周林，任玉珍，杜杰，張曉莉

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102；2.中國藥材公司，北京 100195；3.四川江油中壩附子科技發(fā)展有限公司，四川 江油 621700）

黑順片中膽巴殘留量的測定△

周林1，2*，任玉珍2，杜杰2，張曉莉3

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102；2.中國藥材公司，北京 100195；3.四川江油中壩附子科技發(fā)展有限公司，四川 江油 621700）

目的：測定黑順片中膽巴的殘留量，考察不同中藥飲片企業(yè)生產(chǎn)的黑順片中膽巴殘留量差異，為附子質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。方法：采用Na2EDTA滴定法測定。結(jié)果：不同中藥飲片生產(chǎn)企業(yè)的黑順片中膽巴殘留量差異顯著，其中最高為10.36%，最低為4.38%。結(jié)論：所建立的測定方法操作簡單，重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于附子飲片中膽巴的限量控制。

黑順片；滴定法；膽巴殘留量；含量測定

附子為毛茛科植物烏頭Aconitum carmichaeliiDebx.的子根的加工品，6月下旬至8月上旬采挖，除去母根、須根及泥沙，習(xí)稱 “泥附子”，可以加工成黑順片?！吨袊幍洹?010年版［1］附子項下收載的黑順片炮制工藝中需要浸入食用膽巴（主要成分含有Ca2＋和Mg2＋的化合物）［2］的水溶液中數(shù)日，此工藝最早見于明代 《景岳全書》［3］中 “土人腌以重鹽”、“腌者大咸”。附子經(jīng)膽巴腌制后，附子飲片中有膽巴殘留，作為臨床上配伍率較高的一味常用中藥，膽巴殘留量究竟多少，未見報道， 《中國藥典》2010年版中也未對附子飲片中膽巴的殘留量進行規(guī)定。我們在食品中鈣離子相關(guān)檢測方法的基礎(chǔ)上進行了改進［4］，選用乙二胺四乙酸二鈉絡(luò)合滴定法測定了黑順片中膽巴的殘留量。

1 試藥與儀器

Na2EDTA（北京化學(xué)試劑公司，分析純，純度≥99.0%，批號：T20090108），碳酸鈣 （純度99.99%以上，國藥集團化學(xué)試劑北京有限公司）、氫氧化鉀、硝酸、鈣羧酸指示劑（均為分析純，北京化學(xué)試劑公司）。

氫氧化鉀試液：配制參照 《中國藥典》2010年版（一部）試液（附錄ⅩⅤB）。

鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取碳酸鈣粉末0.6 g（純度99.99%以上，105℃干燥2 h），加適量稀鹽酸，使碳酸鈣完全溶解，靜置，待除去二氧化碳?xì)馀?，轉(zhuǎn)移至500 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

鈣指示劑溶液：稱取0.05 g鈣羧酸指示劑于50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。

50%硝酸溶液：準(zhǔn)確量取250mL硝酸于500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

Na2EDTA溶液配制與標(biāo)定：精密稱取Na2EDTA粉末1 g于500 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

SX3-4-10箱式電阻爐（武漢格萊莫檢測設(shè)備有限公司）、DENVER電子分析天平（北京賽多利斯儀器系列有限公司）等。

2 含量測定

2.1 Na2 EDTA溶液的標(biāo)定

精密移取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL于三角瓶中，加水25 mL，搖勻，再加氫氧化鉀試液10 mL，搖勻，調(diào)pH值在12以上，加指示劑5滴，用Na2EDTA溶液滴定，至指示劑由紫紅色變藍(lán)為止。

2.2 供試品溶液的制備

精密稱取黑順片粉末1 g（過四號篩）于坩堝中，置馬弗爐中緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至600～700℃，灰化6～7 h，使完全灰化并至恒重，取出冷卻，加50%硝酸溶液分兩次溶解（灰化不完全者，加硝酸溶液適量，于電熱板上低溫加熱，反復(fù)多次直至灰化完全），每次5 mL，并轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，用水洗滌坩堝，洗液合并于量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 測定方法

精密移取供試品溶液及空白（水）5 mL于三角瓶中，加水25 mL，搖勻，再加氫氧化鉀試液10 mL，搖勻，pH在12以上，加指示劑5滴，用Na2EDTA溶液滴定，至指示劑由紫紅色變藍(lán)為止。每毫升Na2EDTA溶液相當(dāng)于約0.63 mg氯化鈣。

2.4 精密度考察

精密移取鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液5 mL，按2.3項下的測定方法，平行6份，按上述方法測得消耗Na2EDTA溶液體積的RSD＝1.15%，表明本法精密度良好。

2.5 重復(fù)性考察

精密稱取黑順片粉末（批號061203）約1 g，平行6份，按2.2項下方法分別制成供試品，進行測定。結(jié)果樣品中膽巴平均殘留量為7.56%，RSD＝3.96%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.6 穩(wěn)定性考察

按2.2項下方法制備供試品溶液，每隔2 h測定1次，共測6次，結(jié)果表明膽巴在10 h內(nèi)穩(wěn)定，RSD＝1.36%，符合要求。

2.7 加樣回收率試驗

取已知膽巴含量的黑順片粉末（批號061203）約0.5 g，精密稱定，平行6份，分別加入一定量的CaCO3對照品。按2.2項下方法制成供試液，結(jié)果見表1，表明該方法的加樣回收率符合要求。

表1 黑順片中膽巴回收率試驗（以CaCl2計）

2.8 樣品測定

取不同企業(yè)10批黑順片粉末各約1 g，精密稱定重量，按2.2項下方法制備供試品溶液，測定黑順片中膽巴的殘留量。結(jié)果表明，不同中藥飲片生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的黑順片中膽巴的殘留量差異較大，最高為10.36%，最低為4.38%，高低殘留量之間相差近60%，結(jié)果見表2。

表2 不同廠家黑順片中膽巴殘留量測定結(jié)果

3 討論

目前鈣鎂離子的主要檢測方法有Na2EDTA滴定法［5］、電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀測定法［6］、離子色譜法［7］、原子吸收光譜法［8］等。儀器分析方法測定，靈敏度高，選擇性好，對鈣鎂離子測定更有優(yōu)勢，但這些方法都需要借助分析儀器，不適合我國大部分中藥飲片生產(chǎn)企業(yè)的日常檢測。本實驗首次采用Na2EDTA滴定法測定中藥飲片中輔料膽巴的殘留量，干擾因素少，測定范圍寬。

樣品的提取方法有高氯酸-硝酸消解［8］、微波消解儀消解［6，8］、馬弗爐灰化法［8］等，經(jīng)過提取方法考察，發(fā)現(xiàn)采用高氯酸-硝酸消解，操作危險度高，樣品消化不完全，提取液顏色過深，對實驗結(jié)果有明顯的干擾；本實驗采用馬弗爐灰化法，結(jié)果可靠，重復(fù)性好，平均加樣回收率達到98.04%。

附子中膽巴含量高低引起社會對附子飲片質(zhì)量產(chǎn)生懷疑，現(xiàn)行的 《中國藥典》2010年版中未對附子飲片中膽巴的限量做出規(guī)定。企業(yè)生產(chǎn)附子產(chǎn)品中膽巴含量高低差異較大，導(dǎo)致市場銷售附子飲片質(zhì)量不穩(wěn)定，直接影響到臨床應(yīng)用的安全性，為了保證附子飲片安全、有效、穩(wěn)定、可控的目的，建議制定膽巴的限量標(biāo)準(zhǔn)，并納入到相關(guān)的規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)中，以嚴(yán)格控制附子飲片的質(zhì)量。筆者擬在下一步研究中搜集全國各企業(yè)的黑順片樣品，進行膽巴含量測定，為制定黑順片相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

［1］國家藥典委員會.中國藥典［S］.一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：177-178.

［2］王詒純.川產(chǎn)道地藥材附子的品質(zhì)研究［D］.成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2011：32-33.

［3］李志庸.張景岳醫(yī)學(xué)全書［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，1999：1553.

［4］中華人民共和國衛(wèi)生部.GB/T 5009.92-2003食品中鈣的測定［S］.2003.

［5］楊蘭澤，高靜，等.血清鈣EDTA Na2滴定法的改進［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2002.12（3）：362.

［6］馬強，李曉晶，丁海東，等.不同配伍條件下麻杏石甘湯中鈣離子溶出規(guī)律［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2011，17（8）：67-70.

［7］盧中明，沈才洪，張宿義，等.離子色譜法測定白酒中鈉、鉀、鎂、鈣離子含量的研究［J］.釀酒科技，2009，（12）：35-37.

［8］陳暉，戴紅霞，蔡洋，等.3種消解方法測定西北9種道地藥材中微量元素含量比較［J］.甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2009，26（6）：42-45.

Determ ination of Danba Residual Amount in Aconiti Lateralis Praeparata

ZHOU Lin1，2，REN Yu-zhen2，DU Jie2，ZHANG Xiao-li3
（1.Beijing University of Chinese Medicine，Beijing100102，China；2.China National Corp.of Traditional＆Herbal Medicine，Beijing100195，China；3.Sichuan Jiangyou Zhongba T＆SDevelopment Co.LTD of Aconite Lateralis Praeparata，Jiangyou621700，China）

Objective：To establish a method for the determination of Danba residual amount in Aconiti Lateralis Praeparata from different companies，and to provide a scientific evidence for quality evaluation of Aconiti Lateralis Praeparata.Methods：Na2EDTA titration method was applied for the quantitative analysis.Results：There were obvious differences in residual quantity of alum in Aconiti Lateralis Praeparata from different companies.Conclusion：Themethod is simple，reproducible and special，it can be used for the determination of Danba residual amount in Aconiti Lateralis Praeparata.

Aconiti Lateralis Praeparata；Titration method；Danba residual amount；Content determination

2011-07-20）

中醫(yī)藥行業(yè)科研專項——附子等中藥炮制方法傳承與規(guī)范化應(yīng)用研究（201107008）

* ［通訊作者］周林，Tel：（010）61252955，Email：zhoulin415＠163.com