王艷，丁海燕，李新霞，李莉，鄭立民（.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊8 3 0 0 ；2.新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院，烏魯木齊 8 3 0 0 ）

光纖傳感過程分析法評價(jià)不同廠家氨茶堿片的體外溶出度Δ

王艷1＊，丁海燕1，李新霞1，李莉1，鄭立民2#（1.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，烏魯木齊8 3 0 0 1 1；2.新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院，烏魯木齊 8 3 0 0 1 1）

目的：采用光纖傳感過程分析法評價(jià)不同廠家氨茶堿片的體外溶出度，以考察不同廠家樣品的質(zhì)量差異。方法：采用對照品法，對5個廠家的片劑在4種溶出介質(zhì)（水、pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液和pH 6.8磷酸鹽緩沖液）中的溶出行為進(jìn)行測定，并以相似因子法進(jìn)行比較。結(jié)果：氨茶堿片在不同溶劑中的溶出行為不一致，只有B廠樣品在4種介質(zhì)中均具有較好的溶出度；以B廠樣品為參比制劑，其他4個廠樣品與其比較的相似因子值均小于5 0%。結(jié)論：光纖傳感過程分析法能夠準(zhǔn)確、方便地提供藥物的溶出數(shù)據(jù)、反映藥物的溶出行為，為全面考察藥物的內(nèi)在質(zhì)量提供了良好的檢測手段；不同廠家氨茶堿片質(zhì)量有明顯差異。

光纖傳感過程分析法；氨茶堿片；廠家；體外溶出度

氨茶堿是臨床常用的支氣管擴(kuò)張藥，文獻(xiàn)[1]報(bào)道其溶出度在某種程度上與生物利用度呈現(xiàn)一定的相關(guān)性，美國FDA規(guī)定，對于體外溶出度和體內(nèi)生物利用度相關(guān)的藥物，可以用體外溶出度試驗(yàn)替代體內(nèi)生物利用度試驗(yàn)進(jìn)行生物等效性評價(jià)[2]。

光纖傳感過程分析（FODT）能獲取連續(xù)的溶出曲線，可以實(shí)現(xiàn)對藥物整個溶出過程的監(jiān)測。筆者采用FODT法對市售的5個廠家的氨茶堿片在4種溶出介質(zhì)中的溶出度進(jìn)行了考察，并且按照國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的“藥品評價(jià)抽驗(yàn)質(zhì)量分析指導(dǎo)原則”（簡稱“指導(dǎo)原則”）[3]，采用相似因子（f2）法對其進(jìn)行溶出過程比較，以期為藥品生產(chǎn)和臨床用藥提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Cintra4 0 4紫外-可見分光光度計(jì)（澳大利亞GBC公司）；AB1 3 5-S電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；FODT-6 0 1光纖藥物溶出度過程監(jiān)測儀（簡稱FODT監(jiān)測儀，新疆富科思生物技術(shù)有限公司）。

1.2 試藥

茶堿對照品（成都曼斯特科技有限公司，批號：MUST-1 0 0 9 2 2 0 1，純度：9 8.2 0%）；氨茶堿片（A廠生產(chǎn)，簡稱A片，批號：0 9 1 1 0 1；B廠生產(chǎn)，簡稱B片，批號：B1 1 2 0 1；C廠生產(chǎn)，簡稱C片，批號：1 0 0 9 0 5；D廠生產(chǎn)，簡稱D片，批號：2 0 1 1 0 3 0 4；E廠生產(chǎn)，簡稱E片，批號：1 0 0 3 0 5。規(guī)格均為：每片1 0 0 mg）；氯化鈉、鹽酸、冰醋酸、醋酸鈉、磷酸二氫鉀等均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

精密稱取茶堿對照品0.5 5 4 3 g，用水（簡稱a）溶解并定容至2 5 0mL，制備成貯備液。分別精密量取貯備液1 0、2 0、3 0、4 0、5 0、6 0 mL置于1 0 0 mL量瓶中，并用a稀釋至刻度，得到質(zhì)量濃度分別為2 2.1 7、4 4.3 4、6 6.5 2、8 8.6 9、1 1 0.8 6、1 3 3.0 3 mg·L－1的氨茶堿系列水溶液，相當(dāng)于2 0.4%、4 0.9%、6 1.3%、8 1.7%、1 0 2.1%和1 2 2.6%的藥物溶出度[4]。以pH 1.2鹽酸溶液（b）、pH 4.5醋酸鹽緩沖液（c）和pH 6.8磷酸鹽緩沖液（d）[5]作為溶出介質(zhì)的氨茶堿系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備方法同上。

2.2 FODT測定條件的選擇

2 0 1 0年版《中國藥典》（以下簡稱藥典）氨茶堿片溶出度測定方法[6]的處理過程需要加0.1 mol·L－1的氫氧化鈉溶液以穩(wěn)定氨茶堿溶液，因此改變了氨茶堿的最大吸收波長；而光纖藥物溶出度過程監(jiān)測儀可實(shí)現(xiàn)藥物溶出過程的原位、實(shí)時監(jiān)測，省去手工取樣的煩瑣，可快速檢測，因此采用FODT測定氨茶堿片的溶出度，不需要加氫氧化鈉溶液。

用a制備茶堿對照品溶液（1 0 mg·L－1），在FODT監(jiān)測儀上掃描吸收光譜，結(jié)果顯示最大吸收波長為2 7 1 nm（藥典方法規(guī)定為2 7 5nm），因此本法選擇2 7 1nm作為測定波長，并選擇5 5 0nm作為參比波長，進(jìn)行雙波長空白校正。標(biāo)示量為1 0 0 mg的氨茶堿片完全溶解在8 0 0mL溶出介質(zhì)中，質(zhì)量濃度為1 2 5 mg·L－1，根據(jù)Lambert-Beer定律，分別考察1.0、2.0 mm光程時的吸光度與濃度的關(guān)系。結(jié)果，當(dāng)光程為2.0 mm（探頭規(guī)格為1.0mm）時，吸光度與濃度呈較好的線性關(guān)系。綜上所述，F(xiàn)ODT的測定條件為：測定波長2 7 1 nm，參比波長5 5 0 nm，探頭規(guī)格1.0 mm，測定光程2.0 mm；另，取樣間隔確定為3 0 s。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備。打開FODT系統(tǒng)，進(jìn)入其中的“標(biāo)準(zhǔn)品測定”模式下分別測定“2.1”項(xiàng)下4種溶出介質(zhì)中系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，并進(jìn)行線性回歸，系統(tǒng)自動生成標(biāo)準(zhǔn)曲線。在4種溶出介質(zhì)中六通道的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程見表1（A為吸光度，c為濃度）。

表1 茶堿在4種溶出介質(zhì)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程Tab 1 Standard curves of aminophylline in 4 kinds of mediums

2.3.2 精密度與回收率試驗(yàn)。按相關(guān)方法進(jìn)行考察，結(jié)果日內(nèi)及日間RSD分別為0.6%和1.6%（n＝6）。低、中、高濃度（2 2.1 7、6 6.5 2、1 1 0.8 6mg·L－1）平均回收率分別為 9 7.6%、9 7.5%、9 8.1%，RSD分別為3.0%、2.8%、2.4%。

2.4 溶出度測定

在FODT系統(tǒng)的“溶出度測定”模式下，參照藥典氨茶堿片溶出度測定方法[6]，采用籃法，分別測定溶出介質(zhì)為a、b、c、d時的溶出度。介質(zhì)體積均為8 0 0 mL，轉(zhuǎn)速為1 0 0 r·min－1，溫度為3 7℃。取6片投入轉(zhuǎn)籃置于溶出杯中，設(shè)置測定波長為2 7 1 nm、參比波長為5 5 0 nm、監(jiān)測時間為4 5 min，計(jì)算機(jī)實(shí)時監(jiān)測氨茶堿片的溶出過程，獲得溶出曲線。

2.5 FODT法與藥典法溶出度結(jié)果的比較

為了驗(yàn)證本方法與藥典方法是否一致，在采用FODT監(jiān)測氨茶堿片在a中溶出度的同時，于紫外分光光度儀上，按照藥典法進(jìn)行對照試驗(yàn)，將FODT系統(tǒng)獲得的溶出數(shù)據(jù)與藥典法數(shù)據(jù)比較。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，F(xiàn)ODT法與藥典法所檢測的氨茶堿片的溶出度結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（溶出度均值為9 7.0%、9 6.5%，RSD為1.8%、2.1%，P＞0.0 5）。

2.6 不同介質(zhì)中氨茶堿片的溶出曲線

將5個廠家的氨茶堿片分別在4種溶出介質(zhì)中的溶出曲線列于同一坐標(biāo)進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，只有B廠生產(chǎn)的氨茶堿片在4種溶出介質(zhì)中具有相同的溶出趨勢和溶出行為，1 5 min時溶出度均達(dá)到8 5%以上；而其他4個廠樣品在4種溶出介質(zhì)

中的溶出曲線差異較大，詳見圖1。

圖1 樣品在4種溶出介質(zhì)中的溶出曲線Fig 1 Dissolution curves of tablets in 4kinds of mediums

2.7 相同介質(zhì)中不同廠家的溶出曲線

將5個廠家的氨茶堿片在同一介質(zhì)中的溶出曲線列于同一坐標(biāo)進(jìn)行比較，詳見圖2；同時由FODT系統(tǒng)實(shí)時數(shù)據(jù)提取1 0 min時（藥典規(guī)定檢測時間為1 0 min）5個廠同一批號的6片氨茶堿片的溶出度均值（n＝6），詳見表2。

圖2 4種溶出介質(zhì)中5廠家樣品的溶出曲線Fig 2 Dissolution curves of tablets from 5 manufacturers in 4kinds of mediums

表2 5廠家樣品10min時在4種溶出介質(zhì)中的溶出度（%%）Tab 2 Dissolution rate of tablets from 5 manufacturers in 4 kinds of mediums at 10min（%%）

2.8 比較溶出過程的f2值考察

“指導(dǎo)原則”[3]規(guī)定在使用f2法時，若參比制劑與受試制劑在1 5 min內(nèi)溶出均達(dá)到8 5%，則勿需進(jìn)行溶出過程比較。在本研究中，采用溶出介質(zhì)a、d時，5個廠的氨茶堿片的溶出度在1 5 min內(nèi)均達(dá)到8 5%以上，不需進(jìn)行比較，認(rèn)為彼此相似。因此，在溶出介質(zhì)a、d中，5個廠的氨茶堿片體外溶出曲線相似，體內(nèi)具有生物等效性。

不同廠家的氨茶堿片在溶出介質(zhì)b、c中的溶出過程的比較，選擇了本研究中在各溶出介質(zhì)中溶出曲線類型穩(wěn)定、溶出度符合藥典要求的B片作為參比制劑。FODT系統(tǒng)可以自動提取參比制劑和受試制劑的溶出數(shù)據(jù)進(jìn)行f2值比較，計(jì)算機(jī)系統(tǒng)記錄并統(tǒng)計(jì)出參比制劑與受試制劑的平均溶出曲線，參比制劑溶出1 0%、3 0%、5 0%、7 0%和9 0%的時間以及各個時間點(diǎn)的溶出度均值和RSD，并以這5個時間點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)算f2值。以在溶出介質(zhì)c中受試制劑C片與參比制劑B片的比較為例，比較結(jié)果的系統(tǒng)界面如圖3所示。

圖3 B片與C片的f2比較的系統(tǒng)界面Fig 3 Interface for comparison of f2of B and C tablets

由圖3可見，參比制劑由于其片間差異較大，不符合f2法比較的條件，但是為了表達(dá)f2值，在假設(shè)B片符合參比制劑要求的情況下進(jìn)行比較。結(jié)果，在溶出介質(zhì)c中，A、C、D、E片的f2值分別為2 0.1、1 8.2、2 1.2、2 1.0；在溶出介質(zhì)d中，A、C、D、E片的f2值分別為2 0.9、1 8.2、2 2.2、2 1.4，溶出差異較大，溶出過程均不相似。

3 討論

3.1 FODT法與藥典法的比較

氨茶堿片屬于快速釋放藥物，采用藥典的溶出度測定方法測定要經(jīng)過人工取液、過濾、稀釋，再進(jìn)行紫外測定，操作步驟多且過程復(fù)雜，誤差較大。FODT法采用雙波長法可消除賦形劑的干擾，無需過濾；通過調(diào)節(jié)光程來調(diào)節(jié)藥物的吸光度，減少了稀釋環(huán)節(jié)。因此FODT法省去了人工取液、過濾和稀釋的操作步驟，即節(jié)省了時間又減少了人為操作的誤差，實(shí)現(xiàn)了速釋制劑的原位、實(shí)時、在線的過程分析。本試驗(yàn)對5廠樣品在4種溶出介質(zhì)中的溶出行為都進(jìn)行了考察。如果采用藥典法，工作量大且操作復(fù)雜；而FODT法能準(zhǔn)確、方便地提供藥物的溶出數(shù)據(jù)、反映藥物的溶出行為，為全面考察藥物的內(nèi)在質(zhì)量提供了良好的檢測手段。

3.2 溶出介質(zhì)的影響

藥物主要在消化道吸收，由于人體內(nèi)環(huán)境千差萬別，故消化道內(nèi)的體液pH值也各不相同。優(yōu)質(zhì)的藥品應(yīng)不受pH值的影響，在各種環(huán)境下均能有所釋放，從而被吸收[7]。由溶出曲線可以看出，B廠樣品在4種溶出介質(zhì)中均具有良好的溶出性，4條溶出曲線基本一致，1 5 min時溶出度已達(dá)到8 5%以上，這說明該廠的制劑工藝制得的氨茶堿片無論在何種人體環(huán)境下均有良好的釋放和吸收，對于各種年齡和各種體質(zhì)的人群均具有良好的生物利用度；而其他4廠樣品在4種溶出介質(zhì)中的溶出行為不同，因此這4個廠家生產(chǎn)的氨茶堿片用于不同的患者，生物利用度可能不同。

總體上，5廠樣品都在溶出介質(zhì)a、d中溶出較完全（藥典規(guī)定的溶出介質(zhì)為a），均符合藥典規(guī)定的限度要求（1 0 min內(nèi)溶出度不低于標(biāo)示量的6 0%）；而在溶出介質(zhì)b、c中，5廠樣品存在較大的差異，溶出曲線各異，除B廠外，其他廠家均達(dá)不到藥典的限度要求。這可能是因?yàn)槿艹鼋橘|(zhì)d與a的pH接近，所以在這2種溶出介質(zhì)中表現(xiàn)出一致的溶出趨勢。由于藥典規(guī)定的溶出介質(zhì)為a（水），5廠樣品在溶出介質(zhì)a、d中均有較好的溶出行為；而對于藥典沒有要求的溶出介質(zhì)，則溶出較差。

3.3 溶出過程及生物等效性評價(jià)

“指導(dǎo)原則”[3]規(guī)定，在使用f2法時，要求每個制劑做1 2片（粒），參比制劑與受試制劑數(shù)據(jù)點(diǎn)時間應(yīng)相同，數(shù)據(jù)點(diǎn)數(shù)應(yīng)在4個以上；溶出超過8 5%后只取1個數(shù)據(jù)點(diǎn)，參比制劑與受試制劑前4個時間點(diǎn)組內(nèi)溶出度值RSD小于2 0%，最后1個時間點(diǎn)組內(nèi)溶出度值RSD小于1 0%。遺憾的是，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)生產(chǎn)的氨茶堿片在溶出介質(zhì)b、c中的溶出度片間差異較大，根本達(dá)不到使用f2法的要求；即使假設(shè)參比制劑符合要求，進(jìn)行f2值比較，也判定4個受試制劑與參比制劑的溶出過程均不相似（f2＞5 0，溶出曲線相似），生物不等效。而與此相反，在溶出介質(zhì)a、d中，按照f2法，不需進(jìn)行比較即可認(rèn)為彼此相似，具有生物等效性。這再一次證明了很多企業(yè)溶出度質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的擬定，絕大部分均是“為了讓產(chǎn)品合格”。

藥典只設(shè)定單一溶出介質(zhì)和單點(diǎn)法來控制藥品的質(zhì)量，標(biāo)準(zhǔn)較低，很多生產(chǎn)廠家針對國家規(guī)定的1種溶出介質(zhì)或1個限度點(diǎn)去確定生產(chǎn)工藝，而對其他溶出介質(zhì)或整個溶出過程不予考慮，這導(dǎo)致了國產(chǎn)藥品的質(zhì)量參差不齊。為了提高藥物的品質(zhì)，使不同企業(yè)生產(chǎn)的同一藥品均能具有相同的生物等效性，應(yīng)對體外溶出度試驗(yàn)進(jìn)行更加細(xì)致、深入和全面的研究，才能有效地利用體外溶出度試驗(yàn)來提高藥物體內(nèi)的生物利用度；并且，通過對體外溶出度試驗(yàn)的嚴(yán)格要求，才能推動制藥企業(yè)改進(jìn)制劑工藝，從而提高藥物的內(nèi)在品質(zhì)和臨床療效。

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Evaluation of the Dissolution in Vitro of Aminophylline Tablets from Different Manufacturers by FODT

WANG Yan，DING Hai-yan，LI Xin-xia，LI Li（Pharmacy College，Xinjiang Medical University，Urumqi 8 3 0 0 1 1，China）
ZHENG Li-min（The Fifth Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University，Urumqi 8 3 0 0 1 1，China）

OBJECTIVE：To evaluate the dissolution in vitro of Aminophylline tablets from different manufacturers by fiber-optic dissolution test（FODT），and to investigate the difference of samples from different manufacturers in quality.METHODS：By using substance control method，the dissolutions of Aminophylline tablets from 5manufacturers were determined in the 4kinds of mediums（water，hydrochloric acid（pH 1.2），acetic acid buffer solution（pH 4.5），phosphate buffer solution（pH 6.8）），compared with similarity factor method.RESULTS：The dissolutions of Aminophylline tablets were different in different mediums.Aminophylline tablets from manufacturer B well released in 4mediums；using the tablet of manufacturer B as control，the similarity of tablets from other 4manufacturers were all lower than 5 0%.CONCLUSION：FODT is capable of monitoring the drug dissolution and reflecting dissolution behavior accurately.The method provides an effective way to investigate the inner quality of drug completely.The product from different manufacturers were different in quality.

Fiber-optic dissolution test；Aminophylline tablet；Manufacturer；Dissolution in vitro

R9 2 7.2；R9 7 4

A

1 0 0 1-0 4 0 8（2 0 1 2）3 3-3 1 2 2-0 3

DOI1 0.6 0 3 9/j.issn.1 0 0 1-0 4 0 8.2 0 1 2.3 3.1 9

Δ新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（2 0 1 1 2 1 1 A0 4 1）；新疆維吾爾自治區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目（2 0 0 9 1 0 1 0 7）

＊講師，碩士。研究方向：藥物分析、新疆地方藥用植物。電話：0 9 9 1-4 3 6 2 4 7 0。E-mail：wangyan1 0 6 0@yahoo.com.cn

#通訊作者：主任藥師，副教授。研究方向：藥劑學(xué)。E-mail：zlmsecond@1 6 3.com

2 0 1 1-0 9-2 3

2 0 1 1-1 1-0 9）