楊 丹 張麗艷 羅 君 楊玉琴 李 健

1.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心，貴州 貴陽(yáng) 550002;2.貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，貴州 貴陽(yáng) 550002

南板藍(lán)根為爵床科Acanthaceae馬藍(lán)屬植物馬藍(lán)Baphicacan thus cusia(Nees)Bremek.的干燥根莖及根［1]。收載于2010版《中國(guó)藥典》，南板藍(lán)根主產(chǎn)于兩廣地區(qū)、貴州及云南等地［2]。南板藍(lán)根為黔產(chǎn)道地藥材，其性寒、味苦，歸心、胃經(jīng)，具有清熱解毒、涼血的功效，用于溫病發(fā)斑、丹毒、流感、流腦等疾病。目前《中國(guó)藥典》僅采用性狀和理化鑒別對(duì)南板藍(lán)根進(jìn)行質(zhì)量控制。南板藍(lán)根中的核苷類成分通過(guò)參與并干擾細(xì)菌和病毒的基因表達(dá)過(guò)程，從而起到一定的抗病毒作用［3]。因此，對(duì)南板藍(lán)根中腺苷 (A-denosine)的含量進(jìn)行研究就顯得尤為重要。目前，尚未見采用HPLC法對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定的報(bào)道。故本文對(duì)貴州不同產(chǎn)地的南板藍(lán)根，進(jìn)行了腺苷的含量測(cè)定，并進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)與對(duì)比研究。進(jìn)一步闡明南板藍(lán)根的最佳產(chǎn)區(qū)與道地性，將有利于南板藍(lán)根藥材的標(biāo)準(zhǔn)化種植與質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

島津LC-20AT高效液相色譜儀 (日本)，超聲波清洗器為天津恒奧科技公司，型號(hào)：HS10260D。甲醇為色譜純(天津市科密歐化化學(xué)試劑有限公司)，水為純凈水，其他試劑均為分析純。腺苷對(duì)照品 (批號(hào)：879-200001)，購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所。

南板藍(lán)根藥材均自采集，經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院魏升華副教授鑒定為爵床科植物馬藍(lán)Baphicacant huscusia(Nees)Bremek的干燥根莖及根。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件［4]色譜柱為Agilent ZORBAX EclipseXDBC18(250mm×4.6mm，5μm);流動(dòng)相甲醇-水 (8：92);流速1mL·min-1;柱溫30℃;檢測(cè)波長(zhǎng)260nm;進(jìn)樣體積10μL。色譜圖見圖1。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取腺苷對(duì)照品適量，置25mL量瓶中，用10%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1mL含0.2892mg的溶液，精密吸取1.0mL置50mL量瓶中，用10%甲醇定容至刻度，即得每1mL含腺苷0.005784mg的溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取南板藍(lán)根粉末 (過(guò)80目篩)0.5g，精密稱定，置25mL容量瓶中，精密加入30%甲醇20mL，超聲提取30分鐘，取出，放冷，用30%甲醇定容至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液15mL，置蒸發(fā)皿中，揮去溶劑，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，濾過(guò)，即得。

2.4 供試品溶液提取方法的考察

2.4.1 提取溶劑的選擇 取同一批次南板藍(lán)根粉末0.5g，精密稱定，置25mL容量瓶中，精密加入30%甲醇、60%甲醇、甲醇、30%乙醇、60%乙醇、無(wú)水乙醇25mL，稱定重量，超聲提取10分鐘，取出，放冷，用溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液15mL，置蒸發(fā)皿中，揮去溶劑，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，濾過(guò)，即得。結(jié)果見表1。

表1 不同溶劑對(duì)南板藍(lán)根中腺苷提取效率的影響 (n=2)

2.4.2 提取方式及時(shí)間的考察 分別精密稱取相同批次的南板藍(lán)根藥材粉末0.5 g，分別精密加入30%甲醇25mL，稱定重量，分別超聲提取10，20，30 min，或于水浴上熱回流1，2，3 h，提取結(jié)束后，加30%甲醇補(bǔ)足重量，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液15mL，置蒸發(fā)皿中，揮去溶劑，用30%甲醇定容至2 mL容量瓶中，濾過(guò)，即得。腺苷的提取量隨超聲提取時(shí)間增加而增多，但回流提取3 h卻明顯低于回流2 h，超聲提取腺苷的效率明顯高于回流提取法。見表2。

表2 加熱回流和超聲提取對(duì)板藍(lán)根中腺苷提取效率的影響

2.5 含量測(cè)定 取黔產(chǎn)不同產(chǎn)地、不同采收期、取7月份藥材不同初加工方法及不同藥用部位的南板藍(lán)根藥材粉末，按2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液，進(jìn)行色譜分析，記錄腺苷的峰面積，計(jì)算含量，結(jié)果見表2，表3。

表3 南板藍(lán)根不同產(chǎn)地腺苷的測(cè)定結(jié)果 (n=3)

3 討論

3.1 本研究測(cè)定了9批黔產(chǎn)不同產(chǎn)地南板藍(lán)根藥材中腺苷的含量。由表2可知，4號(hào)和5號(hào)臺(tái)江產(chǎn)的南板藍(lán)根藥材中腺苷的含量最高，其余產(chǎn)地的南板藍(lán)根的含量均較低，說(shuō)明腺苷的含量的高低與地域有一定的關(guān)系。關(guān)嶺產(chǎn)地的2個(gè)批次的藥材腺苷的含量，1號(hào)海拔高于2號(hào)，說(shuō)明南板藍(lán)根的質(zhì)量除地域因素以外，還與其他因素 (海拔、濕度等)密切相關(guān)。

3.2 提取溶劑及方法的選擇 通過(guò)查閱文獻(xiàn)［5]，對(duì)不同比例的溶劑以及提取方法進(jìn)行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)水溶性的腺苷在30%甲醇提取的條件下含量最高。而且超聲提取含量高于回流，故選擇超聲，即節(jié)約了時(shí)間也簡(jiǎn)化了提取工藝。方法學(xué)考察另見文。

3.3 南板藍(lán)根屬于常用中藥，用量較大，其中4號(hào)臺(tái)江產(chǎn)的南板藍(lán)根在9批當(dāng)中含量最高，現(xiàn)在南板藍(lán)根主要為栽培品，由于野生品不多。因此，我們應(yīng)對(duì)其栽培情況做進(jìn)一步的研究與調(diào)查，確定其種源與栽培條件，建立其種植基地，確保質(zhì)量的穩(wěn)定可控。

3.4 在全省各地南板藍(lán)根種質(zhì)資源調(diào)查過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)各地的農(nóng)民只把南板藍(lán)根當(dāng)作染料進(jìn)行栽種，不知道南板藍(lán)根是藥材。因此，為了加強(qiáng)其推廣應(yīng)用，應(yīng)增加各地農(nóng)民對(duì)南板藍(lán)根的藥用認(rèn)識(shí)，幫助農(nóng)民增收致富。

［1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［S].一部，北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010.

［2]苗明三，李振國(guó).現(xiàn)代實(shí)用中藥質(zhì)量控制技術(shù)［M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：882.

［3]竇希波，于曉蕾，王穎.RP—HPLC法測(cè)定板藍(lán)根中腺苷的含量［J].齊魯藥事，2004，23(7)：28.

［4]譚麗萍，譚小勇.HPLC測(cè)定海麻雀中腺苷的含量［J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(5)：107-109.