楊龍峰 （北京市延慶縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 102100） 韓柳 魏和平 （北京誠(chéng)安動(dòng)物醫(yī)院） 張聞禮 楊雪松 （北京關(guān)忠動(dòng)物醫(yī)院有限公司）

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靈緹犬血治療犬細(xì)小病毒病的試驗(yàn)

楊龍峰 （北京市延慶縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 102100） 韓柳 魏和平 （北京誠(chéng)安動(dòng)物醫(yī)院） 張聞禮 楊雪松 （北京關(guān)忠動(dòng)物醫(yī)院有限公司）

用靈緹犬血治療23例嚴(yán)重細(xì)小病毒病犬，結(jié)果表明，輸血安全性好，治愈率高(91%)。

靈緹犬 細(xì)小病毒 治愈

犬病的輸血療法是效果確實(shí)的治療措施，輸血的適應(yīng)癥包括大出血、貧血或低蛋白血癥、嚴(yán)重感染和凝血異常等。幼犬在患細(xì)小病毒病時(shí)，腸道排除大量血液，導(dǎo)致機(jī)體貧血，低血蛋白，以及凝血因子缺乏等。為感染細(xì)小病毒的病犬輸注全血可以提供完美的營(yíng)養(yǎng)和血細(xì)胞成分，最重要的是可以提供抗體、補(bǔ)體等，增強(qiáng)抗細(xì)小病毒感染能力，輸入的粒細(xì)胞也具有很好的抗感染能力。但在實(shí)際工作因?yàn)槿湫筒僮鞣爆嵡覝?zhǔn)確性查，容易引起輸液反應(yīng)，限制了其使用。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)有關(guān)靈緹犬血型特殊性的報(bào)道，采用靈緹犬做血源治療犬細(xì)小病毒病，效果顯著。

1 材料方法

1.1 儀器設(shè)備 MEK5126血細(xì)胞分析儀，日本光電生產(chǎn)；BT815A半自動(dòng)血液生化分析儀，上海三科儀器有限公司生產(chǎn)，配套生化檢測(cè)試劑購(gòu)買于北京九強(qiáng)生物技術(shù)有限公司。

1.2 供血犬準(zhǔn)備 自養(yǎng)5只純種同胞胎靈緹犬，1.5歲左右，體重25~30kg，使用進(jìn)口五聯(lián)疫苗常規(guī)免疫，以血凝抑制試驗(yàn)測(cè)細(xì)小病毒抗體效價(jià)達(dá)lg29以上，每年4次驅(qū)蟲(chóng)，并定期采集靜脈血進(jìn)行血細(xì)胞學(xué)和血清生物化學(xué)檢測(cè)，各指標(biāo)均在正常范圍之內(nèi)。鮮血涂片，吉姆薩氏法染色，顯微鏡觀察，無(wú)巴爾通氏小體、附紅細(xì)胞體感染。

1.3 危重病例的判斷 寵物門診接診的年齡在2~４月齡左右，病程2d以上，常規(guī)治療無(wú)效，白細(xì)胞總數(shù)下降到3.0×109/L以下，紅細(xì)胞下降至3.0×1012/L以下，便血嚴(yán)重，紅褐色或鮮紅色，患犬虛弱，脫水嚴(yán)重，精神萎頓。

1.4 采血方法 供血靈緹犬站立保定，頸靜脈上1/3處嚴(yán)格剃毛消毒，使用人用采血袋采血，采血量按照不高于供血犬的體重的0.5%計(jì)算。

1.5 輸血方法 采集的靈緹犬血和生理鹽水以1:1的比例稀釋后加入適量的地塞米松，經(jīng)患犬的前肢隱靜脈輸注，速度20滴/min，輸血量為5~10ml/kg體重。一般只輸血1次，嚴(yán)重的可連輸3次，但應(yīng)在4d內(nèi)輸注，并且使用同一條供血犬的血液。輸血時(shí)嚴(yán)密觀察患犬的反應(yīng)。

1.6 對(duì)癥療法 患犬除輸血治療外。還要根據(jù)情況進(jìn)行對(duì)癥治療和營(yíng)養(yǎng)支持療法。包括補(bǔ)充體液、葡萄糖，電解質(zhì)，碳酸氫鈉和氯化鉀等，對(duì)癥使用止血，止吐、止瀉藥物。便血嚴(yán)重的直腸灌注白頭翁散和云南白藥。

1.7 病例追蹤 試驗(yàn)過(guò)程中共治療病犬23條，其中3條由本動(dòng)物醫(yī)院飼養(yǎng)。對(duì)飼養(yǎng)的3只病愈犬在病愈后進(jìn)行體外血型檢測(cè)及實(shí)驗(yàn)性重復(fù)輸血。觀察有無(wú)溶血或發(fā)燒，嘔吐等輸血反應(yīng)。其它治愈犬4個(gè)月內(nèi)進(jìn)行電話隨訪，來(lái)院注射疫苗時(shí)進(jìn)行健康檢查。

2 結(jié)果

2.1 供血犬血細(xì)胞及血清生化檢查結(jié)果 在進(jìn)行試驗(yàn)的3個(gè)月時(shí)間里對(duì)5條靈緹犬共進(jìn)行了5次血液學(xué)檢查，均在正常范圍之內(nèi)，與其它犬的血液學(xué)指標(biāo)相比較，紅細(xì)胞明顯偏高，而白細(xì)胞和血小板明顯偏低。具體結(jié)果見(jiàn)附表(只列舉采血前的一次檢測(cè)結(jié)果)。

附表 供血犬采血前血液學(xué)檢查結(jié)果

項(xiàng) 目1號(hào)犬2號(hào)犬3號(hào)犬4號(hào)犬5號(hào)犬 白細(xì)胞(×109/L)5.44.84.84.65.0 紅細(xì)胞(×1012/L)8.58.48.58.67.9 血小板(×1011/L)2.22.53.02.83.1 血糖(空腹)(mmol/L)5.04.65.14.64.7 白蛋白(g/L)4042454350 總蛋白(g/L)8075767268 谷—草轉(zhuǎn)氨酶(u/L)64.356.358.546.952.3 谷—丙轉(zhuǎn)氨酶(u/L)23.433.836.845.055.0 堿性磷酸酶(u/L)23.119.315.622.321.0 總膽紅素(mmol/L)10.616.012.315.312.8 直接膽紅素(mmol/L)1.54.02.53.62.0 尿素氮(mg/L)12109.512.311.0 膽固醇(mmol/L)3.95.34.66.34.9

2.2 治療效果 用輸血療法共治療病犬23例，包括11條藏獒幼犬(其中一條是自己養(yǎng)的)，5條哈士奇(阿拉斯加雪橇犬)，2條薩摩犬，5條其它品種的犬(有2條是自己養(yǎng)的)。除1條藏獒和1條哈士奇死亡外，其余全部治愈。輸血次數(shù)平均1.3次。

2.3 異常分析 23只病犬在輸血后均無(wú)異常反應(yīng)，只有一條藏獒在輸血后第2天有茶色尿但很快恢復(fù)，精神狀態(tài)處于持續(xù)好轉(zhuǎn)狀態(tài)，體溫穩(wěn)定，懷疑是輸血量太大引起。

2.4 病例追蹤及重復(fù)輸血試驗(yàn)結(jié)果 23條病犬治愈21條，在4個(gè)月內(nèi)進(jìn)行電話追蹤，治愈犬到本單位做防疫時(shí)進(jìn)行臨床檢查，21只犬生長(zhǎng)發(fā)育正常，均沒(méi)發(fā)生與輸血有關(guān)的異常反應(yīng)。

3只經(jīng)輸血治療后痊愈的病犬(自己飼養(yǎng)的3條雜種犬)在體質(zhì)恢復(fù)后(病愈后2個(gè)月左右)采血，與供血靈緹犬用3滴血法做體外血型配合試驗(yàn)，結(jié)果主側(cè)反應(yīng)和副側(cè)反應(yīng)全部為陰性，初步表明靈緹犬血在受血犬體內(nèi)沒(méi)有產(chǎn)生與溶血有關(guān)的DEA[1.1]、DEA[1.2]和DEA[7]的抗體。然后按照輸血治療犬細(xì)小病毒的方法實(shí)驗(yàn)性地給每只犬輸供血犬血20ml，觀察1周，受血犬無(wú)任何不良反應(yīng)，兩個(gè)試驗(yàn)初步證明供血犬血型是非DEA[1.1]、DEA[1.2]和DEA[7]血型，供血犬紅細(xì)胞含有的表面抗原與溶血反應(yīng)無(wú)關(guān)。飼養(yǎng)的5只靈緹犬屬于“萬(wàn)能血型”，可安全作為供血犬為其它犬提供血液滿足治療的需要。

3 討論

（1）輸血療法在不確定血型的情況下可能取得良好療效的同時(shí)也可能引起嚴(yán)重的輸血反應(yīng)，從而限制了其臨床應(yīng)用。我國(guó)在目前情況下大部分地區(qū)很難做到使用血型檢測(cè)試劑盒，要想在犬病診療中有效使用輸血療法，必須另尋安全可靠的方法。根據(jù)國(guó)內(nèi)外報(bào)道的資料，據(jù)研究70%的靈緹犬的血型是DEA[1-]，也就是說(shuō)靈緹犬大部分都是萬(wàn)能血型，因此本試驗(yàn)選擇同胎犬作為供血犬，從而使輸血的成功率保持了100%的安全。本試驗(yàn)提供了一個(gè)簡(jiǎn)單的提高輸血安全性的方法，可供寵物診療機(jī)構(gòu)參考。（2）據(jù)報(bào)道在給犬進(jìn)行輸血時(shí)，第一次輸血一般都是安全的，但只能輸一次，因?yàn)榛既斎氘愒囱?d即能產(chǎn)生抗體，若再次輸進(jìn)相同血型的血液，將會(huì)發(fā)生不可挽救的溶血反應(yīng)。為了檢測(cè)輸注靈緹犬血是否會(huì)引起受血犬產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，在受血犬輸血2月后進(jìn)行了體外血型配合試驗(yàn)和試驗(yàn)性重復(fù)輸血。結(jié)果初步表明，本試驗(yàn)使用的靈緹犬血不會(huì)在受血犬體內(nèi)產(chǎn)生抗體，受血犬可以重復(fù)輸注同一來(lái)源的血液，這僅是初步的一個(gè)觀察結(jié)果。由于使用的樣本太少，以及供血犬來(lái)源于同一胎次的靈緹犬，不能證明所有的靈緹犬血可以100%的安全地作為供血犬使用。（3）使用靈緹犬血治療23例嚴(yán)重細(xì)小病毒感染病犬，結(jié)果表明，本方法在提高輸血安全性的基礎(chǔ)上，可大大提高犬細(xì)小病毒病的治愈率。本試驗(yàn)中采取的供血犬選擇方法在目前國(guó)內(nèi)還沒(méi)有經(jīng)濟(jì)有效的血型檢測(cè)方法的情況下值得推廣。（4）隨著寵物診療技術(shù)的發(fā)展，輸血療法在動(dòng)物醫(yī)院將更加廣泛的開(kāi)展，有條件時(shí)可飼養(yǎng)供血犬，作為供血犬，應(yīng)選擇經(jīng)健康檢查無(wú)傳染病和寄生蟲(chóng)病、體質(zhì)好、溫順、體型大、完成免疫注射、體重在20kg以上的成年犬、年齡1~8歲靈緹犬。因?yàn)?0%的靈緹犬血液中不含有DEA [1.1]、DEA[1.2]和DEA[7]，而且靈緹犬的紅細(xì)胞壓積高，血小板、白細(xì)胞數(shù)比其它品種的犬偏低，靜脈采血容易。（5）雖然70%的靈緹犬有可能是“萬(wàn)能”血型，但為進(jìn)一步保證輸血的安全性，可以參照本試驗(yàn)的方法先用供血犬的血在配型的基礎(chǔ)上試驗(yàn)性輸注幾條其它品種的犬，觀察輸血后的反應(yīng)。過(guò)2個(gè)月后再采血先用3滴血法進(jìn)行體外配型試驗(yàn)，若全為陰性，再進(jìn)行重復(fù)輸血觀察受血犬有無(wú)輸血反應(yīng)。若受血犬仍無(wú)任何不良反應(yīng)，則初步可以證明該供血犬血型為非DEA[1.1]、DEA[1.2]和DEA[7]血型，可作為安全穩(wěn)定的血源。

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（2012–09–22）

S858.292

A

1007-1733(2012)12-0003-02