★ 黃何松 于玲玲 王焱 李躍輝 蔡光先 李俊*

（1.江西中醫(yī)學院 南昌 330004；2.澳門大學中華醫(yī)藥研究院 澳門 999078；3.湖南省中醫(yī)藥研究院 長沙 410006）

川芎茶調散源于《太平惠民和劑局方》，具有疏風止痛的功效，為《中國藥典》2005版一部所收載。本文通過對川芎茶調方超微散與其普通散的粒徑、顯微特征、薄層色譜及其指標成分阿魏酸溶出行為的對比研究，為川芎茶調方超微散的臨床應用提供試驗依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 BFM-T6BI型翻滾式貝利粉碎機（濟南倍力粉技術工程有限公司）；SHIMADZULC-10AT高效液相色譜儀（日本島津），N2000化學工作站；ZRS-8G智能藥物溶出試驗儀（天津大學無線電生產廠）；依利特Hypersil ODS C18色譜柱（4.6mm×200mm）；winner3001干粉激光粒度測定儀及激光粒度分析系統(tǒng)（濟南微納儀器有限公司）。

1.2 試藥 川芎茶調方超微散與其普通散由湖南省中醫(yī)藥研究院超微工程中心提供（批號：20080716）；阿魏酸對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號110773-9910），川芎對照藥材（中國藥品生物制品檢定所，批號120918-200406），羌活對照藥材（中國藥品生物制品檢定所，批號120935-200405）；甲醇為色譜純，正己烷、苯、乙酸乙酯、乙酸均為分析純，水為重蒸餾水。

2 方法與結果

2.1 川芎茶調方超微散與其普通散的制備

2.1.1 超微散（以下簡稱CW散）按原方比例稱取方中各藥味，混合粉碎成粗粉，置烘箱中（60℃）干燥10小時，粉碎成超微粉，備用。

2.1.2 普通散（以下簡稱PT散）參照《中國藥典》2005版二部[川芎茶調散]項下制法，按比例稱取方中各藥味，粉碎成細粉，過100目篩，混合均勻，備用。

2.2 粒徑測定 采用Winner3001干粉激光粒度儀測定CW散的粒徑，結果表明，CW散的D50為11.66μm，粒徑小于75μm的顆粒累積達91.3%。

2.3 顯微特征對比 CW散與PT散顯微特征對比結果見表1（圖1）。

表1 顯微特征對比表

圖1 顯微特征圖

2.4 薄層色譜對比[1]

分別稱取CW散與PT散各1.5克，加石油醚（60℃-90℃）10mL，密塞，時時振搖，浸提4小時，濾過，濾液濃縮至1mL，作為供試品溶液。另取川芎、羌活對照藥材各0.2克，同法制分別制成對照藥材溶液。按處方配比稱取除川芎及羌活以外的其它藥味適量，按制法分別制成缺川芎、缺羌活的陰性樣品，同法分別制成缺川芎、缺羌活的陰性樣品溶液。吸取上述三種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G板上，川芎對照板以正己烷-乙酸乙酯（9：1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。羌活對照板以正己烷-苯-乙酸乙酯（2：1：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%香草醛硫酸溶液，在105℃下烘烤至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上顯相同顏色的斑點，陰性樣品色譜中在相應位置上無斑點。

2.5 溶出行為對比

2.5.1 色譜條件[2]色譜柱：Hypersil ODS 5μm色譜柱（4.6mm×200mm）；流速1.0mL/分；以甲醇-2%乙酸溶液（25：75）為流動相；檢測波長為323nm。

2.5.2 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品適量，用甲醇-2%乙酸（30：70）溶液配制成每1mL含阿魏酸0.15mg的對照品溶液。

2.5.3 線性關系考察 分別精密吸取阿魏酸對照品溶液（0.15mg?mL-1）1、2、3、4、5μL，注入高效液相色譜儀，測定。將阿魏酸峰面積與進樣量進行回歸得方程：y=387561x-3999.1（R=0.999），阿魏酸進樣量在0.15-0.75μg之間線性關系良好。

2.5.4 精密度試驗 精密吸取對照品溶液2μL，依法測定，重復測定5次，測得阿魏酸峰面積RSD為1.3%。

2.5.5 溶出度的測定[3]分別精密稱取CW散與PT散各60克，置溶出杯中，加經脫氣處理后的重蒸餾水900mL作為溶出介質，參照《中國藥典》2005版二部溶出度測定法（漿法），恒溫37.5℃，轉速75r/分，分別于5、10、15、25、40、60、120、240分鐘處定位精密吸取5mL溶出液至離心管中（同時在等溫條件下補充5mL重蒸餾水），離心，將上清液全部轉移至蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，再用甲醇-2%乙酸（30：70）溶液溶解并轉移至5mL容量瓶中，定容，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）過濾，取續(xù)濾液注入高效液相色譜儀，依法測定，計算得CW散與PT散中阿魏酸在每個時間點的溶出量，結果見表2（圖2）。

表2 阿魏酸累積溶出量

圖2 阿魏酸HPLC圖譜

2.5.6 穩(wěn)定性試驗 精密吸取2.5.5項下樣品溶液（10分鐘時間點）10μL，依法測定4次，每隔2小時測定1次，測得阿魏酸的峰面積RSD值為2.95%。

2.5.7 累積溶出百分率及溶出曲線 根據2.5.5項下樣品溶液（240分鐘時間點）中阿魏酸的溶出量，可假定CW散、PT散在該溶出條件下阿魏酸總溶出量均為30mg，計算得阿魏酸的累積溶出百分率，見表3，繪制溶出曲線（見圖3）。

表3 阿魏酸累積溶出百分率

圖3 阿魏酸溶出曲線

2.5.8 溶出速率比較 將表3中數據按Weibull分布模型進行擬合。結果表明，CW散與PT散中阿魏酸體外溶出行為均符合Weibull分布，擬合方程分別為 ：ln[-ln（1-F1）]=0.373lnt1-1.19（r1=0.97）、ln[-ln（1-F2）]=0.51lnt2-2.01（r2=0.98），根據擬合方程計算阿魏酸的溶出參數，見表4。

表4 阿魏酸溶出參數

3 討論

川芎茶調方超微散與其普通散中阿魏酸的溶出參數表明，其溶出行為與溶出曲線相一致：當溶出量小于50%時，超微散中阿魏酸的溶出速率遠遠超過普通散，達3倍以上；溶出量超過50%后，超微散與普通散中阿魏酸的溶出速度均明顯放緩；隨著溶出量的增加，超微散與普通散中阿魏酸溶出量與溶出速率趨于接近。

中藥的藥效成分通常分布于細胞內與細胞間質，以細胞內為主，中藥經超微粉碎后，粒徑變小，細胞尺寸改變，有利于藥效成分溶出。將超微粉碎技術應用于中藥成方制劑中，能加快其藥效成分的溶出速度，對于提高藥品質量，保證臨床療效具有重要意義。

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[S].北京：化學工業(yè)出版社，2005：340.

[2]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國藥典一部[S].北京：化學工業(yè)出版社，2005：339.

[3]蔡光先，李躍輝，楊永華.生脈超微顆粒與其散劑的體外溶出度研究[J].中國醫(yī)藥學報，2004，19（10）：603-606.