吳 毅，許 妍，趙 雯，吳鐵榮

（江西省食品藥品檢驗所，江西 南昌330029）

參麥注射液收載于《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第十八冊，制劑由紅參和麥冬兩味藥材及輔料吐溫80組成，具有益氣固脫、養(yǎng)陰生津、生脈之功效.臨床用于治療氣陰兩虛型導(dǎo)致的休克、冠心病、病毒性心肌炎、慢性肺心病、粒細胞減少癥.

由于在參麥注射液中含有大量的糖類成分，主要有果糖、葡萄糖、蔗糖和麥芽糖等.而葡萄糖等糖類經(jīng)過滅菌過程容易脫水反應(yīng)生成5－羥甲基糠醛（5－Hydroxymethyl furfural，簡稱5－HMF）.一方面，藥理研究表明：5－HMF對人體橫紋肌和內(nèi)臟有損害；另一方面，雖然5－HMF本身無色，但由于5－HMF發(fā)生聚合而由聚合物導(dǎo)致變色，且其產(chǎn)生量與葡萄糖顏色的深淺成正相關(guān)性，因此5－HMF的量可顯示產(chǎn)品中葡萄糖的分解程度.在含葡萄糖或其他單糖的制劑中5－HMF常作為一個重要的有關(guān)物質(zhì)加以控制，如《中國藥典》2005版、BP2000版、USP27版和日本藥局方中收載的葡萄糖注射液均采用UV法控制5－HMF的含量，根據(jù)該方法，一般要求5－HMF含量＜2.5μg·mL－1.基于以上原因，我們建立了HPLC法測定參麥注射液中5－HMF的含量，對抽驗的6個生產(chǎn)企業(yè)，190批次樣品進行檢測.

參考《中國藥典》2005年版葡萄糖注射液項下UV法對5－HMF含量測定的要求，按照5－HMF含量＜2.5μg·mL－1作為參麥注射液中HPLC法測定的限度，共檢測190批次樣品，檢出5－HMF含量＞2.5μg·mL－1的批次169批，超出率：88.95%.

1 儀器與試藥

SHIMADZU LC－2010AHT型高效液相色譜儀（島津科技有限公司，日本）.5－羥甲基糠醛（含量＞99%，批號：1415620，Aldrich公司 ）、甲醇 （色譜純，Sigma－aldrich公司）、去離子水（自制），其他試劑均為分析純.

2 色譜條件

色譜柱：Venusil MP C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：甲醇－水（93∶7），流速：1.0mL·min－1；柱溫：30 ℃ ；檢測波長：284nm.

3 方法學考察

3.1 專屬性試驗 按照處方的制備工藝，添加相應(yīng)的輔料，制備缺少紅參和麥冬的樣品，即制備缺少5－HMF的參麥注射液樣品，取樣品原液作為供試品溶液，按照上述色譜條件分析，結(jié)果顯示：陰性無干擾，該方法專屬性強.結(jié)果見圖1～3.

圖1 5－羥甲基糠醛對照品a.5－羥甲基糠醛

圖2 參麥注射液樣品a.5－羥甲基糠醛

圖3 5－羥甲基糠醛陰性樣品

3.2 線性關(guān)系及最低檢出限 精密稱取5－HMF對照品0.514 8g置100mL量瓶中，加甲醇至刻度，作為貯備液，精密量取1.0mL置100mL量瓶，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液.精密吸取上述對照品溶液1、2、4、8、10、20、30、50、100μL，注入液相色譜儀，以峰面積積分值為縱坐標，5－HMF質(zhì)量數(shù)（μg）為橫坐標進行線性回歸，回歸方程為：Y＝5 871.92X－2 874.96，r＝0.999 8.

結(jié)果表明：5－HMF在5.148～514.800ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系.信噪比（S／N）為3時，5－HMF的最低檢出限為0.193 0ng；信噪比為10時，5－HMF的最小定量限為0.386 1ng.

3.3 精密度試驗 取5－HMF對照品10μL，依法連續(xù)測定6次，5－HMF的RSD為0.98%，表明其精密度良好.

3.4 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12h測定，5－HMF峰面積的RSD為0.35%，表明該供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定.

3.5 重復(fù)性試驗 取同一參麥注射液樣品溶液5份，按照確定的色譜條件測定峰面積，外標一點法計算5－HMF含量，求得RSD為0.95%.結(jié)果表明本方法重復(fù)性好，所得試驗結(jié)果準確可靠.

3.6 回收率試驗 精密量取含量為10.367 1μg·mL－1的同一本品5.0mL 6份分別置10mL量瓶中，各加入5－HMF含量為12.972μg·mL－1的對照品溶液4.0mL，加水至刻度，搖勻，按擬定的方法測定峰面積，外標一點法計算5－HMF含量.平均回收率為101.31%，RSD為1.3%.

4 樣品測定

分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，用外標一點法計算，即得.各企業(yè)生產(chǎn)參麥注射液含量測定結(jié)果見表1.

表1 參麥注射液中5－HMF的含量

5－HMF的平均含量不同生產(chǎn)企業(yè)間高低二者間相差7倍；同企業(yè)不同批次間最大相差13.4倍.說明：由于缺少對5－HMF含量的控制，工藝的不穩(wěn)定，造成各個企業(yè)之間存在較大的差異，并且同企業(yè)產(chǎn)品間的差異也很大.

5 討論

各國藥典中一般要求含葡萄糖等糖類的注射液中5－HMF含量＜2.5μg·mL－1，經(jīng)擬定的非標方法檢測，參麥注射液中5－HMF含量遠高于化藥所定標準，超出率超過80%.5－HMF是葡萄糖等單糖化合物在高溫或弱酸等條件下脫水產(chǎn)生的一個醛類化合物，該化合物穩(wěn)定性不好，容易分解成乙酰丙酸和甲酸，或發(fā)生聚合反應(yīng).影響5－HMF產(chǎn)生量的因素有溶液的pH值、滅菌的溫度及時間等.葡萄糖在酸性溶液中相對穩(wěn)定，堿性增加易脫水分解；含葡萄糖的注射液在高溫加熱滅菌時易產(chǎn)生5－HMF，其量的增加與滅菌穩(wěn)定、時間呈正比.參麥注射液在提取時由于工藝的不同、含醇量的波動，將導(dǎo)致提取液中糖類成分的差異.另一方面，在中藥提取后的放置過程中，皂苷類成分受熱后苷鍵斷裂，導(dǎo)致糖類成分的增加都將使注射液中含有的單糖含量顯著增大，提供了5－HMF產(chǎn)生的“溫床”.另外還有一個重要原因，某些生產(chǎn)企業(yè)利用添加葡萄糖來調(diào)節(jié)注射液的滲透壓導(dǎo)致參麥注射液中葡萄糖含量的大大提高，也為5－HMF的產(chǎn)生提供了可能.