孫洪德

·實(shí)驗(yàn)研究·

慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激對支氣管哮喘大鼠的影響

孫洪德

目的觀察慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激對支氣管哮喘大鼠哮喘病情的影響。方法通過對哮喘組及實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射卵蛋白，并霧化吸入卵蛋白制備支氣管哮喘模型。在霧化吸入卵蛋白后對實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行連續(xù)28 d的慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激。此后以無創(chuàng)小動物呼吸功能測量儀檢測大鼠呼吸功能、HE染色觀察肺組織病變、并支氣管灌洗液中細(xì)胞數(shù)量及分類。結(jié)果①與正常組比較，哮喘組呼吸功能降低(P＜0.05);與哮喘組比較，哮喘組大鼠呼吸功能進(jìn)一步降低(P＜0.05)。②與正常組比較，哮喘組大鼠支氣管灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞均顯著升高(P＜0.05);與哮喘組比較，哮喘組大鼠支氣管灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞均顯著升高(P＜0.05)。③與哮喘組大鼠比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠支氣管壁上皮細(xì)胞較哮喘組排列更加紊亂，部分結(jié)構(gòu)破壞，白細(xì)胞浸潤較哮喘組更加顯著，肺泡失去正常形態(tài)。結(jié)論慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激可以通過加重哮喘病情，臨床工作中應(yīng)注重對哮喘患者進(jìn)行心理疏導(dǎo)、避免心理應(yīng)激。

支氣管哮喘;慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激;影響;大鼠

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 SD大鼠30只，雄性，體重160～200 g，購自山東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。隨機(jī)分為3組:正常組、哮喘組、實(shí)驗(yàn)組，每組10只。除慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激，大鼠自由攝食，恒溫飼養(yǎng)。

1.2 主要試劑 卵蛋白購自美國Sigma公司。

1.3 模型的制備 哮喘組、哮喘伴發(fā)抑郁行為組，腹腔注射卵蛋白溶液100 mg，1周后重復(fù)注射一次。2周后大鼠接受1%卵蛋白霧化吸入(通過霧化器)，每天一次，每次30 min，連續(xù)3周。霧化吸入OVA后，大鼠繼續(xù)接受28 d慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激刺激，包括禁水24 h，禁食24 h，夾尾3 min，制動2 h，4℃冷水游泳5 min，45℃熱環(huán)境5 min，30 V電壓電擊足底電擊120 s，閃光刺激、晝夜顛倒、間斷光照，噪音干擾2 h，單籠飼養(yǎng)、鼠籠傾斜、潮濕墊料等，每種刺激隨機(jī)使用。

1.4 指標(biāo)檢測

1.4.1 呼吸功能測定 通過小動物呼吸功能測量儀，于對大鼠給予慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激后測量各組大鼠的吸氣阻力、呼氣阻力及肺順應(yīng)性。

1.4.2 支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計數(shù)及分類 處死動物后，分離左肺并進(jìn)行灌洗，每次注入生理鹽水3 ml，連續(xù)灌洗3次，每次沖洗后將液體吸出。取灌洗液離心，于細(xì)胞計數(shù)板觀察細(xì)胞分類并計數(shù)各類白細(xì)胞數(shù)量。

1.4.3 肺組織病理變化 處死動物后，迅速取新鮮左肺1 cm×1 cm×1 cm大小組織塊，置于中性甲醛固定3 d，常規(guī)石蠟包塊并切片，進(jìn)行HE染色，光鏡下觀察各組大鼠的肺組織改變情況。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 通過SPSS 13.0統(tǒng)計軟件，進(jìn)行單因素方差分析，組間差異比較采用q檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計數(shù)及分類 哮喘組大鼠支氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)、嗜酸粒細(xì)胞均顯著高于正常組(P＜0.05);與哮喘組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)、嗜酸粒細(xì)胞均顯著升高(P＜0.05)。見表1。

2.2 各組大鼠呼吸功能情況 與對照組比較，哮喘組吸氣阻力、呼氣阻力顯著增加，肺順應(yīng)性顯著下降，說明哮喘大鼠肺功能較正常大鼠下降。與哮喘組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠吸氣阻力、呼氣阻力進(jìn)一步增加，但是差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);與哮喘組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠肺順應(yīng)性顯著下降，二者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，表明實(shí)驗(yàn)組大鼠肺功能較哮喘組進(jìn)一步下降，見表2。

表1 各組大鼠支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計數(shù)及分類比較(±s)

表1 各組大鼠支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞計數(shù)及分類比較(±s)

注:與對照組比較，△P＜0.05;與哮喘組比較，★P＜0.05

組別 例數(shù) 白細(xì)胞總數(shù)(105/L)嗜酸粒細(xì)胞(105/L)10 38.35±7.13 8.08±1.32哮喘組 10 58.90±8.09△ 16.78±2.43△聯(lián)合治療組 10 80.07±8.86★ 21.80±2.73正常組★

表2 各組大鼠呼吸功能比較(±s)

表2 各組大鼠呼吸功能比較(±s)

注:與對照組比較，△P＜0.05;與哮喘組比較，★P＜0.05

組別 例數(shù) 吸氣阻力 呼氣阻力 肺順應(yīng)性正常組10 2.62±0.25 4.29±0.96 0.34±0.05哮喘組 10 4.89±0.53△ 6.89±1.38△ 0.19±0.03△實(shí)驗(yàn)組 10 5.65±0.61 8.09±1.55 0.13±0.01★

2.3 各組大鼠肺部組織改變 HE染色結(jié)果顯示，正常組大鼠支氣管管腔壁光滑、壁薄，上皮細(xì)胞正常，肺泡結(jié)構(gòu)正常，未見大量白細(xì)胞浸潤。哮喘組大鼠支氣管管壁顯著增厚，上皮細(xì)胞排列紊亂，間質(zhì)增生明顯，支氣管周圍大量白細(xì)胞浸潤，肺泡失去正常形態(tài)。實(shí)驗(yàn)組大鼠支氣管壁上皮細(xì)胞較哮喘組排列更加紊亂，部分結(jié)構(gòu)破壞，白細(xì)胞浸潤較哮喘組更加顯著，肺泡失去正常形態(tài)。見圖1，2，3。

3 討論

支氣管哮喘是一種常見的慢性呼吸道疾病，近年發(fā)病率逐年增加［1，2］?；颊咧夤芗胺闻荽嬖陲@著的炎癥反應(yīng)，肺部大量炎癥細(xì)胞浸潤，支氣管壁增生，肺泡正常結(jié)構(gòu)破壞，患者呼吸功能顯著下降，常伴有呼吸困難發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)哮喘組大鼠肺部炎癥明顯，肺組織結(jié)構(gòu)顯著破壞，呼吸功能下降，說明模型制備成功。

臨床上支氣管哮喘患者病情呈急性發(fā)作與慢性遷延反復(fù)交替出現(xiàn)，患者往往會反復(fù)經(jīng)歷咳嗽、呼吸困難、治療費(fèi)用高昂導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)壓力、治療失敗導(dǎo)致絕望感等，這些都會對患者產(chǎn)生反復(fù)的心理應(yīng)激［3］，而慢性的心理應(yīng)激往往會影響機(jī)體的免疫內(nèi)分泌等功能從而對疾病產(chǎn)生影響。臨床上有報道稱伴有抑郁的支氣管哮喘患者比不伴有抑郁者病情重［4］，而關(guān)于哮喘伴發(fā)抑郁的原因報道不一，有的認(rèn)為是哮喘病程中患者反復(fù)經(jīng)歷的心理應(yīng)激導(dǎo)致抑郁，抑郁再反過來加重哮喘，從而形成惡性循環(huán);而有人認(rèn)為伴發(fā)抑郁與上述心理應(yīng)激無關(guān)。

為探索慢性心理應(yīng)激對支氣管哮喘的影響，我們對部分支氣管大鼠予以了多種輕度慢性不可預(yù)見性應(yīng)激，并檢測了經(jīng)過應(yīng)激后大鼠哮喘病情的改變。結(jié)果顯示，與哮喘組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)、嗜酸粒細(xì)胞均顯著升高，說明經(jīng)歷應(yīng)激后大鼠肺部炎癥加重。肺功能檢測顯示，與哮喘組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠肺順應(yīng)性顯著下降，表明實(shí)驗(yàn)組大鼠肺功能較哮喘組進(jìn)一步下降。同時肺組織HE染色顯示哮喘組大鼠支氣管管壁顯著增厚，上皮細(xì)胞排列紊亂，間質(zhì)增生明顯，支氣管周圍大量白細(xì)胞浸潤，肺泡失去正常形態(tài)。實(shí)驗(yàn)組大鼠支氣管壁上皮細(xì)胞較哮喘組排列更加紊亂，部分結(jié)構(gòu)破壞，白細(xì)胞浸潤較哮喘組更加顯著，肺泡失去正常形態(tài)，說明經(jīng)歷慢性應(yīng)激的哮喘大鼠肺組織破壞更加顯著。

綜上所述，慢性心理應(yīng)激可以加重哮喘大鼠的病情。故臨床上為避免哮喘患者治療失敗、呼吸困難等心理應(yīng)激導(dǎo)致的心理應(yīng)激對哮喘病情的影響，治療過程中，及時的做心理疏導(dǎo)、排除心理應(yīng)激對患者的康復(fù)中有重要意義。

［1］韓巧紅.重癥哮喘患者的臨床護(hù)理體會．中國實(shí)用醫(yī)藥，2012，7(3):230-231．

［2］李瓊，王淑華，馮吉芳.哮喘清合劑聯(lián)合小劑量西藥防治小兒支氣管哮喘發(fā)作的臨床研究．中國實(shí)用醫(yī)藥，2011，6(32):10-11．

［3］杜娟.支氣管哮喘患者的心理狀態(tài)分析及護(hù)理．內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2012，31(1):148-149．

［4］杜淑珍，常曉悅.支氣管哮喘控制程度與抑郁相關(guān)性研究．中華哮喘雜志，2011，5(6):27-29．

262608山東省臨朐縣九山中心衛(wèi)生院

圖1 正常組

圖2 哮喘組

圖3 實(shí)驗(yàn)組