潘曉紅

不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評價

潘曉紅

目的對不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物結(jié)果評價。方法2010年1月至2012年1月診治的178例乙型肝炎患者及同期健康體檢90例人員，采取酶聯(lián)免疫吸附法、電化學(xué)發(fā)光法、時間分辨免疫熒光法進行乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測。結(jié)果對178例乙型肝炎患者、90例健康人員采取酶聯(lián)免疫吸附法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果觀察，在對HbsAg檢測上Kappa系數(shù)0.782，具有極強檢測一致性，HbeAg、抗Hbs、抗Hbc經(jīng)Kappa檢驗為高度檢測一致性;時間分辨免疫熒光法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果觀察，乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗體經(jīng)Kappa檢驗，Kappa系數(shù)均＞0.81具有極強檢測一致性。結(jié)論在對乙型肝炎血清標(biāo)志物進行檢測采取酶聯(lián)免疫吸附法、電化學(xué)發(fā)光法、時間分辨免疫熒光法，具有檢測一致性，不同方法臨床檢測結(jié)果可以進行結(jié)果互認(rèn)。

不同方法學(xué);乙型肝炎血清標(biāo)志物;檢測;結(jié)果評價

乙型肝炎是全球性疾病，全世界有目前有大約3億乙型肝炎病毒攜帶者，我國更是乙型肝炎高發(fā)區(qū)，擁有0.93億乙型肝炎攜帶者［1］，對乙型肝炎診斷目前主要依據(jù)乙肝血清標(biāo)志物檢測來進行診斷，血清標(biāo)志物檢測方法由于受到生產(chǎn)企業(yè)及試劑來源不同，臨床檢測結(jié)果對臨床醫(yī)生和患者進行解讀帶來困難，受到臨床技術(shù)人員的高度重視，我們對采取不同方法學(xué)檢測乙型肝炎血清標(biāo)志物，更加全面的了解不同方法學(xué)對乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測符合情況及相關(guān)性，匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年1月至2012年1月診治的178例乙型肝炎患者，其中男108例，女70例;年齡21～49歲，平均年齡36.5歲;所有病例均符合乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn);并且選取同期健康體檢90例人員。

1.2 檢測方法 所有入選病例晨起空腹抽取肘靜脈血3 ml，經(jīng)離心后留取血清進行乙型肝炎血清標(biāo)志物檢測，方法采取酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)、時間分辨免疫熒光法(TRFIA)。酶聯(lián)免疫吸附法:應(yīng)用PHOMO酶標(biāo)儀(安圖生物公司生產(chǎn))，上?？迫A生物試劑盒;電化學(xué)發(fā)光法:應(yīng)用E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(德國羅氏公司生產(chǎn))及相應(yīng)配套試劑盒時間分辨免疫熒光法:應(yīng)用Anytest時間分辨免疫熒光分析儀(上海新波生產(chǎn))及相應(yīng)配套試劑盒。臨床結(jié)果根據(jù)檢測所配套的試劑盒中的說明書中Cut-off值進行檢測結(jié)果判斷，應(yīng)用夾心法檢測時，檢測陽性為＞Cut-off值，;應(yīng)用競爭法檢測時陽性為＜Cut-off值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 為了能夠了解檢測結(jié)果的一致性，使用Kappa檢驗［2］，根據(jù)Kappa系數(shù)對檢測一致性的程度進行分區(qū)，Kappa系數(shù)＜0為檢測一致性極差;Kappa系數(shù)0～0.2檢測一致性為微弱;Kappa系數(shù)0.21～0.4檢測一致性為弱;Kappa系數(shù)0.41～0.6檢測一致性為中度;Kappa系數(shù)0.61～0.8檢測一致性為高度;Kappa系數(shù)0.81-1.0檢測一致性為極強。

2 結(jié)果

2.1 酶聯(lián)免疫吸附法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果比較 對178例乙型肝炎患者、90例健康人員采取酶聯(lián)免疫吸附法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果比較，具體見表1。

2.2 時間分辨免疫熒光法與電化學(xué)發(fā)光法比較 對178例乙型肝炎患者、90例健康人員采取酶聯(lián)免疫吸附法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果比較，具體見表2。

表1 酶聯(lián)免疫吸附法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果比較

表2 時間分辨免疫熒光法與電化學(xué)發(fā)光法比較

3 討論

我國更是乙型肝炎高發(fā)區(qū)，對乙型肝炎診斷目前主要依據(jù)乙肝血清標(biāo)志物檢測來進行診斷，乙肝血清標(biāo)志物檢測包括［3］乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗體(抗HBs)、乙型肝炎e抗體(抗HBe)、乙型肝炎核心抗體(抗HBc)。

乙肝血清標(biāo)志物檢測常用的方法是［4］時間分辨免疫熒光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗、電化學(xué)發(fā)光法、聚合酶鏈反應(yīng)檢測以及和免疫PCR等檢測方法。其最常用的方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗，敏感性及特異性最佳的檢測方法是電化學(xué)發(fā)光法。

通過對酶聯(lián)免疫吸附法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果觀察，在對HbsAg檢測上Kappa系數(shù)0.782，具有極強檢測一致性，HbeAg、抗Hbs、抗Hbc經(jīng)Kappa檢驗為高度檢測一致性，酶聯(lián)免疫吸附法具有良好的特異性，敏感性稍差，在臨床應(yīng)用中對手術(shù)患者、血站對乙肝血清標(biāo)志物不適合應(yīng)用，仍然能夠滿足當(dāng)前一般的臨床檢測需要，本方法試劑成本低廉，可以在經(jīng)濟狀況較差、人群篩查中應(yīng)用。

通過對時間分辨免疫熒光法與電化學(xué)發(fā)光法檢測結(jié)果觀察，乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗原、乙型肝炎e抗體經(jīng)Kappa檢驗，Kappa系數(shù)均＞0.81具有極強檢測一致性［5］，乙型肝炎表面抗體經(jīng)Kappa檢驗，Kappa系數(shù)0.721為高度檢測一致性。

總之，在對乙型肝炎血清標(biāo)志物進行檢測采取酶聯(lián)免疫吸附法、電化學(xué)發(fā)光法、時間分辨免疫熒光法，具有檢測一致性，不同方法臨床檢測結(jié)果可以進行結(jié)果互認(rèn)。

［1］陳佑明，黃敬，熊符，等.時間分辨熒光免疫分析法和免疫放射分析法檢測HBsAS的對比分析．標(biāo)記免疫分析與臨床，2006，13(1):50-51．

［2］魏來，陶其敏.努力規(guī)范肝臟疾病的免疫學(xué)診斷．中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2003，26(2):69．

［3］廖慧芳.乙型肝炎病毒三種檢測結(jié)果的臨床分析．湖南師范大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2009，6(2):56-57．

［4］趙秀英，陳俊梅，辛永梅，等.不同方法檢測乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物的差異．肝臟，2008，13(4):303-305．

［5］夏邦世.時間分辨免疫熒光技術(shù)檢測HBV血清標(biāo)志物臨床應(yīng)用評價.臨床醫(yī)學(xué)，2006，33(3):6-7．

473000河南省南陽醫(yī)專第一附屬醫(yī)院檢驗科