徐亞娟，金志威，張艷秋，趙 春，李 丹，劉文書(shū)

（1.吉林省腫瘤醫(yī)院 口腔頜面甲狀腺外科，吉林 長(zhǎng)春130012；2.吉林大學(xué)第一臨床醫(yī)院口腔科）

Survivin是凋亡抑制蛋白最強(qiáng)的凋亡抑制因子。在多種惡性腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)，作為腫瘤標(biāo)志物對(duì)腫瘤的診斷、治療和預(yù)后判斷起一定的作用。舌癌惡性程度高，細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡、調(diào)控失常是腫瘤發(fā)生普遍存在的因素，本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Survivin基因在舌癌組織、癌旁組織及正常舌黏膜細(xì)胞中蛋白（SVV蛋白）水平的表達(dá)，探討其在舌癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中可能的機(jī)制作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集我院2001年6月－2011年6月舌鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本48例。其中男性30例，女18例：年齡為29－71歲，平均50歲。臨床分期分別為Ⅰ期7例，Ⅱ期18例，Ⅲ期14例，Ⅳ期9例。病理類(lèi)型：高分化鱗癌22例，中分化鱗癌17例，低分化鱗癌9例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況：頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者38例，無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移10例。另于術(shù)中取24例舌正常黏膜為對(duì)照組。

1.2 試驗(yàn)方法 所用試劑購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。石蠟切片脫蠟和水化后用PBS沖洗。加第一抗體，4℃冰箱過(guò)夜，，加生物素標(biāo)記的二抗，室溫下孵育30min，加鏈親和素－過(guò)氧化物酶，室溫下孵育30min。再用PBS沖洗3次加滴新鮮配制的DAB溶液，顯微鏡下觀察，沖洗，蘇木素復(fù)染。梯度酒精脫水干燥，二甲苯透明，中性樹(shù)膠封固。細(xì)胞爬片固定，余同組織片。

1.3 結(jié)果判斷 Survivin表現(xiàn)為棕黃色顆粒狀或彌漫片狀分布判斷為陽(yáng)性，標(biāo)本中無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞或反應(yīng)細(xì)胞＜10%為陰性，大于10%為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSSl3.0醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，兩組間比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 舌鱗癌組織及其癌旁組織、正常舌黏膜中SVV蛋白的表達(dá)

Survivin蛋白表達(dá)在舌鱗癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性率為56.3%，在癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)為25.0%，在正常舌黏膜中無(wú)陽(yáng)性表達(dá)（0／24）。SVV蛋白在舌鱗癌組織和在癌旁組織中的表達(dá)差異有顯著性（P＜0.05），在癌旁組織和在正常舌黏膜中的表達(dá)差異亦有顯著性（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 Survivin蛋白陽(yáng)性表達(dá)與舌鱗癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 見(jiàn)表2。

表1 舌鱗癌組織、癌旁組織和正常舌黏膜的SVV蛋白表達(dá)

表2 Survivin表達(dá)與舌鱗癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

舌癌是惡性程度高的口腔癌，生長(zhǎng)速度快且浸潤(rùn)性強(qiáng)，易至運(yùn)動(dòng)受限。由于舌體運(yùn)動(dòng)頻繁、血運(yùn)豐富，舌癌易出現(xiàn)早期的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，且轉(zhuǎn)移率較高。Survivin具有抗凋亡能力強(qiáng)及腫瘤表達(dá)特異性的特點(diǎn)，本實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)舌癌組織、癌旁組織及正常黏膜中的Survivin表達(dá)，結(jié)果顯示Survivin在舌癌細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)，在舌癌組織中陽(yáng)性率為56.3% ，在癌旁組織中陽(yáng)性率為25.0%，在正常舌黏膜組織中無(wú)陽(yáng)性表達(dá)。

隨著癌變的發(fā)展，Survivin高表達(dá)加重了遺傳物質(zhì)本身的不穩(wěn)定，其表達(dá)不僅和凋亡抑制有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明Survivin表達(dá)與舌癌分化程度、轉(zhuǎn)移特點(diǎn)相關(guān)。Survivin其不同強(qiáng)度表達(dá)可能會(huì)影響組織的分化、促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)速度、轉(zhuǎn)移等。

有研究認(rèn)為Survivin促進(jìn)細(xì)胞增殖主要與其能抑制細(xì)胞凋亡，逃避細(xì)胞凋亡點(diǎn)的檢查，加快細(xì)胞周期的轉(zhuǎn)換有關(guān)［2］。當(dāng)前，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，腫瘤的靶點(diǎn)治療將成為一種新的治療方法應(yīng)用到臨床，從而提高病人生存率［3］。Survivin是迄今發(fā)現(xiàn)的IAPs中惟一含單個(gè)BIR單元的成分，這一序列是其凋亡抑制作用的基本要素［4］。Survivin基因的表達(dá)可抑制異常突為的細(xì)胞的凋亡，從而擾亂了細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡途徑，促使細(xì)胞逃離生長(zhǎng)監(jiān)控，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。且具有高度的組織分布特異性和強(qiáng)大的抗凋亡功能，其表達(dá)與口腔鱗癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，可作為早期舌鱗癌的輔助診斷。在功能上，Survivin在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，促進(jìn)細(xì)胞增殖方面同樣發(fā)揮著重要作用。本組結(jié)果證實(shí)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組Survivin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移組；根據(jù)臨床病理分期，T1－T2期組與T3－T4期組之間Survivin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；隨臨床分期增加及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，Survivin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高。

Survivin的異常表達(dá)與舌鱗癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，其高表達(dá)在舌鱗癌中與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨床病理分期密切相關(guān)，可能是影響舌鱗癌預(yù)后的重要分子指標(biāo)。

［1］Ahieri DC.Validating Survivin as a cancer therapeutic target［J］.NatRev Cancer，2011，3（1）：46.

［2］Mahotka C，Krieg T，Krieg A，et al.Distinct in vivo expressionpatterns of Survivin splice variants in renal cell carcinomas［J］.Int Jcancer，2010，100（1）：30.

［3］Rohayem J，Diestelkoeer P，Weigle B，et al.Antibody response tothe tumor－associated inhibitor of apoptosis protein Survivin incancer patients［J］.Cancer Res，2010（60）：1815.

［4］Fujie Y，Yamamoto H，Ngan CY，et al.Oxaliplatin，apotentinhibitor of surviving，enhances paclit axel induced apoptosis andmitotic catastrophe in colon cancer cells［J］.Jpn J Clin Oncol，2009，35（8）：453.