寧 睿，王德輝

(1．遼寧省葫蘆島市建昌縣農(nóng)經(jīng)局，遼寧葫蘆島125300;2．遼寧省葫蘆島市建昌縣林業(yè)局，遼寧葫蘆島125300)

1 前言

減少農(nóng)藥使用后對環(huán)境生物的影響，這是農(nóng)藥安全使用的重要環(huán)節(jié)。在眾多環(huán)境生物中，蜜蜂因其傳粉功能而備受關(guān)注，因?yàn)槠鋽?shù)量超過傳粉昆蟲總量的80%(卜元卿等，2009)。1990年以來的20多年間，北美、歐洲及亞洲等許多國家蜜蜂種群數(shù)量顯著減少的原因，就是因?yàn)槭褂棉r(nóng)藥所致(卜元卿等，2009)。近年的研究還表明，不僅傳統(tǒng)的化學(xué)農(nóng)藥可能對蜜蜂高毒，就是生物農(nóng)藥也可能對蜜蜂不安全。如阿維菌素對意大利蜜蜂(Apis mellifera L．)的觸殺毒力測定結(jié)果為高毒、而攝入毒力測定結(jié)果則為劇毒(王冬蘭等，2006)?？梢?，要實(shí)現(xiàn)農(nóng)藥的安全使用，就必須了解農(nóng)藥對蜜蜂的毒性。

毒死蜱(O，O-二乙基-O-(3，5，6-三氯-2-吡啶基)硫逐磷酸酯)，一種高效廣譜的有機(jī)磷殺蟲殺螨劑，為美國陶氏化學(xué)公司于1965年開發(fā)成功，至今已在美國、日本、加拿大、中國等l0多個(gè)國家和地區(qū)注冊，成為當(dāng)前全球應(yīng)用最廣泛的5種殺蟲劑之一，對多種農(nóng)業(yè)害蟲及衛(wèi)生害蟲高效的同時(shí)對白蟻也具有良好防效(李少南等，2006;劉乾開，1993;吳慧明和朱國念，2003;吳祥為等，2006)。隨著甲胺磷、對硫磷、甲基對硫磷、磷胺等高毒農(nóng)藥的逐步禁用，毒死蜱成為這些農(nóng)藥的最佳替代藥劑(徐德進(jìn)等，2007)。這些都將推動(dòng)毒死蜱用量的增加和使用范圍的擴(kuò)大(吳祥為等，2006)。近年來，我國登記的含有毒死蜱成分的復(fù)配制劑大幅增加，為此本文研究了幾種還有毒死蜱成分的殺蟲劑對意大利蜜蜂的攝入毒性，以期為這些復(fù)配制劑的安全使用提供資料。

2 材料與方法

2．1 供試蜂種

意大利蜂(Apis mellifera L．)，以成年工蜂作為實(shí)驗(yàn)材料，全部個(gè)體均取自同一王蜂群，選擇健康、大小一致的個(gè)體進(jìn)行試驗(yàn)。

2．2 供試農(nóng)藥50%毒死蜱微乳劑，山東省煙臺(tái)博瑞特生物科技有限公司;

10%阿維·毒死蜱乳油，廣西金穗農(nóng)藥有限公司;

30%甲維·毒死蜱乳油，江蘇長青農(nóng)化股份有限公司;

20%毒死蜱·氟鈴脲乳油，江西眾和化工有限公司;

12%高氯·毒死蜱乳油，江蘇豐山集團(tuán)有限公司;

30%毒死蜱·三唑磷乳油，江蘇福田農(nóng)化有限公司;

22%吡蟲·毒死蜱乳油，浙江新農(nóng)化工股份有限公司。

2．3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)依據(jù)中華人民共和國國家環(huán)境保護(hù)總局《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》(蔡道基，1989)進(jìn)行。用33%蜜水將供試藥劑稀釋至6個(gè)系列濃度，并設(shè)空白對照。每個(gè)蜂籠內(nèi)移入20頭健康一致的成年工蜂，饑餓2 h后，用0．5 g脫脂棉浸漬藥液至飽和狀態(tài)，然后展開放置于蜂籠紗網(wǎng)上，隔網(wǎng)飼喂供試蜜蜂。另扣一燒杯于脫脂棉上，以保濕。每處理重復(fù)3次。經(jīng)藥劑處理的試蟲置于25±2℃和50%-70%相對濕度的弱光條件下飼養(yǎng)，分別于實(shí)驗(yàn)后24 h和48 h，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，記錄死亡數(shù)，計(jì)算死亡率與校正死亡率。用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS 12．0計(jì)算毒力回歸方程和藥劑對蜜蜂致死中濃(LC50)及其95%置信限。

毒性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn):LC50＜0．5 mg·L-1為劇毒，0．5-20 mg·L-1為高毒，20-200 mg·L-1為中毒，＞200 mg·L-1為低毒(蔡道基，1989)。

3 結(jié)果與分析

各制劑對意大利蜂工蜂毒力見表1，所有毒力回歸方程均達(dá)顯著水平(P＜0．05)。根據(jù)48 h毒力測定結(jié)果，7種毒死蜱及其復(fù)配制劑對意大利成年工蜂均具有較高經(jīng)口毒性，其48 h LC50值均低于2 mg·L-1，根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》規(guī)定的農(nóng)藥對蜜蜂急性毒性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，這7種含毒死蜱制劑對供試蜜蜂的急性經(jīng)口毒性均為高毒。相對于50%毒死蜱微乳劑單劑，復(fù)配藥劑10%阿維·毒死蜱乳油和12%高氯·毒死蜱乳油對供試蜜蜂的致死作用略有提高，而其它4種復(fù)配藥劑對蜜蜂的致死作用均有所降低，尤其是20%毒死蜱·氟鈴脲乳油和22%吡蟲·毒死蜱乳油，其48 h的LC50值分別是50%毒死蜱微乳劑的1．8和2．2倍。

此外，由表1和圖1可知，22%吡蟲·毒死蜱乳油對供試蜜蜂24 h和48 h的致死作用存在明顯的差異，其24 h LC50值約是48 h LC50值的12．6倍。而其它6種藥劑對供試蜜蜂24 h和48 h的LC50值相對接近。

表1 毒死蜱有效成分的殺蟲劑對意大利蜜蜂(Apis mellifera L．)的急性經(jīng)口毒性Table 1 The acute oral toxicities of the insecticides containing chlorpyrifos as one active ingredient to Apis mellifera L．

4 討論

趙華等(2004)曾經(jīng)研究了毒死蜱對蜜蜂、家蠶、斑馬魚、鵪鶉、赤眼蜂、蛙類、蚯蚓、土壤微生物等環(huán)境生物的毒性，結(jié)果表明毒死蜱除了對蚯蚓和土壤微生物相對較為安全外，對其他測試生物均為高毒。其中對蜜蜂的觸殺毒力的 LD50為 μg·頭-1，而攝入毒性的 LC50為0．6406 mg·L-1。

殺蟲劑合理的混用，可以提高對害蟲的防治效果，但其對非靶標(biāo)生物毒性的變化也不容忽視(楊艷霞等，2008;鄭明奇等，2005)。本文所研究的50%毒死蜱微乳劑單劑和6種含毒死蜱的復(fù)配制劑對供試蜜蜂的LC50值存在差異，但是根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》規(guī)定的毒性評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，這7種藥劑對蜜蜂的急性經(jīng)口毒性均為高毒?？梢姡舅莉缗c其他藥劑復(fù)配后，未能提高其對蜜蜂的安全性。不僅如此，毒死蜱與阿維菌素獲高效氯氰菊酯復(fù)配后，其對蜜蜂的毒性還略有升高(表1)。

比較這7種藥劑24 h和48 h的LC50值發(fā)現(xiàn)，當(dāng)毒死蜱與某些殺蟲劑混用時(shí)，短時(shí)間內(nèi)可能不會(huì)表現(xiàn)出對蜜蜂嚴(yán)重的致死作用，但隨著時(shí)間的推移，毒性會(huì)逐漸顯現(xiàn)。因此，使用含毒死蜱的復(fù)配殺蟲劑防治害蟲時(shí)，建議適當(dāng)延長觀察時(shí)間，從而更準(zhǔn)確評價(jià)藥劑對蜜蜂的不利影響。

根據(jù)本研究結(jié)果，毒死蜱以及含有毒死蜱的復(fù)配制劑對蜜蜂具有較高的急性毒性，所以在養(yǎng)蜂區(qū)附近和植物開花期應(yīng)盡量避免選擇含毒死蜱的殺蟲劑防治害蟲，減輕對蜜蜂的傷害。

圖1 含毒死蜱有效成分的殺蟲劑對意大利蜜蜂(A．mellifera)24 h和48 h經(jīng)口毒性比較Figure 1 Comparison of the acute oral toxicities of the insecticides containing chlorpyrifos as one active ingredient to A．mellifera in 24 h and 48 h

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