宋予震，王 軍，程會(huì)昌，霍 軍

（鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校，河南 鄭州450011）

訶子（Fructus chebulae）原名訶黎勒，為使君子科落葉喬木訶子樹的干燥成熟果實(shí)，可煨用或去核取肉用。訶子原產(chǎn)于印度、緬甸、馬來西亞等國(guó)，我國(guó)廣東、廣西、云南等省也有栽培。訶子果實(shí)含鞣質(zhì)，其中主要成分為訶子酸、沒食子酰葡萄糖、沒食子酰的簡(jiǎn)單酯類化合物及蒽醌類物質(zhì)［1］。現(xiàn)代藥理試驗(yàn)證明，訶子具有良好的斂郁澀腸而止瀉、降火利咽、調(diào)和藥性、解毒、抑菌、殺滅或抑制惡性腫瘤細(xì)胞等作用，臨床應(yīng)用廣泛，尤其在民族醫(yī)學(xué)藏藥和蒙藥中最為常用。在藏藥學(xué)經(jīng)典著作《晶珠本草》中，訶子被稱“藏藥之王”。訶子在蒙藥中也是使用頻率最高的藥物［2］。訶子在我國(guó)資源豐富且具有多方面的藥理活性，在疾病預(yù)防、治療以及飼料添加劑等諸方面都不失為一種應(yīng)用前景廣闊的藥物，具有廣泛的開發(fā)價(jià)值，尤其是在治療水瀉等胃腸道疾病方面有很重要的作用［3］。目前，有關(guān)訶子對(duì)離體腸管運(yùn)動(dòng)的觀察研究，多利用哺乳動(dòng)物（小鼠、大鼠、家兔）進(jìn)行試驗(yàn)，對(duì)于訶子對(duì)禽類離體腸管運(yùn)動(dòng)功能的影響，尚未見文獻(xiàn)資料報(bào)道。本試驗(yàn)用訶子粗體物，對(duì)雞離體空腸運(yùn)動(dòng)進(jìn)行試驗(yàn)觀察，旨在探明此種藥物對(duì)禽類小腸運(yùn)動(dòng)張力的影響，為訶子的臨床應(yīng)用提供可靠的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 健康麻雞8只，體重1～1.5kg，雌雄不限，由鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校動(dòng)物醫(yī)學(xué)系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。WKY型微量移液器（上海榮泰生化工程有限公司），3802型生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)（北京微信斯達(dá)科技發(fā)展有限責(zé)任公司），DK－98－Ⅱ型電熱恒溫水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司），麥?zhǔn)显∶螅瑴囟扔?jì)，燒杯，手術(shù)器械等。禽類林格液（NaCl 6.8g、KCl 1.73g、CaCl20.64g、NaHCO32.45g、MgSO40.25g、蒸餾水加至1 000mL）。

1.2 訶子粗提物提取 訶子藥材粗粉，加8倍量70%丙酮水，回流提取2h，放涼，抽濾，濾液回收丙酮。剩下水液加適量石油醚萃取脫色，分液，得水液再加適量乙酸乙酯萃取，分液，乙酸乙酯液回收，得黏稠物低溫干燥，干品稱量備用。臨用時(shí)，取干品適量，加水配制成1mL相當(dāng)于原液藥材1g的藥液。

1.3 試驗(yàn)材料處理方法 將雞斷頸放血處死，立即剖腹，剪取2～3cm空腸（以卵黃囊憩室為起點(diǎn)，向幽門方向5cm處），放入盛有41℃生理溶液的燒杯中，洗去腸內(nèi)容物。取一段腸管，一端固定在通氣鉤上，另一端固定于張力換能器杠桿上，將張力換能器與Pclab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)相連。腸管浸沒在加40mL生理溶液的麥?zhǔn)显∶髢?nèi)，維持（41.0℃±0.5℃）恒溫，不斷往溶液中充氣。調(diào)整腸肌張力，用生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)記錄腸管收縮曲線，觀察正常離體腸管自動(dòng)節(jié)律性收縮運(yùn)動(dòng)，描記5min后，用微量移液器加入不同劑量的訶子粗提物藥液，使麥?zhǔn)显∶髢?nèi)溶液含藥量分別為5mg／mL、10mg／mL、20mg／mL，同時(shí)打下加樣標(biāo)記，以收縮張力（g）、舒張張力（g）、收縮振幅（g），（收縮張力－舒張張力）為指標(biāo)，記錄觀察每段腸管的運(yùn)動(dòng)變化。每種濃度藥液試驗(yàn)結(jié)果記錄完畢，用41℃生理溶液沖洗3次，待腸管運(yùn)動(dòng)恢復(fù)正常后再做下一項(xiàng)。

1.4 數(shù)據(jù)處理方法 本研究以描記曲線離開基線上升達(dá)峰頂后下降回到基線的過程作為一次收縮，峰頂和基線之間的幅度即為該收縮波的收縮幅度，完成一次收縮所用的時(shí)間為收縮時(shí)程，本試驗(yàn)僅統(tǒng)計(jì)收縮幅度大于等于0.1g的收縮波。統(tǒng)計(jì)加藥前2min內(nèi)、加藥后2min內(nèi)（這一段的起點(diǎn)以加藥后曲線基本回到基線時(shí)為準(zhǔn)，以排除剛加藥物對(duì)空腸的刺激造成的不規(guī)律收縮）。空腸的收縮波的頻率、幅度。采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理，試驗(yàn)數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示，組間數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度訶子粗提物對(duì)雞離體空腸張力的影響 由表1可知，與用藥前比較，訶子粗提物可使空腸平滑肌的自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)受到抑制。在溶液濃度為5mg／mL時(shí)，離體腸管舒張張力差異顯著（P＜0.05），收縮張力、收縮振幅差異極顯著（P＜0.01）。隨著劑量的加大，當(dāng)溶液濃度為10mg／mL、20mg／mL時(shí)，離體腸管收縮張力、舒張張力降低、收縮振幅均減小，差異極顯著（P＜0.01）。

表1 不同濃度訶子粗提物對(duì)雞離體空腸張力的影響 （±SD，n＝8）

表1 不同濃度訶子粗提物對(duì)雞離體空腸張力的影響 （±SD，n＝8）

注：與用藥前比較，＊：差異顯著（P＜0.05）；＊＊：差異極顯著（P＜0.01）。下表同

濃度（mg／mL）用藥前（g）用藥后（g）收縮張力 舒張張力 收縮振幅 收縮張力 舒張張力 收縮振幅5 5.41±0.86 3.03±0.79 2.38±0.07 3.58±0.11＊＊ 2.07±0.02＊ 1.51±0.09＊＊10 5.28±0.24 3.65±0.21 1.63±0.03 3.72±0.21＊＊ 2.58±0.17＊＊ 1.14±0.04＊＊20 3.24±0.27 2.46±0.19 0.78±0.08 2.04±0.66＊＊ 1.72±0.62＊＊ 0.32±0.04＊＊

2.2 不同濃度訶子粗提物對(duì)雞離體空腸收縮頻率的影響 由表2可知，與用藥前比較，訶子粗提物可明顯抑制空腸平滑肌的收縮頻率。在溶液濃度為5 mg／mL時(shí)，離體腸管收縮頻率差異顯著（P＜0.05）。隨著劑量的加大，當(dāng)溶液濃度為10mg／mL、20mg／mL時(shí)，離體腸管收縮頻率差異極顯著（P＜0.01）。

表2 不同濃度訶子粗提物對(duì)雞離體空腸收縮頻率（次／min）的影響 （±SD，n＝8）

表2 不同濃度訶子粗提物對(duì)雞離體空腸收縮頻率（次／min）的影響 （±SD，n＝8）

濃度（mg／mL） 加藥前 加藥后5 5.03±0.21 4.03±0.14＊10 7.28±0.24 4.61±0.11＊＊20 5.94±0.30 2.71±0.04＊＊

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，訶子粗提物溶液可使雞空腸平滑肌的自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)受到抑制。這與程會(huì)昌［4］及王軍［5］對(duì)家兔離體十二指腸、空腸和回腸段的研究結(jié)果相類似。但是本試驗(yàn)結(jié)果顯示，5～20mg／mL濃度的訶子粗提物均對(duì)雞離體空腸平滑肌的自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生顯著的抑制作用；而程會(huì)昌報(bào)道，訶子粗提物溶液終濃度為20mg／mL時(shí)，對(duì)家兔離體小腸各段的運(yùn)動(dòng)才表現(xiàn)出明顯的抑制作用。這表明不同動(dòng)物相同部位的平滑肌對(duì)訶子粗提物的反應(yīng)敏感性不同。

訶子含有多種化學(xué)成分，其主要成分為鞣質(zhì)，據(jù)研究報(bào)道，訶子含鞣質(zhì)23%～37%［6］，鞣質(zhì)能凝固和沉淀蛋白質(zhì)，降低黏膜表面的潤(rùn)滑性，并有抑菌作用，因此臨床上訶子可用于治療消化系統(tǒng)疾病，如栗福星等曾報(bào)道訶子對(duì)牛腹瀉的治療。

本試驗(yàn)證明，訶子粗提物可使雞空腸平滑肌的自發(fā)性收縮運(yùn)動(dòng)受到抑制。表明訶子粗提物可能通過抑制小腸運(yùn)動(dòng)的張力和收縮頻率，使腸管內(nèi)容物停留時(shí)間延長(zhǎng)，從而發(fā)揮其止瀉作用的。

訶子對(duì)腸管的作用機(jī)制與其劑量的使用方面還有待于進(jìn)一步研究，才能使訶子在開發(fā)應(yīng)用方面有效的利用。

［1］宋立人，洪恂，丁緒亮，等.現(xiàn)代中藥學(xué)大辭典（上冊(cè)）［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：1106－1107.

［2］王金華，孫芳云，杜冠華，等.訶子的藥理作用研究進(jìn)展［J］.中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2006，12（6）：22－24.

［3］栗福星，劉利勇.巧用訶子治療牛水瀉［J］.中國(guó)牛業(yè)科學(xué)，2007，33（2）：5.

［4］程會(huì)昌，霍軍，宋予震.訶子、石榴皮提取物對(duì)家兔離體腸管運(yùn)動(dòng)的對(duì)比試驗(yàn)研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（21）：9067－9068，9075.

［5］王軍，張秀鳳，宋予震，等.訶子粗提物影響家兔離體小腸運(yùn)動(dòng)的試驗(yàn)［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2010，46（1）：17－18.

［6］顏正華.中藥學(xué)［M］.2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：1078－1080.