施志順，孟祥松，時 軍

（1.亳州市藥品檢驗所，安徽 亳州236800；2.廣東藥學院中藥學院，廣東 廣州510006）

黨參為常用補益類中藥，味甘、性平，入脾、肺二經(jīng)，具補中益氣、生津和胃之功效，臨床常用于氣虛證患者［1］.近年來，黨參廣泛用于冠心病、高血壓及功能性子宮出血等癥的治療，在保健食品方面亦有較多應(yīng)用［2］.然而，現(xiàn)行的2010年版《中國藥典》只有顯微鑒別和薄層鑒別，缺乏定量的評價方法［3，4］.本文通過比較冷浸法、加熱回流法、索氏回流法和超聲提取法等提取方法，采用HPLC法測定其中黨參炔苷的含量，考察藥材中黨參炔苷的含量，以期確定黨參的提取方法，為黨參藥材的質(zhì)量評價提供參考.

1 儀器和試劑

1.1 儀器 Dionex型高效液相色譜系統(tǒng)（P680型泵，PDA－100型檢測器，ASI－100自動進樣器），Dikma C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm），Sartorius BS110S萬分之一天平（北京賽多利斯天平有限公司），101A－1電熱鼓風烘箱（上海索域）.

1.2 試藥 黨參炔苷對照品（購于本草天工科技有限責任公司，純度＞98%），乙腈（重慶迪馬，色譜純），水為娃哈哈純凈水.黨參藥材購于廣州清平中藥材專業(yè)市場，為甘肅產(chǎn)同一批次的優(yōu)質(zhì)品.

2 方法與結(jié)果

2.1 黨參炔苷測定方法的確定［5］取黨參炔苷對照品0.008 5g，精密稱定，甲醇定容成10mL，即得對照品溶液.以下列色譜條件測定：固定相 Phenomenex Synergi C18柱（4.6 mm×250mm，5μm）；流動相乙腈－水（25∶75）；流速1.0 mL·min－1；檢測波長268nm；進樣量20μL；理論板數(shù)以黨參炔苷計不低于3 000.取黨參炔苷對照品溶液，精密吸取0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01mL，定容成1mL，得425、340、255、170、85、42.5、34、25.5、17、8.5μg·mL－1系列對照品溶液.吸取上述對照品溶液，分別進樣2次，測定峰面積.以對照品質(zhì)量濃度（μg·mL－1）為橫坐標，峰面積A為縱坐標，繪制標準曲線.

回歸方程A＝0.124 1C－0.769 1，r＝0.999 8，表明黨參炔苷在0.008 5～0.425mg·mL－1范圍內(nèi)進樣量與面積呈良好的線性關(guān)系.黨參炔苷對照品與黨參藥材樣品色譜圖見圖1.

2.2 提取方法的選擇 黨參主要含有糖類、氨基酸、皂苷、甾醇及多種無機元素，其中黨參炔苷為專屬性成分.采用冷浸法、回流法、索氏提取及超聲法提取，比較黨參炔苷的含量，優(yōu)選提取方法.

2.2.1 冷浸法 取黨參藥材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1 g，精密稱定，加入甲醇100mL，冷浸24h過夜，濾過，濾液70℃水浴蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm微孔濾膜濾過，即得.

圖1 黨參炔苷測定色譜圖

2.2.2 加熱回流法 取黨參藥材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1g，精密稱定，加入甲醇50mL熱回流2h，濾過，濾渣再加入30mL甲醇熱回流1.5h，合并濾液，甲醇定容至100 mL，70℃水浴蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm微孔濾膜濾過，即得.

2.2.3 索氏提取法 取黨參藥材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1g，精密稱定，用濾紙包好放入索氏提取器，從上端加入甲醇80mL，70℃下恒溫提取約5h直到藥包周圍提取液變?yōu)橥该?，收集好提取液，水浴蒸干，甲醇定容?0mL，蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm濾膜濾過.

2.2.4 超聲提取法 取黨參藥材，60℃烘2h，粉碎成粗粉.取1g，精密稱定，加入甲醇50mL超聲2h，趁熱過濾，收集濾液，放冷補足50mL，精確量取25mL供試品溶液70℃水浴蒸干，最后用甲醇定容至5mL，即得.

2.2.5 不同提取方法的比較 取上述4種供試品溶液，進樣20μL，按2.1方法進行測定，峰面積定量，計算其中黨參炔苷含量，結(jié)果見表1.

表1 不同提取方法黨參炔苷含量（n＝3）

采用加熱回流法提取，測得黨參炔苷含量最高（1.013±0.039）mg·g－1，選擇該法為黨參藥材的提取方法.

2.3 提取方法的確定 取黨參藥材，置于烘箱中60℃烘2 h，粉碎成粗粉（20目）.取1g，精密稱定，加入甲醇50mL熱回流2h，濾過，濾渣再加入30mL甲醇熱回流1.5h，合并濾液，甲醇定容至100mL，70℃水浴蒸干，甲醇定容至10mL，0.45μm微孔濾膜濾過，對同一藥材進行5次連續(xù)提取試驗，結(jié)果熱回流提取工藝黨參炔苷平均含量為1.008mg·g－1，RSD為4.50%.含量測定結(jié)果見表2.

表2 加熱回流提取驗證性試驗（n＝3）

3 討論

3.1 上述4種方法均為藥材含量測定的常用提取方法［6］.采用加熱回流法及索氏提取法，測得黨參炔苷含量最高，采用甲醇加熱回流法提取.

3.2 現(xiàn)行的2010版藥典黨參項下只有顯微鑒別和薄層鑒別，缺乏定量的評價方法.為更好地進行黨參質(zhì)量的評價，建議制定黨參炔苷含量測定方法，提高黨參質(zhì)量標準.

［1］劉恩荔，秦雪梅.黨參研究進展［J］.山西醫(yī)科大學學報，2002，33（6）：567－569.

［2］李黎星，康杰芳.中藥黨參的研究進展［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2009，9（12）：2371－2373.

［3］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版（一部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：264.

［4］賀慶，朱恩圓，王崢濤，等.黨參中黨參炔苷HPLC分析［J］.中國藥學雜志.2005，40（1）：56－58.

［5］時軍，馬方勵，廖華衛(wèi)，等.HPLC法測定不同產(chǎn)地黨參藥材中黨參炔苷的含量［J］.廣東藥學院學報，2011，27（1）：51－53.

［6］陳璐，王天志，楊兵，等.比較和優(yōu)化黨參炔苷的提取工藝［J］.華西藥學雜志，2008，23（4）：454－455.