(4):128-129

[24]Leshem Y Y,Pinchasov Y.NOn-invasive photoacoustic determi-nation of relative endogenous nitric oxide and ethylene content stoichiometry during the ripening of strawberries Fragaria anannasa（Duch.）and avocados Persea Americana （Mill.）[J].Journal of experimental botany,2000,51(349):1471-1473

[25]Xuewu Duan,Xingguo Su,Yanli You,et al.Effeect of nitric oxide on pericarp browning of harvested longan fruit in relation to pheNOlic metabolism[J].Food chemistry,2007,104(2):571-576

[26]Kwak S H,Lee S H.The reqturcmenm for Ca2+.Protein phosphoIylation,and dephosphorylation for ethylene signal transduction in Pasum sativum[J].L Plant Cell Physiology,1997，38(10)：1142-1149

[27]Zhu S H，Lau M C，Zhou J.lnhibition by nitric oxide of ethylenebiosyathesis and lipoxygenase activity in peach fruit drying storage[J].Postharvest biology and technology，2006，42(1)：41-48

[28]張少穎，饒景萍，高慧.一氧化氮對(duì)切月季瓶插過程中乙烯合成代謝的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2007,35（11）：172-175

[29]Leshem Y Y，Haramaty B.The characterization and contrasting effects of the nitric oxide free radical in vegetati Ve stress and sene-scence of Pisumsativum Linn.foliage[J].JPlant Phvsiol，1996，148(3/4)：258-263

[30]Leshem Y Y，Wills R B H，Ku V V V.Evidence for the function of the free radical gas nitric oxide（N0）as an endog enous maturanon and senescence regulating factor in higher plants[J].Plant Physiol Biochem，1998，36(11)：825-833

[31]劉孟臣，宋衛(wèi)紅，朱樹華,等.一氧化氮和外源乙烯處理對(duì)肥城桃果實(shí)乙烯生物合成的影響[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007,40（11）:2582-2586

[32]劉國(guó)華，侯麗霞，劉菁,等，H2O2介導(dǎo)的NO合成參與乙烯誘導(dǎo)的擬南介葉片氣孔關(guān)閉[J].自然科學(xué)進(jìn)展，2009,19（8）：841-851

[33]劉國(guó)華，劉菁，侯麗霞,等.NO可能作為Ca2+的下游信號(hào)介導(dǎo)乙烯誘導(dǎo)的蠶豆氣孔關(guān)閉[J].分子生物學(xué)報(bào)，2009,42（2）：145-155

[34]Leshem Y Y.Nitric oxide in plants：0ccure，F(xiàn)unction and Use[M].Dordrecht Boston,Kluwer Acad Pub，2000：50-78

[35]張文利.小麥順烏頭酸酶對(duì)一氧化氮和過氧化氫的敏感性[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2002：26-35

[36]Guo F Q,Okamoto M，Crawford N M.Identification of a plantnitric oxide synthase gene inVolved in hormonal signaling[J].Science，2003，302(5624)：100-103

[37]Desikan R,Grifths R,Hancock J,et a1.A new role for an oldenzyme：Nitrate reductase—mediate nitric oxide generation is required for abscisic acid-induced stomataI closure in Arabidopsis thaliana[J].Proc Natl Acad Sci USA，2002，99(25)：16314-16318

[38]Lurie S,Klein J D,Arie R B.Prestorage heat treatment delays development of supersicial scale on'Granny[J].Smith'apple Hort science,1991(2):166-167

[39]Puppo A,Halliwell B.Formation of hydroxyl radicals from hydrogen peroxide in the presence of iron.Is haemoglobin a biological fenton reagent[J].Biochem,1988，249(1)：185-190

[40]Wink D A,Mitchell J B.Chemical biology of nitric oxide:insights into regulatory,cytotoxic,and cytoprotective mechanisms of nitric oxide[J].Radical biology&medical,1998，25(4/5)：435-456

[41]Fobel M,Lynch D V,Thompson J E.Membrane deterioration in senescing carnation flowers[J].Plant physiology,1987,85(1):204-211

[42]Kanner J,Harel S,Granit R.Nitric oxide,an inhibitor of lipid oxidation by lipoxygenase,cyclooxygenase and hemoglobin[J].Lipids,1992,27(1):46-49