王庭欣， 張曉瑜， 劉葉婷，李曉暉

(河北大學(xué) 質(zhì)量監(jiān)督學(xué)院，河北 保定 07l000)

原料奶中5種陰離子的離子色譜分析

王庭欣， 張曉瑜， 劉葉婷*，李曉暉*

(河北大學(xué) 質(zhì)量監(jiān)督學(xué)院，河北 保定 07l000)

為了建立原料奶中5種陰離子(Cl-，NO3-，HPO42-，SO42-，SCN-)的離子色譜檢測(cè)方法，將原料奶經(jīng)乙腈沉淀蛋白質(zhì)后離心過(guò)濾處理進(jìn)行離子色譜檢測(cè).色譜條件，淋洗液：NaHCO3(1.0 mmol/L )，Na2CO3(3.2 mmol/L)， 體積分?jǐn)?shù)為15%的丙酮超純水混合液.流速為1.0 mL/min，檢測(cè)器為電導(dǎo)檢測(cè)器.該方法對(duì)5種離子的電導(dǎo)檢出限均為0.02 mg/L.在線性范圍內(nèi)r=0.997 6及以上.5種離子的精密度RSD 為0.08%～9.58%，各陰離子的回收率均為80%～120% ，變異系數(shù)在10%以內(nèi).該方法具有方便、準(zhǔn)確、成本低的優(yōu)點(diǎn).

離子色譜；原料奶；陰離子

原料奶中含有豐富的乳蛋白、脂肪酸和乳糖，同時(shí)還含有多種微量元素，是人體所需營(yíng)養(yǎng)成分的極好來(lái)源.它的質(zhì)量好壞直接關(guān)系到奶制品的食用安全[1].近年來(lái)有關(guān)原料奶摻假的報(bào)道頻頻出現(xiàn)[2-6].除在原料奶中摻入三聚氰胺外，還存在摻入糊精、淀粉、糖類(lèi)、脂肪粉、乳清粉等非電解質(zhì)物質(zhì)的現(xiàn)象.一些不法商戶為了降低微生物水平，提高售價(jià)，在原料奶中摻入各種防腐劑，如雙氧水、純堿、苯甲酸鹽、山梨酸鹽等；或是在已變質(zhì)的原料奶中摻入氫氧化鈉、尿素、檸檬酸鹽等達(dá)到穩(wěn)定原料奶性狀的效果.這樣的摻假奶其理化性質(zhì)會(huì)發(fā)生很大變化，這可能會(huì)體現(xiàn)在各種陰離子的濃度變化方面,由于變質(zhì)牛奶會(huì)導(dǎo)致乳脂肪和乳蛋白的破壞[7],釋放出不同的陰陽(yáng)離子從而引起原料奶中離子濃度的變化.本文研究原料奶中陰離子的檢測(cè)技術(shù),為原料奶質(zhì)量的快速檢測(cè)提供應(yīng)用基礎(chǔ).

1 材料和方法

1.1儀器、樣品和試劑

離子色譜儀：883 Basic IC plus型，瑞士萬(wàn)通公司，配備電導(dǎo)檢測(cè)器、抑制器、串聯(lián)泵.數(shù)控超聲波清洗儀：KQ-500 DE型，昆山市超聲儀器有限公司.超純水儀：NEX UP 1000型，韓國(guó)HUMAN公司.高速離心機(jī)：中國(guó)亞榮有限公司.

原料奶，由河北新希望天香乳業(yè)有限公司提供.乙腈，Na2HPO4·12H2O，Na2SO4，KSCN為分析純；丙酮為色譜純；濃H2SO4(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98%)，NaCl，NaNO3，NaHCO3，Na2CO3為優(yōu)級(jí)純.所有試劑均由保定市博愛(ài)欣試劑公司提供.

1.2方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：METROSEP A SUPP4(250 mm×4 mm，9 μm); 淋洗液：NaHCO3(1.0 mmol/L )，Na2CO3(3.2 mmol/L)， 體積分?jǐn)?shù)為15%的丙酮的超純水混合液.流速為1.0 mL/min；進(jìn)樣體積為20 μL.

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱(chēng)取干燥過(guò)的NaCl 82.426 mg,NaNO368.540 mg,Na2HPO4186.678 mg,無(wú)水Na2SO473.933 mg,KSCN 83.660 mg,分別用超純水溶解混合，置500 mL容量瓶中定容，此溶液為100 mg/L的混標(biāo)母液.分別吸取混標(biāo)母液500 ，1 000 ，1 500 ，2 000 ，2 500 μL 于25 mL容量瓶中定容，其質(zhì)量濃度分別為2 ，4 ，6 ，8 ，10 mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液.

1.2.3 樣品前處理

取2 mL原料奶于10 mL離心管中，加入4 mL乙腈于60 ℃超聲10 min.15 000 r/min離心10 min后取上清液，經(jīng)0.22 μm有機(jī)相濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣.

1.2.4 回收率及精密度的測(cè)定

2 結(jié) 果

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線

按標(biāo)準(zhǔn)方法配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后在上述色譜條件下分析，以質(zhì)量濃度對(duì)峰面積做回歸，得到 5 種陰離子的線性范圍和相關(guān)系數(shù)等指標(biāo)，結(jié)果見(jiàn)表1.

表1 5種陰離子線性范圍和相關(guān)系數(shù)

5種陰離子在各自的測(cè)試質(zhì)量濃度范圍內(nèi)都具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)都在 0.997 5 以上，標(biāo)準(zhǔn)溶液的離子色譜見(jiàn)圖1.

圖1 各陰離子的標(biāo)注色譜

2.2回收率

選用原料奶作為空白樣品，分別加入一定質(zhì)量濃度的陰離子混合溶液，充分混勻，按照本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得5種陰離子的回收率如表2所示.

表2 離子色譜所測(cè)5種陰離子的回收率

由表2可知，各陰離子的回收率均為80%～120% .說(shuō)明此前處理及測(cè)定方法準(zhǔn)確可行.

2.3精密度

取原料奶樣品，按照本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得其中Cl-,NO3-,SO42+,HPO42-,SCN-的RSD分別為0.08%,9.58%,0.77%,3.26%,6.91%.其變異度均在10%以內(nèi)，結(jié)果見(jiàn)表3.

表3 離子色譜所測(cè)5種陰離子的變異度

3 討 論

對(duì)原料奶中5種陰離子的離子色譜檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行了研究.其電導(dǎo)檢出限均為0.02 mg/L.在線性范圍內(nèi)均可達(dá)r=0.997 6及以上，各陰離子的回收率均為80%～120% ，變異系數(shù)在10%以內(nèi)，因此可認(rèn)為該方法可靠準(zhǔn)確，可應(yīng)用于原料奶中陰離子的檢測(cè).

本文對(duì)樣品的處理方法，曾做過(guò)多項(xiàng)研究.分別選甲醇、乙酸、乙腈在不同溫度下作為蛋白質(zhì)的沉淀劑，以回收率做指標(biāo)，得出的結(jié)果是用乙腈在60 ℃效果最好.并且原料奶與乙腈的體積比為1∶2.此前曾有用離子色譜法檢測(cè)牛奶中硫氰酸根的報(bào)道[8]，但它的樣品前處理中用了英蘭滲析，這樣就加大了實(shí)驗(yàn)成本.本方法具有方便、準(zhǔn)確、成本低的優(yōu)點(diǎn)，為摻假奶及變質(zhì)奶的快速檢測(cè)提供了鑒別基礎(chǔ)，適用于我國(guó)奶站和質(zhì)監(jiān)部門(mén)對(duì)原料奶質(zhì)量的快速檢測(cè).

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(責(zé)任編輯：趙藏賞)

Determinationoffivekindsofanioninrawmilkbyionchromatography

WANGTing-xin,ZHANGXiao-yu，LIUYe-ting,LIXiao-hui

(College of Quality and Technical Supervision, Hebei University, Baoding 071000，China)

A new method was established for determination of five kinds of anion(Cl-，NO3-，HPO42-，SO42-，SCN-)in raw milk by ion chromatography.The method was adopted with sodium bicarbonate (1.0 mmol/L ),sodium carbonate(3.2 mmol/L)and 15% acetone aqueous (volume fraction) as the eluent.The flow rate was 1.0 mL/min.The detection was performed by a conductivity detection mode.The lowest detection limit of five kinds of anion in raw milk was 0.02 mg/L.In linear ranger=0.997 6 or above.Precision test RSD was 0.08%-9.58%.The recovery rate was in 80%-120% range.The coefficient of variation was in less than 10%.This method is simple, accurate and suitable for the determination of five kinds of anion in raw milk.

ion chromatography(IC); raw milk; anion

O657.7

A

1000-1565(2012)01-0087-04

2011-04-30

保定市科技攻關(guān)項(xiàng)目(09N04);河北大學(xué)大學(xué)生科技創(chuàng)新項(xiàng)目(2010134)

王庭欣(1965-),女，河北保定人,河北大學(xué)教授,主要從事食品安全與功能性食品研究.

*河北大學(xué)2011屆質(zhì)量工程本科生

E-mail:tingxinwang@126.com