袁 霞，邱少紅，余 蓉

(石首市人民醫(yī)院檢驗科， 湖北 石首 434400)

新型隱球菌血液感染1例

袁 霞，邱少紅，余 蓉

(石首市人民醫(yī)院檢驗科， 湖北 石首 434400)

目的：探討新型隱球菌感染的檢驗學診斷。方法：革蘭氏染色鏡檢，觀察形態(tài)、染色特點并行墨汁負染色，生化反應進一步證實。結果：35℃ 24h形成典型濕潤的、黏液樣、不透明的白色至奶油色菌落,1周后轉淡黃或棕黃，濕潤黏稠，狀似膠汁。取菌落涂片革蘭染色，為圓形和卵圓形，菌體直徑一般在2～15um，大者直徑可達20um，革蘭染色陽性。墨汁負染色：取菌落涂片與1滴墨汁混合，加蓋玻片后鏡檢，可見圓周形或者卵圓形芽生孢子，但無真、假菌絲。菌體外有寬厚莢膜，莢膜比菌體大1～3倍，可見圓形菌體，外繞有一寬闊的空白帶(莢膜)。生化反應商品API20C AUX板條 (梅里埃) 鑒定，推薦性鑒定結果：新生隱球酵母菌鑒定百分率99.9%，典型指數(shù)0.84。結論：新型隱球菌侵犯人體以中樞神經(jīng)系統(tǒng)最易受累，并常在腦室及大腦導水管周圍的灰質處呈占位性病變。確診要靠病原學證據(jù)，腦脊液墨汁染色或培養(yǎng)找到隱球菌，多次檢查后可提高陽性率。

新型隱球菌； 墨汁負染色

新型隱球菌(Crytococcus Neofonmans )又名溶組織酵母菌(Torula Histolytica )，廣泛分布于自然界，是土壤、鴿類、牛乳、水果等的腐生菌，尤以鴿糞中含量較多，也存在于正常人體體表、口腔、腸道，可侵犯人和動物，近年來由于誘使免疫功能低下的因素增多,其發(fā)病率有所上升。該病是真菌性疾病中較嚴重的一種,其死亡率占18%～30%。因此,新型隱球菌的研究越來越受到人們的重視。我院于2011年收治1例患者，經(jīng)過血培養(yǎng)、形態(tài)分析、生化分析診斷為新型隱球菌感染?，F(xiàn)報道如下。

1 病 例

1.1一般資料

患者男，45歲。2011年11月19日因咳嗽伴發(fā)熱半月來我院就診，臨床表現(xiàn)咳嗽，有時咳少許白粘痰，偶痰中帶血，2個月前確診患AIDS ，服用抗病毒藥物1個月。體溫38.6℃，脈搏106次/min，呼吸20次/min，血壓120/65mmHg。神清，青色面，皮膚可見散在小紅丘疹，皰疹，部分膿苔。雙肺呼吸音稍粗，均未聞及啰音，心律齊，無雜音，腹部平軟，無壓痛。胸部CT：右肺感染性病變，并空洞形成，縱膈及腋窩淋巴結腫大。

1.2實驗室檢查

①血常規(guī)：WBC 1.33×109/L ，RBC 2.73×1012/L，HGB 87g/L。②TBAb陽性，痰涂片抗酸染色鏡檢，未找到抗酸桿菌。肺炎支原體抗體陰性，肺炎衣原體抗體陰性，血沉53mm/h，甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒抗體陰性，肥大反應試驗陰性。

1.3微生物學檢驗

血培養(yǎng)48h有細菌生長，直接涂片革蘭染色陽性。接種哥倫比亞血瓊脂、巧克力瓊脂、沙保羅培養(yǎng)基，放置35℃含5%的二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，SDA培養(yǎng)基放35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。35℃ 24h形成典型濕潤的、黏液樣、不透明的白色至奶油色菌落,1周后轉淡黃或棕黃，濕潤黏稠，狀似膠汁。

圖1 革蘭染色 (×100) 圖2 墨汁負染色(×40)

取菌落涂片革蘭染色，為圓形和卵圓形，菌體直徑一般在2～15μm，大者直徑可達20μm，革蘭染色陽性,見圖1。墨汁負染色：取菌落涂片與1滴墨汁混合，加蓋玻片后鏡檢，可見圓周形或者卵圓形芽生孢子，但無真、假菌絲。菌體外有寬厚莢膜，莢膜是菌體的1～3倍，可見圓形菌體，外繞有一寬闊的空白帶(莢膜)，見圖2。

1.4生化反應

脲酶試驗陽性、氧化酶試驗陽性、硝酸鹽還原試驗陰性，可使石蕊牛乳堿化，可同化葡萄糖、麥芽糖、果糖、甘露醇、蔗糖、肌醇，不同化乳糖，不發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖，不能利用硝酸鉀。商品API20C AUX板條 (梅里埃) 鑒定(見表1)。

表1 API20C AUX生化試驗

推薦性鑒定結果 ：新生隱球酵母菌鑒定百分率99.9%，典型指數(shù)0.84。

2 討 論

新型隱球菌侵犯人體以中樞神經(jīng)系統(tǒng)最易受累，并常在腦室及大腦導水管周圍的灰質處呈占位性病變[1]。確診要靠病原學證據(jù)，腦脊液墨汁染色或培養(yǎng)找到隱球菌，多次檢查后可提高陽性率。新型隱球菌一般為外源性感染，但也可致內(nèi)源性感染，對人類而言，它通常是條件致病菌。該病的發(fā)生與宿主的免疫狀況、隱球菌菌株的毒力等有關。機體感染途徑以吸入空氣中的孢子為主，隱球菌孢子到達肺部，可引起肺部感染，但常為無癥狀感染，此時隱球菌可被機體清除，也可能隱藏在肉芽腫中。根據(jù)機體的免疫狀況，由肺經(jīng)血液播散時可侵犯所有臟器組織，主要侵犯肺、腦及腦膜，引起慢性腦膜炎，也可侵犯皮膚、骨、關節(jié)和心臟等部位。該病好發(fā)于細胞免疫功能低下者，如艾滋病(AIDS)、糖尿病、惡性腫瘤患者、器官移植及大劑量使用糖皮質激素者。臨床最常見的為亞急性或慢性腦膜炎，肺部感染其癥狀類似肺結核,應用墨汁染色可以幫助鑒別診斷。一般臨床上比較重視從CSF標本中查找新型隱球菌，從血液中發(fā)現(xiàn)者較少。本例從血培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)新型隱球菌也是因藥敏實驗對所有青霉素類甚至萬古霉素均耐藥，才考慮到是否為真菌感染，于是重新進行革蘭氏染色鏡檢，并行墨汁負染色，無論從形態(tài)、染色特點、生化特性還是臨床表現(xiàn)，結合此病人是確診AIDS患者，都符合新型隱球菌感染的診斷。本病一經(jīng)確診，需立即抗真菌治療，用藥途徑和療程需要個體化，聯(lián)合用藥具有明顯的治療效果。目前在臨床上二性霉素B使用較多，也是藥效最好的抗真菌類藥物。它能選擇性地與真菌細胞膜上的麥角甾醇發(fā)生作用，增加細胞膜的通透性，使菌體內(nèi)物質向外滲出，最終造成真菌死亡。停藥指征為臨床癥狀及體征基本消失、腦脊液常規(guī)檢查正常、每周1次墨汁染色找隱球菌連續(xù)3～4周陰性。對于部分顱內(nèi)壓增高患者可采用甘露醇及呋塞米降顱壓，嚴重腦積水患者可行腦脊液分流術，并加強營養(yǎng)支持[2]。

[1]張利成，林亞明.新型隱球菌性腦膜炎的診治進展[J].云南醫(yī)藥，2009,30(6)：683-687.

[2]張齊龍.持續(xù)腰池腦脊液引流治療隱球菌性腦膜炎的臨床探討[J].第四軍醫(yī)大學學報,2005,26(13):1247-1248.

[編輯] 何 勇

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.11.030

2012-06-26

袁霞(1977-)，女，湖北石首人，主管技師，主要從事臨床檢驗工作。

R379.5;R446.5

A

1673-1409(2012)11-R062-02