奚少彥, 吳秋良△, 宗永生, 雍娟娟, 梁建中, 侯景輝, 盧佳斌

(1華南腫瘤學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，2中山大學(xué)腫瘤防治中心病理科，廣東 廣州 510060；3中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室,廣東 廣州 510080)

1000-4718(2012)04-0643-06

2011-12-26

2012-02-29

華南腫瘤學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室鼻咽癌單病種基金資助項(xiàng)目(No.303040736005)

EGFR與c-Kit蛋白的表達(dá)與鼻咽癌原發(fā)瘤的進(jìn)展相關(guān)*

奚少彥1,2, 吳秋良1,2△, 宗永生3, 雍娟娟1,2, 梁建中1,2, 侯景輝1,2, 盧佳斌1,2

(1華南腫瘤學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，2中山大學(xué)腫瘤防治中心病理科，廣東 廣州 510060；3中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室,廣東 廣州 510080)

目的研究表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor, EGFR)與 c-Kit蛋白2種受體酪氨酸激酶在非角化性鼻咽癌中的表達(dá)及其與臨床病理的聯(lián)系。方法采用中山大學(xué)腫瘤防治中心病理科臨床II期和III期非角化性鼻咽癌活檢標(biāo)本95例,復(fù)查臨床病理資料,重新切片染色，包括HE以及EGFR、c-Kit、潛伏膜蛋白1(LMP1)和Ki-67免疫組化染色。結(jié)果EGFR 與 c-Kit蛋白的陽性表達(dá)率分別為70.53%(67/95)和63.16% (60/95)。EGFR與c-Kit蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩者在原發(fā)瘤(T)腫瘤分期中的差異均顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(EGFR,P<0.05；c-Kit，P<0.01)。EGFR及c-Kit蛋白的表達(dá)強(qiáng)度也與T分期相關(guān)(EGFR，P<0.05；c-Kit，P<0.01)。結(jié)論非角化性鼻咽癌細(xì)胞常常表達(dá)EGFR與c-Kit蛋白。這2種受體酪氨酸激酶的表達(dá)呈正相關(guān)，且分別與鼻咽癌患者原發(fā)瘤的進(jìn)展有相關(guān)性。EGFR與c-Kit蛋白可為是否需要進(jìn)一步做靶向性治療的基因分析提供理論依據(jù)。

表皮生長因子受體； c-Kit； 鼻咽腫瘤

酪氨酸激酶有受體和非受體兩大類。受體酪氨酸激酶是細(xì)胞基本的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，不但參與正常細(xì)胞的調(diào)控，而且在許多癌癥的發(fā)生、發(fā)展中起到?jīng)Q定性的作用[1]。表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor, EGFR)屬細(xì)胞表面受體，是酪氨酸激酶第一亞類(ErbB簇)中的一種。EGFR及其抑制劑的應(yīng)用在非小細(xì)胞肺癌中的作用已經(jīng)研究得較多[2]。c-Kit蛋白屬受體酪氨酸激酶中第三亞類(血小板源性生長因子，platelet-derived growth factor, PDGF)[1]，在胃腸道間質(zhì)瘤的發(fā)生和治療研究中也已頗有成效[3]?，F(xiàn)在認(rèn)為，在許多腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，受體酪氨酸激酶基因及其信號通路都有參與，且有可能應(yīng)用其抑制劑作為靶向抗癌治療[1]。關(guān)于鼻咽癌EGFR表達(dá)和EGFR信號通路的改變已有所報(bào)道[4-5]。關(guān)于在鼻咽癌中c-Kit蛋白的表達(dá)及其意義也有報(bào)道[6-7]。但是，在鼻咽癌高發(fā)的廣州地區(qū)，采用同一批活檢病例檢測EGFR和c-Kit蛋白在非角化性鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)，探討兩者是否相關(guān)，及是否仍然分別與原發(fā)瘤進(jìn)展有聯(lián)系的研究則尚未見報(bào)道。本研究的主要目的是為進(jìn)一步探討受體酪氨酸激酶基因及其信號通路的改變與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系做好免疫組化改變的基礎(chǔ)。

材 料 和 方 法

1樣本

采用95例中山大學(xué)腫瘤防治中心2005年1月至2010年12月期間收治的非角化性鼻咽癌病例。男性68例，女性27例。所有病例都有完整的臨床資料及石蠟標(biāo)本。每例活檢標(biāo)本的蠟塊重新進(jìn)行5 μm厚的切片。

2臨床分期

根據(jù)病歷所載患者入院時(shí)的鼻咽內(nèi)窺鏡所見、核磁共振影像、淋巴結(jié)有無腫大以及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等情況，采用2009年第7版美國癌癥聯(lián)合委員會/國際抗癌聯(lián)盟(American Joint Committee on Cancer/Union for International Cancer Control, AJCC/UICC)的標(biāo)準(zhǔn)[8]進(jìn)行臨床分期，即腫瘤(tumor,T)的體積和范圍、淋巴結(jié)(nodes,N) 有無轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)移情況以及有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(metastasis,M)，確立臨床分期(即TNM分期) 。

3血清抗EB病毒(Epstein-Barrvirus)抗體水平

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）排除嚴(yán)重肝、腎功能不全的患者；（2）排除嚴(yán)重心律不齊、心動房顫的患者；（3）排除傳染性、血液疾病。

采用免疫酶標(biāo)法檢測患者入院時(shí)血清抗EB病毒衣殼抗原(viral capsid antigen, VCA) 和早期抗原(early antigen, EA)的免疫球蛋白A (immunoglobulin A, IgA) 滴度(VCA/IgA和EA/IgA 滴度)[9]。

4免疫組織化學(xué)染色

采用 Envision 兩步法進(jìn)行EGFR、c-Kit蛋白、潛伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)和Ki-67免疫組化染色。

5EGFR和c-Kit蛋白免疫組化的評分標(biāo)準(zhǔn)

按照Putti等[10]的EGFR免疫反應(yīng)計(jì)分標(biāo)準(zhǔn), 將EGFR的表達(dá)染色強(qiáng)度得分與陽性細(xì)胞比例得分相乘。其中強(qiáng)度分為：1分為弱陽性，2分為中等陽性，3分為強(qiáng)陽性；而陽性細(xì)胞比例分為：0分為無陽性細(xì)胞，1分為<10%的陽性細(xì)胞，2分為10%～50%的陽性細(xì)胞；3分為>50%的陽性細(xì)胞。由2位病理醫(yī)生獨(dú)立閱片，取其平均值。EGFR 表達(dá)陽性的標(biāo)準(zhǔn)為得分≥3分。

按照Sheu等[11]所采用的免疫反應(yīng)計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)，也是將c-Kit蛋白的表達(dá)強(qiáng)度與陽性細(xì)胞比例得分相乘。其強(qiáng)度的評分標(biāo)準(zhǔn)與EGFR相同。陽性細(xì)胞比例分為：1分：1%～25%的陽性細(xì)胞；2分：26%～50%的陽性細(xì)胞；3分：51%～75%的陽性細(xì)胞；4分：76%～100%的陽性細(xì)胞。c-Kit蛋白得分≥3分為陽性表達(dá)。

6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 16.0 軟件，對EGFR或c-Kit蛋白的陽性率與分期、臨床病理特點(diǎn)之間的聯(lián)系進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，EGFR與c-Kit蛋白的相關(guān)性采用Spearmen等級相關(guān)檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1癌旁上皮及癌間質(zhì)中EGFR和c-Kit蛋白的表達(dá)

EGFR常表達(dá)于癌旁上皮的胞膜和胞漿，以基底細(xì)胞及基底上細(xì)胞為明顯，陽性著色多以胞膜為顯著，見圖1。僅有少數(shù)病例的癌旁上皮灶性表達(dá)c-Kit蛋白；部分非角化性癌間質(zhì)中散在的肥大細(xì)胞以及小涎腺細(xì)胞亦可表達(dá)c-Kit蛋白，也定位在胞膜，見圖2。未見癌旁上皮有LMP1的表達(dá)。部分基底細(xì)胞及基底上細(xì)胞可呈Ki-67陽性。

2非角化性鼻咽癌細(xì)胞中EGFR和c-Kit蛋白的表達(dá)

95例非角化性鼻咽癌中部分病例可見表達(dá)LMP1的癌細(xì)胞，見圖3。表達(dá)Ki-67的癌細(xì)胞百分?jǐn)?shù)各例不一致。圖4、5及表1顯示，EGFR 與 c-Kit蛋白在95例非角化性鼻咽癌活檢中的陽性表達(dá)率分別為70.53% (67/95)和63.16%(60/95)。EGFR和c-Kit蛋白是否表達(dá)與患者的年齡段 (<50歲和≥50歲)、性別、血清VCA/IgA和EA/IgA滴度、癌細(xì)胞是否表達(dá)LMP1以及Ki-67增值指數(shù)均無關(guān)聯(lián)(P>0.05)。

Figure 1. The membrane and cytoplasm of basal/parabasal cells in the paracancerous lining epithelium of non-keratinizing carcinoma were immunoreactive against EGFR antibody (immunohistochemical staining,×400).

圖1非角化性癌癌旁披覆上皮的基底和基底上細(xì)胞呈膜漿EGFR陽性表達(dá)

Figure 2. The membrane and cytoplasm of a few mast cells in the stroma of non-keratinizing carcinoma were immunoreactive against c-Kit(CD117) antibody (immunohistochemical staining，×200) .

圖2非角化性癌間質(zhì)中散在的少數(shù)肥大細(xì)胞呈膜漿c-Kit陽性

Figure 3. The cytoplasm of a portion of non-keratinizing carcinoma cells was LMP1 positive (immunohistochemical staining，×400).

圖3非角化性癌細(xì)胞胞漿呈LMP1陽性

Figure 4. The membrane and cytoplasm of non-keratinizing carcinoma cells showed EGFR expression with strong intensity (immunohistochemical staining，×200).

圖4非角化性癌癌細(xì)胞膜漿呈EGFR強(qiáng)陽性

Figure 5. The membrane and cytoplasm of non-keratinizing carcinoma cells showed c-Kit expression with strong intensity (immunohistochemical staining，×200).

圖5非角化性癌癌細(xì)胞膜漿呈c-Kit強(qiáng)陽性

表1EGFR和c-Kit蛋白表達(dá)與臨床病理特點(diǎn)的聯(lián)系

Table 1. Relationship between expression of EGFR and c-Kit proteins and clinicopathological characteristics

ItemEGFRc-KitPositiverate70.53%(67/95)63.16%(60/95)Age(year) <5069.8%(44/63)66.7%(42/63) ≥5071.9%(23/32)56.3%(18/32)2=0.04P>0.052=0.99P>0.05Sex Male72.1%(49/68)58.8%(40/68) Female66.7%(18/27)74.1%(20/27)2=0.27P>0.052=1.392P>0.05SerumVCA/IgAEGFR-positive1/248.71c-Kit-positive1/227.82EGFR-negative1/184.86c-Kit-negative1/226.27F=2.46P>0.05F=0.37P>0.05SerumEA/IgAEGFR-positive1/33.04c-Kit-positive1/31.53EGFR-negative1/23.78c-Kit-negative1/27.03F=0.006P>0.05F=1.18P>0.05LMP1 LMP1-positive70.0%(21/30)66.7%(20/30) LMP1-negative70.8%(46/65)61.5%(40/65)2=0.006P>0.052=0.23P>0.05Ki-67indexEGFR-positive41.40%c-Kit-positive42.04%EGFR-negative47.06%c-Kit-negative44.95%2=0.913P>0.052=0.262P>0.05

3EGFR和c-Kit蛋白在鼻咽癌細(xì)胞中免疫反應(yīng)計(jì)分之間的相互關(guān)系

表2顯示，EGFR在95例鼻咽癌中免疫反應(yīng)計(jì)分與c-Kit蛋白計(jì)分之間，按Spearmen等級相關(guān)計(jì)算呈正相關(guān)(P<0.05)。

表2EGFR免疫反應(yīng)計(jì)分與c-Kit計(jì)分之間的關(guān)系

Table 2. The relationship between the expression of EGFR and c-Kit proteins

c-KitexpressionEGFRexpressionSum012346906111510125110010305210001035310103016432310101050000101260000201381100022690000110210001000121100000011120322461128Sum1378517232295

r=0.256,P<0.05.

4EGFR和c-Kit蛋白在鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)率與臨床分期的關(guān)系

表3顯示EGFR和c-Kit蛋白在鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)率與臨床分期的關(guān)系，T2的EGFR表達(dá)率(85.2%)與T1的EGFR表達(dá)率(50.0%)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05)。T3的c-Kit表達(dá)率(79.5%)與T2的c-Kit表達(dá)率(40.7%)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.01)。

表3EGFR及c-Kit在鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)與臨床TNM分期的關(guān)系

Table 3. The relationship between the EGFR and c-Kit expression and TNM staging

EGFRc-KitTstagingT150.0%(12/24)58.3%(14/24)T285.2%(23/27)40.7%(11/27)T372.7%(32/44)79.5%(35/44)2=7.76P<0.052=11.14P<0.01NstagingN085.7%(6/7)85.7%(6/7)N166.1%(39/59)61.0%(36/59)N275.9%(22/29)62.1%(18/29)2=1.73P>0.052=1.66P>0.05TNMstagingII65.2%(30/46)52.2%(24/46)III75.5%(37/49)73.5%(36/49)2=1.21P>0.052=4.62P<0.05

T:tumor;N:nodes;M:metastasis.

5EGFR和c-Kit蛋白在鼻咽癌細(xì)胞中的免疫表達(dá)強(qiáng)度與T分期的關(guān)系

表4顯示EGFR和c-Kit蛋白在鼻咽癌細(xì)胞中的免疫表達(dá)強(qiáng)度與T分期的關(guān)系。EGFR在T2期表達(dá)強(qiáng)度為3分的占66.67% (16/27)，高于T1期的25.0%(6/24)，卡方檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。c-Kit蛋白在T3期表達(dá)強(qiáng)度為3分的占52.27%(23/44)，高于T2期的25.93%(7/27)，卡方檢驗(yàn)亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表4EGFR和c-Kit在鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)強(qiáng)度與T分期之間的關(guān)系

Table 4. The relationship between staining intensity of EGFR and c-Kit and T staging

TstagingEGFRintensityc-KitintensitySum01230123T1711067141224T2126181406727T354112446112344Sum13727482572142952=14.44 P<0.052=19.75 P<0.01

討 論

受體酪氨酸激酶屬細(xì)胞表面受體。它們具有含激酶催化位點(diǎn)的胞漿結(jié)構(gòu)域，跨膜α-螺旋和含配體結(jié)合位點(diǎn)的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域。后者與配體結(jié)合后導(dǎo)致二聚體化，使另一單聚體胞漿結(jié)構(gòu)域磷酸化，即自身磷酸化,從而活化了其信號通路。受體酪氨酸激酶基因突變亦可活化其信號通路。酪氨酸激酶信號通路的活化影響細(xì)胞的功能。

EGFR蛋白由位于人體7p12.3-p12.1染色體上的EGFR基因編碼形成。該基因無突變時(shí)所產(chǎn)生的蛋白履行正常細(xì)胞的功能；而具有突變的EGFR基因則表達(dá)組成性活躍 (constitutively active)的異常EGFR蛋白，從而引起癌細(xì)胞不可控制的生長和增殖。我們的結(jié)果顯示，廣州地區(qū)95例非角化性鼻咽癌中有67例(70.53%)表達(dá)EGFR，與2006年王樹森等[12]報(bào)道廣州地區(qū)55例鼻咽癌中有39例表達(dá)EGFR(70.9%)一致?？墒牵覀兊慕Y(jié)果顯示，EGFR的表達(dá)率在男女患者間無差異，而王樹森等的結(jié)果卻顯示有性別差異。Lee等[13]檢測102例鼻咽癌中外顯子19和21以及85例鼻咽癌中外顯子18均無突變，在79例鼻咽癌中外顯子20有41%的病例呈2361G>A (Q787Q)以及3%的病例呈2457G>A (V819V)的靜止性突變(silent mutation)。Naji等[14]采用直接測序法檢測60例摩洛哥鼻咽癌活檢組織EGFR基因第18～21外顯子，結(jié)果顯示沒有一例存在點(diǎn)突變,但卻發(fā)現(xiàn)第20外顯子呈G2607A多態(tài)性，39例(65%)是AA，16例(26.6%)是GA基因型。他們認(rèn)為，雖然突變罕見于EGFR基因激酶結(jié)構(gòu)域，應(yīng)用酪氨酸激酶抑制劑治療鼻咽癌可能無效；但因鼻咽癌細(xì)胞EGFR基因第20外顯子常呈多態(tài)性，酪氨酸激酶抑制劑還會具有治療效應(yīng)。因此，在免疫組化檢測鼻咽癌有無EGFR表達(dá)的基礎(chǔ)上，再做EGFR的基因分析，進(jìn)一步了解鼻咽癌EGFR激酶催化位點(diǎn)有無基因改變?nèi)匀恢档眠M(jìn)一步研究。

人類c-Kit基因位于染色體4q11-q12，可編碼一種稱為c-Kit蛋白或者CD117的受體酪氨酸激酶。本研究結(jié)果顯示c-Kit蛋白在廣州地區(qū)95例非角化性癌的表達(dá)率為63.16%(60/95)，與雍娟娟等[7]同樣在廣州地區(qū)63例鼻咽癌的表達(dá)率52.38%差異不大。但Bar-Sela等[15]在以色列的49例鼻咽癌中c-Kit蛋白表達(dá)率僅為33%(16/49)。鼻咽癌的發(fā)病在中發(fā)區(qū)有2個年齡高峰。Bar-Sela等[15]分析以色列49例鼻咽癌患者，c-Kit蛋白多表達(dá)在第一個高峰期的年青患者；而我們高發(fā)區(qū)的95例鼻咽癌屬第二個高峰期，其c-Kit蛋白的表達(dá)在2個年齡段(<50與≧50歲)間無差異。 Bar-Sela等[15]未報(bào)道患者血清抗EB病毒抗體的情況，本研究則顯示c-Kit蛋白陽性和陰性病例之間，血清抗EB病毒抗體水平并無差異。Bar-Sela等[15]還報(bào)道5例角化性鼻咽癌c-Kit陰性、c-Kit陽性病例全為非角化性癌，而本文95例則全為非角化性癌，陽性率只有63.16%。可能和地域分布等有關(guān)。Huang等[16]的研究顯示，鼻咽癌活檢樣本或鼻咽癌細(xì)胞株均可檢測到c-Kit基因的突變。因此，為了探索鼻咽癌患者的個體化治療，有必要進(jìn)行c-Kit基因突變分析等進(jìn)一步研究。

我們知道，EGFR與配體表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF)結(jié)合后主要通過一系列細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)鏈，即MAPK/ERK 信號通路到達(dá)核內(nèi)，調(diào)節(jié)細(xì)胞多種生物學(xué)反應(yīng)，包括增殖、分化、細(xì)胞移動和存活[17]。而c-Kit蛋白與其配體人體干細(xì)胞因子(human stem cell factor, SCF)結(jié)合后所啟動的細(xì)胞內(nèi)信號通道(SCF-Kit pathway)主要影響干細(xì)胞的自我更新、增殖、遷移至遠(yuǎn)處以及具抗毒性[18]。本研究結(jié)果顯示，鼻咽癌細(xì)胞表達(dá)EGFR的免疫反應(yīng)計(jì)分與表達(dá)c-Kit的免疫反應(yīng)計(jì)分之間呈正相關(guān)。說明鼻咽癌細(xì)胞中MAPK/ERK 信號通路與SCF-Kit通路中蛋白質(zhì)之間的相互作用值得深入探討。郭麗麗等[19]報(bào)道EB病毒編碼的LMP1可作為致瘤蛋白在鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用； 尹志華等[20]的實(shí)驗(yàn)也證明變異型LMP1可以有效地激活NF-кB以及誘導(dǎo)高水平EGFR的表達(dá)。最近，Kung等[21]進(jìn)一步說明，LMP1介導(dǎo)的活化STAT3又可誘導(dǎo)產(chǎn)生Bcl-3，后者與活化了的NF-κB轉(zhuǎn)錄因子形成p50 NF-κB1-Bcl-3復(fù)合物，從而增加EGFR的轉(zhuǎn)錄?？墒?，本研究所采用的免疫組化法尚未顯示LMP1的表達(dá)與EGFR的表達(dá)之間有相關(guān)性。因此，需要采用其它分子生物學(xué)方法進(jìn)一步作這方面的探索。Charfi等[22]報(bào)道突尼斯99例鼻咽癌中LMP1的表達(dá)與c-Kit蛋白的表達(dá)相關(guān)。雍娟娟等63例鼻咽癌中LMP1與c-Kit蛋白的表達(dá)也有相關(guān)性(尚未發(fā)表資料)。本文95例鼻咽癌中LMP1與c-Kit蛋白的表達(dá)之間未顯示有相關(guān)性。因此，LMP1蛋白是否與SCF-Kit通路中的相關(guān)蛋白相互作用，也需要采用分子生物學(xué)方法進(jìn)一步作這方面的探索。

本文結(jié)果顯示，EGFR在鼻咽癌活檢組織中的表達(dá)均分別與患者的TNM分期和N分期之間無相關(guān)性，但卻與T分期有聯(lián)系。早在2004年，Leong等[23]在新加坡報(bào)道75例鼻咽未分化癌時(shí)就提出，EGFR的表達(dá)是反映原發(fā)瘤體積大小的獨(dú)立指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，EGFR的表達(dá)率由T1期的50%升高至T2期的85.2%，但T3期卻又下降至72.7%了；表達(dá)強(qiáng)度達(dá)3分者也是如此，由T1期的25.0%升高至T2期的67.0%， T3期卻下降至54.5%。 EGFR信號通路在非角化性鼻咽癌中的活化主要是增強(qiáng)細(xì)胞遷移(cell migration)功能，從而使鼻咽癌細(xì)胞較快地侵潤至咽旁間隙，因?yàn)槔奂把逝蚤g隙是T2期的特征[8]。而EGFR信號通路活化對細(xì)胞增殖(cell proliferation)等其它細(xì)胞活性的作用并不突出。本研究結(jié)果所顯示的EGFR陽性和EGFR陰性活檢中代表細(xì)胞增殖的平均Ki-67指數(shù)之間無差異。而另一方面，c-Kit蛋白的表達(dá)率由T2期的40.7%升高至T3期的79.5%；表達(dá)強(qiáng)度達(dá)3分者也是如此，由T2期的25.9% 升高至T3期的52.3%。這或許可以提示我們，c-Kit信號通路在非角化性鼻咽癌中的活化主要是增強(qiáng)了其導(dǎo)致的細(xì)胞侵襲性(cell invasiveness)，從而使鼻咽癌細(xì)胞容易侵襲顱底骨和鼻旁竇，因?yàn)槔奂帮B底骨和鼻旁竇是T3期的特征[8]。Yasuda等[24]的研究也顯示SCF-Kit 信號通道可增強(qiáng)胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1和SW1990的侵襲性。Meghji等[25]報(bào)道頭頸部鱗癌細(xì)胞株可以產(chǎn)生溶骨因子，表達(dá)c-Kit蛋白的鼻咽癌細(xì)胞是否也有利于產(chǎn)生某種溶骨因子, 從而容易侵襲顱底骨和鼻旁竇，值得進(jìn)一步探討。

總之，EGFR和c-Kit蛋白在非角化性鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá)率相互關(guān)聯(lián)。兩者的表達(dá)率和表達(dá)強(qiáng)度在鼻咽癌的T分期中均有差異。表達(dá)EGFR的癌細(xì)胞遷移功能較強(qiáng)，表達(dá)c-Kit蛋白的癌細(xì)胞侵襲性較強(qiáng)。因此，采用免疫組化作EGFR和c-Kit的分子學(xué)研究，可為如何采用酪氨酸激酶抑制劑為鼻咽癌患者作個體化治療提供理論依據(jù)。

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ProteinexpressionofEGFRandc-Kitisassociatedwithprimarytumorprogressioninnasopharyngealcarcinoma

XI Shao-yan1,2, WU Qiu-liang1,2, ZONG Yong-sheng3, YONG Juan-juan1,2, LIANG Jian-zhong1, 2, HOU Jing-hui1, 2, LU Jia-bin1, 2

(1StateKeyLaboratoryofOncologyinSouthChina,2DepartmentofPathology,Sunyat-senUniversityCancerCenter,Guangzhou510060,China;3DepartmentofPathology,ZhongshanSchoolofMedicine,SunYat-senUniversity,Guangzhou510080,China.E-mail:xishy@susucc.org.cn)

AIM: To investigate the protein expression of 2 receptor tyrosine kinases,epidermal growth factor receptor(EGFR) and c-Kit, in non-keratinizing nasopharyngeal carcinoma (NPC) and to analyze the relationship of that with the clinicopathological parameters.METHODSNinety-five samples of stage II and III non-keratinizing NPC biopsies were collected from the Department of Pathology, Sun Yat-sen University Cancer Center. The 10% formalin-fixed paraffin-embedded biopsy blocks were re-sectioned. Besides HE routine staining, immunohistochemistry was performed for detecting the expression of EGFR, c-Kit, latent membrane protein 1(LMP1) and Ki-67.RESULTSThe protein expression rates of EGFR and c-Kit were 70.53% (67/95) and 63.16% (60/95), respectively. The expression score of EGFR was positively correlated with that of c-Kit protein (P<0.05). They were both correlated with T staging (EGFR,P<0.05; c-Kit,P<0.01). Furthermore, the staining intensities of EGFR and c-Kit proteins were also correlated with T staging(EGFR,P<0.05; c-Kit,P<0.01).CONCLUSIONThe proteins of EGFR and c-Kit are usually expressed in non-keratinizing NPC cells. The immunoreactive scores of these 2 receptor tyrosine kinases are positively correlated with each other. Either the expression rate or the immunoreactive intensity of EGFR and c-Kit proteins is correlated with primary tumor progression. Immunohistochemical staining of EGFR or c-Kit protein in NPC biopsies could be recognized as an insight into further gene analysis for target therapy.

Epidermal growth factor receptor; c-Kit; Nasopharyngeal neoplasms

R365

A

10.3969/j.issn.1000-4718.2012.04.012