孟良玉，盧佳琨，蔡文倩，渠宏雁，劉錦峰，蘭桃芳，勵(lì)建榮

（渤海大學(xué)化學(xué)化工與食品安全學(xué)院，遼寧省食品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧省高校重大科技平臺(tái)“食品貯藏加工及質(zhì)量安全控制工程技術(shù)研究中心”，遼寧錦州 121013）

敗醬草提取物體內(nèi)抗氧化活性研究

孟良玉，盧佳琨，蔡文倩，渠宏雁，劉錦峰，蘭桃芳，勵(lì)建榮*

（渤海大學(xué)化學(xué)化工與食品安全學(xué)院，遼寧省食品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧省高校重大科技平臺(tái)“食品貯藏加工及質(zhì)量安全控制工程技術(shù)研究中心”，遼寧錦州 121013）

目的：研究敗醬草提取物對(duì)小鼠體內(nèi)抗氧化作用。方法：采用頸肩部皮下注射D-半乳糖生理鹽水無(wú)菌溶液制造衰老模型，在正常飼料中分別加入不同含量敗醬草提取物，做成低、中、高和最高四個(gè)劑量組。8周后摘眼球取血及脫臼處死、組織取樣，用試劑盒測(cè)定小鼠血清、肝臟、腦組織中MDA含量、SOD、GSH-PX活性及血清、肝臟中CAT活性。結(jié)果：敗醬草提取物可顯著降低血清及組織MDA含量，提高SOD、GSH-PX和CAT活力。結(jié)論：敗醬草提取物具有顯著的體內(nèi)抗氧化活性。

敗醬草提取物，體內(nèi)，抗氧化

敗醬草為敗醬科多年生草本植物白花敗醬、黃花敗醬或其近緣植物的帶根全草，白花敗醬又名龍芽敗醬、苦菜、取麻菜、英菜、山苦英等[1-4]。廣泛分布于我國(guó)南北各地，多生于麥田、菜田、路邊、村旁，因含有多種氨基酸、維生素和礦物質(zhì)等有益成分而被人們廣泛食用。同時(shí)敗醬草也是一種傳統(tǒng)中藥，具有清熱利濕、解毒排膿、活血化瘀、清心安神、促進(jìn)肝細(xì)胞再生、改善肝功能、增強(qiáng)抑菌和抗病毒等作用，臨床上常用于治療闌尾炎、痢疾、肝炎、扁桃體炎、流行性腮腺炎及癰腫等癥[5-6]。但多年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)敗醬草的研究與應(yīng)用大多集中在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，或只是作為一味野菜食用[7]。對(duì)其抗氧化等保健功能的評(píng)價(jià)研究甚少，因此深入研究發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制具有十分重要的意義。本文對(duì)敗醬草提取物進(jìn)行體內(nèi)抗氧化研究，為敗醬草的綜合開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

敗醬草提取物[8]實(shí)驗(yàn)室自制；ICR小白鼠，清潔級(jí)，10～12周齡，雄性，體重（28±2）g 購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司；丙二醛（MDA）試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）試劑盒、超氧化物歧化酶（T-SOD）試劑盒、過(guò)氧化氫酶（CAT）試劑盒、考馬斯亮蘭試劑盒 南京建成生物工程研究所；化學(xué)試劑 均為國(guó)產(chǎn)分析純。

電熱恒溫水浴鍋 北京市永光明醫(yī)療儀器廠；Neofuge 13R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 力康發(fā)展有限公司；SP-2102UV紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海光譜儀器有限公司；QL-901 vortex 海門市其林貝爾儀器制造有限公司；FA2004電子天平 上海天平廠；DL102電熱鼓風(fēng)干燥箱 天津市實(shí)驗(yàn)儀器廠。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

小鼠適應(yīng)一周后，選取健康雄性小鼠66只，根據(jù)體重隨機(jī)分為6組，正常對(duì)照組、衰老模型組、敗醬草提取物低、中、高、最高劑量組。即每組3籠，每籠分別為4、4、3只。

除正常對(duì)照組外其余5組每日皮下注射D-半乳糖溶液（120mg/kg·bw·d），正常對(duì)照組皮下注射等體積生理鹽水。在低、中、高和最高四個(gè)劑量的飼料中分別加入（0.045%、0.09%、0.18%、0.27%）敗醬草提取物。

1.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定

小鼠連續(xù)喂養(yǎng)8周，每籠小鼠每日約給40g左右飼料（含或不含敗醬草提取物）、自由飲水。末次給藥后空腹20h處理小鼠取材。摘眼球取血，低溫離心取血清。取血后的小鼠頸椎脫臼處死，取肝、腦組織，以冰生理鹽水淋洗，濾紙吸干，稱重后制成組織勻漿。用試劑盒分別測(cè)定小鼠血清、肝臟、腦組織中MDA含量、SOD、GSH-PX活性及血清、肝臟中CAT活性。具體操作見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 敗醬草提取物對(duì)小鼠器官重量的影響

通過(guò)正常組和模型組的比較，可知與正常組相比，D-半乳糖對(duì)小鼠臟器（包括心、腦、腎、脾和肝臟）的重量沒(méi)有顯著性影響，給予敗醬草提取物后，不同劑量組各組間無(wú)顯著差異。

2.2 血清及各組織中SOD活性

由表2可以看出，對(duì)照組血清、腦、肝臟組織SOD活性均顯著或極顯著高于模型組。其中中劑量組血清SOD活性比模型組高12%，差異顯著；高、最高劑量組血清SOD活性極顯著高于模型組；高、最高劑量組肝臟、腦組織中SOD活性均顯著高于模型組，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著。敗醬草提取物能提高體內(nèi)SOD活性，并且SOD的增加趨勢(shì)與測(cè)定范圍內(nèi)給藥劑量成正比關(guān)系。

2.3 血清及各組織中MDA含量

從表3可以看出，與模型組相比，對(duì)照組血清和腦組織中的MDA含量極顯著低于模型組，肝臟組織MDA含量顯著低于模型組。四個(gè)劑量組的小鼠血清及組織中MDA含量均低于模型組。其中，低劑量組較模型組相比，血清、肝臟和腦中MDA含量分別降低了10.48%、10.24%和4.33%，但差異不顯著。中、高、最高三個(gè)劑量組血清中MDA含量極顯著低于模型組，高、最高劑量組肝臟中MDA含量以及最高劑量組腦組織中MDA含量均極顯著低于模型組。高劑量組腦組織中MDA含量顯著低于模型組中MDA含量。這說(shuō)明敗醬草提取物具有明顯的抗氧化作用，并且呈一定的量效關(guān)系。

2.4 血清及各組織中GSH-PX活性

對(duì)照組、四個(gè)劑量組血清GSH-PX活性與模型組相比均無(wú)顯著性差異；說(shuō)明敗醬草提取物對(duì)小鼠血清中GSH-PX無(wú)顯著性影響。對(duì)照組肝臟、腦組織GSH-PX活性極顯著高于模型組，除低、中劑量組腦組織GSH-PX活性與模型組無(wú)顯著性差異外，其余各組與模型組相比均有顯著性差異，其中最高劑量組肝臟組織，高、最高劑量組腦組織GSH-PX活性極顯著高于模型組。說(shuō)明敗醬草提取物可以提高小鼠體內(nèi)組織中GSH-PX活性。

表1 小鼠各臟器重量變化（g）Table 1 The change of organic weightofmice（g）

表2 各組小鼠血清及組織中SOD活性（U/mg prot）Table 2 Activity of SOD in the serum and tissues ofmice（U/mg prot）

表3 各組小鼠血清及組織中MDA含量（nmol/mg prot）Table 3 Values of MDA in the serum and tissues ofmice（nmol/mg prot）

表4 各組小鼠血清及組織中GSH-PX活性（U/mg prot）Table 4 Activity of GSH-PX in the serum and tissues ofmice（U/mg prot）

表5 各組小鼠血清及組織中CAT活性（U/mg prot）Table 5 Activity of CAT in the serum and tissues ofmice（U/mg prot）

2.5 血清及各組織中CAT活性

對(duì)照組血清、肝臟組織中CAT活性均極顯著或顯著高于模型組。高劑量組血清和高、最高劑量組肝臟組織中CAT活性與其相對(duì)應(yīng)的模型組相比均有顯著性提高，最高劑量組血清CAT活性極顯著高于模型組，說(shuō)明敗醬草提取物具有抗氧化活性。

3 結(jié)論與討論

生物體內(nèi)自由基處于生物生成體系與生物防護(hù)體系的平衡之中，該兩大體系均可由酶調(diào)控[9]。血清中活性氧自由基導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化而產(chǎn)生大量的丙二醛（MDA）；SOD、GSH-Px、CAT是體內(nèi)生物防護(hù)體系中最重要的抗氧化酶，是體內(nèi)自由基清除劑，在機(jī)體抗自由基損傷中起著重要作用[10]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，敗醬草提取物可以顯著提高小鼠的血清、肝、腦組織中SOD、肝和腦組織中GSH-PX以及血清、肝臟組織CAT活性，降低血清及肝臟、腦組織MDA含量。同時(shí)敗醬草提取物屬天然植物提取物，提取過(guò)程中環(huán)保無(wú)污染，因此對(duì)其進(jìn)行研究和將其開(kāi)發(fā)成天然抗氧化劑或自由基清除劑對(duì)保障機(jī)體健康、預(yù)防疾病有重要意義。

[1]劉信平，張馳，譚志偉，等.敗醬草揮發(fā)性化學(xué)成分研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（2）：410，593.

[2]龔小林，杜一新，王海燕.敗醬草高產(chǎn)栽培技術(shù)及利用[J].農(nóng)技服務(wù)，2007，24（8）：94.

[3]王倩.敗醬草的研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2009，15（13）：20-21.

[4]Chengb H.The value of Patrinia villosa Juss[J].JPlant，2002（6）：15.

[5]劉賢銘.敗醬草及其混淆品的鑒別[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2006，17（3）：396.

[6]彭金詠，范國(guó)榮，吳玉田.白花敗醬草黃酮類成分的高速逆流色譜快速制備[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2006，41（13）：977.

[7]戴聰杰，林培慶.白花敗醬草乙醇提取液的抑菌作用及其穩(wěn)定性研究[J].食品與機(jī)械，2011，27（6）：157.

[8]黃儒強(qiáng)，李娘輝，黃科禮，等.山稔子黃酮類提取物抗自由基作用及體內(nèi)抗氧化功能的研究[J].食品科學(xué)，2008，29（9）：588.

[9]祁克宗，王林安.自由基和生物抗氧化系統(tǒng)理論與外科學(xué)的關(guān)系[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，23（2）：171-174.

[10]孟良玉，蘭桃芳，盧佳琨，等.敗醬草中黃酮類化合物的提取及其抗氧化活性[J].食品科學(xué)，2010，31（24）：215.

Antioxidant activities in vivo of the extract from Patrinia

MENG Liang-yu，LU Jia-kun，CAIWen-qian，QU Hong-yan，LIU Jin-feng，LAN Tao-fang，LI Jian-rong*
（College of Chemistry，Chemical Engineering and Food Safety，F(xiàn)ood Safety Key Lab of Liaoning Province，Engineering and Technology Research Center of Food preservation，Processing and Safety Control of Liaoning Province，Bohai University，Jinzhou 121013，China）

Ob jective：Extractive of patrinia were detected for its antioxidant effect in m ice.Methods：D-galactose saline sterile solution was injec ted in shoulder and neck subcutaneous.After that the aging model was manufactured.Producted four dose g roups which were low，med ium，high and top by adding different amounts of patrinia extracted in four g roups of ordinary fodder.Different fodder were fed m ices.After eight weeks，researchers p roduced the test sam p le by getting b lood from the six group m ice after excising eyes，d islocating executed，tissuing sam p ling.Then the MDA content，the GSH-PX and SOD activity in the serum，liver and b rain fissure were measured.At the same time the CAT activity in the liver and serum were measured Results：The role of Patriniace extrac t：Significantly reduced the MDA content in serum and tissues in m ices.Im p roved the activity of SOD，GSH-PX and CAT in m ices.Conc lusion：Patriniace extract had the significant antioxidant activity in vivo.

Patriniae extrative；in vivo；antioxidant

TS201.1

A

1002-0306（2012）22-0372-03

2012－06－01 *通訊聯(lián)系人

孟良玉，（1976-），男，博士，副教授，主要從事食品質(zhì)量與安全控制方面的研究。

遼寧省科技廳博士啟動(dòng)項(xiàng)目（20111146）。