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        高效液相色譜法測定保健食品中洛伐它汀的含量

        2012-10-18 01:10:46黑龍江王守萃
        職業(yè)技術(shù) 2012年11期
        關(guān)鍵詞:汀的回收率甲醇

        黑龍江 王守萃

        洛伐它汀是八十年代上市的新型調(diào)整血脂藥,由于其獨特的療效,被譽為治療心血管系統(tǒng)疾病的里程碑,深受廣大患者的歡迎。洛伐他汀最適于治療高膽固醇血癥,尤其伴有LDL增高患者(型),是首選的調(diào)脂藥?;旌闲透咧Y也可用,也可用于腎病或糖尿病伴有高膽固醇血癥患者。對顯著增高的高甘油三酯血癥和乳糜微粒血癥效果較差。與膽汁酸螯合劑合用,可增強降膽固醇效應(yīng)。本實驗采用高效液相色譜法來測定保健食品中洛伐它汀的含量。

        一、實驗部分

        (一)儀器、試劑及色譜條件

        1.高效液相色譜,帶可變波長紫外檢測器;

        色譜柱:C18柱,4.6mm×250mm,5μm,柱溫:30℃。

        檢測器:紫外檢測器,檢測波長238nm。

        流動相:甲醇(色譜純):水=80:20。

        流速:1.0mL/min。

        靈敏度:0.002 AUFS。

        進樣量:10μL。

        2.電子天平(0.0001g);

        3.超聲振蕩器;

        4.洛伐它汀標準儲備液:精密稱取0.0100 g洛伐它汀標準物質(zhì)用甲醇溶解定容至10mL,此溶液每毫升含洛伐它汀1.0mg,該溶液在(0℃~4℃)條件下保存期為兩個月。

        洛伐它汀標準使用液:吸取洛伐它汀標準儲備液5mL于50mL容量瓶,加甲醇至刻度,然后分別吸取此液0.00mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL于10mL容量瓶中,各加甲醇至刻度,即得洛伐它汀0.00μg/mL、5.00μg/mL、10.00μg/mL、25.00μg/mL、50.00μg/mL的標準液系列。

        (二)測定方法

        1.標準曲線法

        (1)標準曲線的繪制

        分別進樣含洛伐它汀 0μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL的標準液各10μL,進行HPLC分析,然后以峰面積為縱坐標,以洛伐它汀的含量為橫坐標,繪制標準曲線。(圖1)。

        圖1 洛伐它汀標準曲線

        (2)樣品測定方法

        取樣品10 g,研磨,混勻,備用。

        取上述樣品1.000 g放入10mL的具塞比色管中,加入甲醇至10mL刻度線,超聲提取5min,靜置10min,過濾膜,待測。

        吸取處理后的試樣溶液10μL進行HPLC分析,測定其峰面積,從標準曲線查得測定液中洛伐它汀的含量。

        (3)結(jié)果計算

        樣品中洛伐它汀含量(mg/kg)按式(1)計算:

        式中:

        X—樣品中洛伐它汀的殘留量,單位為毫克每千克(mg/kg);

        C—從標準曲線上查得測定液中洛伐它汀的含量,單位為毫克每升(mg/L);

        V—樣品定容體積,單位為毫升(mL);

        m—試樣質(zhì)量,單位為克(g)。

        二、實驗結(jié)果和討論

        (一)方法線性考察

        將標準系列進樣,以峰面積為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線,計算其相關(guān)系數(shù)r=0.9999。說明本方法具有良好的線性相關(guān)性。數(shù)據(jù)見表1。

        表1 標準系列數(shù)據(jù)一覽表

        (二)方法精密度測量

        濃度為11.6mg/l的洛伐它汀溶液平行測定6次,求出其標準偏差和變異系數(shù),結(jié)果見表2,其標準偏差為6324.27,變異系數(shù)為2.22%。說明本方法有較好的測量精度。

        表2 平行測定結(jié)果一覽表

        (三)方法回收率

        從實驗可知選用空白樣品進行添加洛伐它汀回收率試驗。不同添加水平回收率分別為86.34%-93.59%,表中回收率數(shù)值為三次平行測定結(jié)果的平均值,洛伐它汀在空白試樣中的回收率如下表3。

        其中回收率計算公式:

        式中:B———方法回收率(%);

        C實測———通過實驗測得的濃度;

        C添加———添加的洛伐它汀的濃度。

        表3 洛伐它汀在保健品中的回收率

        三、結(jié)論

        (一)以高效液相色譜法測定保健食品中洛伐它汀含量,準確度較高。

        (二)本方法線性相關(guān)性r=0.9999,變異系數(shù)為2.22%,回收率達86%以上。

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