馬宏偉 劉旭華

1.河南省紅十字血液中心血型研究室，河南鄭州 450012；2.鄭州人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南鄭州 450003

新生兒溶血病意外抗體檢測(cè)分析

馬宏偉1劉旭華2

1.河南省紅十字血液中心血型研究室，河南鄭州 450012；2.鄭州人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南鄭州 450003

目的 調(diào)查研究導(dǎo)致新生兒溶血病的意外抗體分布情況，為診斷和治療提供支持。 方法 按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》對(duì)573例病理性黃疸患兒標(biāo)本進(jìn)行溶血三項(xiàng)試驗(yàn)和血清膽紅素測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行意外抗體篩選，陽(yáng)性標(biāo)本采用經(jīng)典抗球蛋白法鑒定抗體特異性。 結(jié)果 共檢出意外抗體陽(yáng)性標(biāo)本38例 （6.63%），其中Rh系統(tǒng)35例（92.1%）、MNS系統(tǒng)2例（5.3%）、Duffy系統(tǒng)1例（2.6%）。 結(jié)論 意外抗體的篩查和鑒定有助于新生兒溶血病的及時(shí)診斷和治療，對(duì)提高生育質(zhì)量具有重要意義。

新生兒溶血?。谎?；意外抗體；檢測(cè)分析

新生兒溶血?。╤emolytic disease of newborn，HDN）是母嬰血型不合引起的免疫溶血性疾病，來自母體的IgG抗體通過胎盤屏障進(jìn)入患兒血循環(huán)與其紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原結(jié)合，導(dǎo)致紅細(xì)胞在單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)內(nèi)破壞，膽紅素生成增多，可引起患兒貧血，水腫，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致核黃疸甚至死亡[1]。為研究ABO系統(tǒng)以外導(dǎo)致HDN的意外抗體分布情況，及時(shí)為診斷和治療提供支持，減少新生兒的損傷，筆者對(duì)573例病理性黃疸患兒進(jìn)行了意外抗體的調(diào)查研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

2009年1月～2011年12月本室檢測(cè)的疑似HDN的黃疸患兒共573例，年齡4 h～11 d。

1.2 試劑和儀器

抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清、ABO標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞、紅細(xì)胞血型抗體篩選細(xì)胞、抗人球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）；抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-M、抗-Fya、試劑譜細(xì)胞（美國(guó)Immucor公司）；微柱凝膠檢測(cè)系統(tǒng)（長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司）；KA-2200型離心機(jī)（日本Kubota公司）。

1.3 方法

1.3.1 采用《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的方法[2]，對(duì)患兒標(biāo)本進(jìn)行溶血三項(xiàng)試驗(yàn)，包括紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)、血清中游離抗體測(cè)定以及紅細(xì)胞抗體放散試驗(yàn)，同時(shí)進(jìn)行血清膽紅素定量檢測(cè)。

1.3.2 使用微柱凝膠反應(yīng)卡和紅細(xì)胞血型抗體篩選細(xì)胞進(jìn)行意外抗體篩選，檢測(cè)ABO系統(tǒng)以外的血型抗體，將篩選細(xì)胞加入標(biāo)記好的微柱中各1滴，然后加入被檢者血清1滴，置37℃孵育15 min后用專用離心機(jī)離心5 min觀察結(jié)果，紅細(xì)胞凝集位于凝膠表面或凝膠中為陽(yáng)性結(jié)果，紅細(xì)胞完全沉降到管底為陰性結(jié)果，檢測(cè)的同時(shí)設(shè)立陽(yáng)性和陰性對(duì)照。

1.3.3 抗體特異性鑒定。直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性和（或）意外抗體篩選陽(yáng)性的患兒標(biāo)本，應(yīng)用經(jīng)典抗球蛋白法對(duì)患兒及其母親的血清進(jìn)行抗體鑒定，根據(jù)試劑譜細(xì)胞反應(yīng)格局確定抗體的特異性，同時(shí)使用抗體試劑檢測(cè)母體對(duì)應(yīng)的紅細(xì)胞抗原，確認(rèn)檢出抗體的準(zhǔn)確性。

2 結(jié)果

在573例疑似HDN的黃疸患兒中共檢出意外抗體陽(yáng)性標(biāo)本38例，百分比為6.63%。經(jīng)特異性鑒定，抗體包括3個(gè)血型系統(tǒng)，Rh系統(tǒng) 35例 （92.1%）、MNS系統(tǒng)2例 （5.3%）、Duffy系統(tǒng)1例（2.6%），血清膽紅素含量超過342 μmol/L的患兒共10例（26.3%）。

抗體特異性鑒定及臨床資料見表1。

3 討論

新生兒溶血病是新生兒高膽紅素血癥的主要原因之一，對(duì)患兒的危害較為嚴(yán)重，如不能正確診斷，往往延誤治療的最佳時(shí)機(jī)，在國(guó)際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）命名的30個(gè)血型系統(tǒng)中，能夠引起 HDN 的有 ABO、Rh、MNS、Kell、Duffy 等血型系統(tǒng)。在我國(guó)以ABO血型不合導(dǎo)致的HDN最為常見，但溶血程度通常不嚴(yán)重，大多數(shù)受累患兒病情較輕，及時(shí)采取藍(lán)光照射、免疫球蛋白滴注即可治愈，極少發(fā)展為威脅生命的溶血，通常不需要換血治療。筆者對(duì)病理性黃疸患兒ABO系統(tǒng)以外的血型抗體進(jìn)行了檢測(cè)分析，了解其他血型系統(tǒng)導(dǎo)致HDN的比例和嚴(yán)重程度。研究結(jié)果表明，有臨床意義的意外抗體38例，比例為6.63%，與文獻(xiàn)[3]報(bào)道的相似。血型抗體包括3個(gè)系統(tǒng)，以Rh系統(tǒng)最多，高達(dá)92.1%，MNS系統(tǒng)和Duffy系統(tǒng)較少。Rh系統(tǒng)抗體中又以抗-D最多，抗-E+c次之，頻率依次為抗-D＞抗-E+c＞抗-E＞抗-D+C＞抗-Hro。

表1 抗體特異性鑒定結(jié)果及臨床資料

高效價(jià)抗-D能夠引起嚴(yán)重的HDN，如不及時(shí)治療，可發(fā)展成膽紅素腦病，造成嬰兒早期死亡，或使存活者留下不可逆的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥。目前歐美發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)廣泛使用Rh免疫球蛋白（RhIG）來進(jìn)行免疫預(yù)防，RhIG是人源IgG抗-D的濃縮物，在初次免疫的誘導(dǎo)階段可以用于干擾抗原的識(shí)別，從而達(dá)到預(yù)防作用。一個(gè)劑量（1 500 IU）的抗-D可以中和15 mL的D陽(yáng)性紅細(xì)胞的免疫作用，Rh陰性孕婦分別在妊娠的28周和產(chǎn)后72 h內(nèi)使用RhIG，能將產(chǎn)生抗D的風(fēng)險(xiǎn)降至0.1%，從而極大地減少抗D導(dǎo)致HDN的發(fā)生[1，4]。目前國(guó)內(nèi)還沒有常規(guī)使用RhIG進(jìn)行HDN的預(yù)防，我國(guó)應(yīng)積極研發(fā)國(guó)產(chǎn)RhIG制劑用于Rh陰性女性的免疫預(yù)防。

意外抗體主要是由輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生，本研究檢測(cè)出意外抗體的38例患兒母親均有妊娠史和（或）輸血史。因此要加強(qiáng)對(duì)育齡女性的宣傳，盡量減少流產(chǎn)、刮宮等引起經(jīng)胎盤出血而導(dǎo)致的同種免疫，積極開展圍生期保健，孕期除了ABO血型系統(tǒng)的檢測(cè)外，也要進(jìn)行意外抗體的篩查，陽(yáng)性者應(yīng)進(jìn)一步明確抗體的特異性和效價(jià)并定期監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)孕婦意外抗體效價(jià)持續(xù)升高，提示患HDN的可能性增大，孕婦可考慮進(jìn)行血漿置換術(shù)和靜脈注射免疫球蛋白，胎兒可采取宮內(nèi)輸血、計(jì)劃分娩等治療措施[5-6]。分娩后應(yīng)及時(shí)監(jiān)控患兒膽紅素水平和膽紅素累積的速率，結(jié)合臨床表現(xiàn)采取藍(lán)光照射、靜脈滴注免疫球蛋白等手段進(jìn)行治療，嚴(yán)重者應(yīng)采取換血療法。本文檢測(cè)的38例意外抗體陽(yáng)性患兒中，達(dá)到換血標(biāo)準(zhǔn)的有10例，比例達(dá)到26.3%，根據(jù)抗體特異性及時(shí)選擇對(duì)應(yīng)抗原陰性的相容性血液進(jìn)行換血，起到了滿意的治療效果。本文的研究表明，將意外抗體篩查納入到圍生期保健的常規(guī)檢查內(nèi)容，有利于HDN的及時(shí)診斷和治療，對(duì)減少患兒損傷，提高生育質(zhì)量具有重要意義。

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Investigation of unexpected antibodies among hemolytic disease of newborn

MA Hongwei1LIU Xuhua2
1.He'nan Red Cross Blood Center,Zhengzhou 450012,China;2.Zhengzhou People's Hospital of He'nan Province,Zhengzhou 450003,China

Objective To investigate unexpected antibodies distribution in hemolytic disease of newborn.Methods Five hundred and seventy-three blood samples of newborn were detected.Hemolysis and bilirubin were tested according to National Guide to Clinical Laboratory Procedures.The unexpected antibodies were identified by classic indirect antiglobulin test.Results Thirty-eight(6.63%)samples were positive by antibody screen test.The unexpected antibodies included 35 cases(92.1%)Rh system antibodies,2 cases(5.3%)MNS system antibodies and 1 case (2.6%)Duffy system antibody.Conclusion Unexpected antibodies detection is helpful for clinical diagnosis and treatment of hemolytic disease of newborn.

Hemolytic disease of newborn;Blood group;Unexpected antibodies;Investigation

R446.62

A

1674-4721（2012）11（c）-0078-02

2012-08-29 本文編輯：郭靜娟）