唐 俊 張?jiān)葡?葛海濤

江蘇黃河藥業(yè)股份有限公司，江蘇阜寧 224400

頂空進(jìn)樣-毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定伊潘立酮原料藥中的溶劑殘留

唐 俊 張?jiān)葡?葛海濤

江蘇黃河藥業(yè)股份有限公司，江蘇阜寧 224400

目的建立測(cè)定伊潘立酮原料藥有機(jī)殘留溶劑的頂空氣相色譜法。方法 采用頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定，色譜柱為DB-FFAP石英毛細(xì)管色譜柱（25 m×320μm×3μm）。氮?dú)鉃檩d氣，測(cè)定伊潘立酮原料藥中丙酮、乙醇與石油醚的殘留量。 結(jié)果 3種溶劑完全分離，在所考察的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。伊潘立酮原料藥中丙酮和石油醚的殘留量的平均值分別為0.0371%、0.0291%，未檢出乙醇。 結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確，適用于伊潘立酮原料藥中有機(jī)殘留溶劑的測(cè)定。

伊潘立酮；溶劑殘留；頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法

伊潘立酮（IIoperidone)是一種口服新型非典型抗精神病藥物[1]，用于治療精神分裂癥，對(duì)減輕精神分裂患者的陽(yáng)性癥狀（如幻覺(jué)、妄想、思維紊亂、敵視、懷疑）和陰性癥狀（如反應(yīng)遲鈍、情緒淡漠、社交淡漠、少語(yǔ)）均有明顯效果。該藥于2009年5月6日在美國(guó)首次上市，其獲準(zhǔn)上市標(biāo)志著對(duì)許多現(xiàn)有藥物治療僅部分有效的精神分裂癥患者多了新的治療選擇。伊潘立酮在生產(chǎn)制備工藝中使用了有機(jī)溶劑乙醇、丙酮以及石油醚，上述溶劑可對(duì)人體產(chǎn)生危害，因此必須控制其在產(chǎn)品中的殘留量[2]。目前尚未見(jiàn)到關(guān)于伊潘立酮的溶劑殘留檢測(cè)方法的研究和報(bào)道。本研究參照ICH頒布的殘留溶劑研究指導(dǎo)原則及《藥品注冊(cè)管理辦法》中的有關(guān)技術(shù)，建立頂空進(jìn)樣毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定伊潘立酮原料藥中3種有機(jī)溶劑殘留的檢查方法，并對(duì)其進(jìn)行考察。

1 儀器與試藥

HP6890氣相色譜儀，HP7694頂空進(jìn)樣器，Chemstation工作站。乙醇、石油醚及二甲基甲酰胺（DMF）為色譜純，丙酮為分析純。伊潘立酮原料藥為相關(guān)藥業(yè)公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：DB-FFAP石英毛細(xì)管色譜柱（25 m×320μm×3μm）。柱溫：程序升溫，初始溫度40℃，保持5 min，每分鐘20℃升至180℃，保持 3 min；載氣：氮?dú)猓∟2）：流速 :1.0 mL/min，進(jìn)樣口溫度：200℃；檢測(cè)器（FID）溫度：250 ℃；頂空進(jìn)樣器加熱參數(shù)：平衡溫度為80 ℃，轉(zhuǎn)移管溫度為90 ℃；平衡時(shí)間為30 min，進(jìn)樣時(shí)間為1 min。

2.2 溶液的配制

2.2.1 混合對(duì)照品貯備溶液制備 精密稱取乙醇、丙酮及石油醚（60～90℃）適量，置于100 mL容量瓶中，加二甲基甲酰胺稀釋至刻度，配制成每毫升含99.2μg乙醇、102.8μg丙酮和101.9μg石油醚的對(duì)照品貯備溶液[3]。準(zhǔn)確量取5 mL對(duì)照品溶液置于頂空瓶中，密封待測(cè)。

2.2.2 供試品溶液 準(zhǔn)確稱取伊潘立酮原料藥0.1 g于20 mL頂空瓶中；準(zhǔn)確量取5 mL二甲基甲酰胺并溶解樣品，密封，作為供試品溶液待測(cè)。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn) 取混合對(duì)照品貯備溶液2 mL至頂空瓶中，90℃加熱30 min后，頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖。見(jiàn)圖1。結(jié)果各組分的分離度均＞2.0，柱效＞5 000，量取二甲基甲酰胺（DMF）2.0 mL，頂空進(jìn)樣。結(jié)果表明空白對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。見(jiàn)圖2。

圖1 混合對(duì)照品貯備溶液色譜圖

圖2 溶劑DMF色譜圖

2.3.2 線性試驗(yàn) 精密量取混合對(duì)照品溶液0.1、0.5、1.0、2.5和5.0 mL分別置于10 mL量瓶中，加二甲基甲酰胺至刻度。量取上述溶液及對(duì)照品溶液2.0 mL，分別置頂空瓶中，加蓋，加熱后頂空進(jìn)樣。按上述色譜條件進(jìn)行分析并記錄峰面積。以峰面積Y為縱坐標(biāo)，濃度X（mg/mL）為橫坐標(biāo)，建立回歸線性方程。見(jiàn)表1。

表1 回歸方程與線性范圍（n=6）

2.3.3 最低檢測(cè)限 精密量取混合對(duì)照品溶液適量，加二甲基甲酰胺適當(dāng)稀釋后，精密量取2.0 mL，頂空進(jìn)樣，直到峰高約為基線噪聲的2～5倍之間，得最低檢出濃度，丙酮為0.27×10-6，乙醇為 0.5×10-6，石油醚為 0.34×10-6[4]。

2.3.4 精密度 精密量取混合對(duì)照品溶液5.0 mL，置100 mL量瓶中，加入DMF稀釋至刻度，搖勻。分別置頂空瓶中，加蓋，加熱后頂空進(jìn)樣。按上述色譜條件進(jìn)行分析并記錄峰面積。計(jì)算得各溶劑峰面積的RSD（n=6）分別為1.7%、1.9%、3.1%。

2.3.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取伊潘立酮原料藥（20110301）6份，按照供試品溶液配制的規(guī)定，配制供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法分別計(jì)算各有機(jī)溶劑殘留量。結(jié)果乙醇在該批樣品中未檢出，丙酮平均含量0.035 9%（RSD=1.61%）,石油醚平均含量0.029%（RSD=2.93%）。

2.3.6 加樣回收率 精密量取混合對(duì)照品儲(chǔ)備液8.0、10.0、12.0 mL分別置100 mL量瓶中，加DMF稀釋至刻度，制得相當(dāng)于檢查限度80%、100%、120%對(duì)照品溶液3份。取供試品（已知溶劑含量）0.2 g，精密稱定，共9份，置20 mL頂空瓶中，分別精密加入上述3種濃度的對(duì)照品溶液2 mL（各3份，n=9），密封，振搖溶解[5]，同法進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖。由表2的結(jié)果可以看出，丙酮、乙醇以及石油醚在各種濃度下的回收率均在90%～110%之間，具有較高的準(zhǔn)確性。

表2 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.3.7 樣品測(cè)定 取混合對(duì)照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，取平均值作為測(cè)定結(jié)果。三批樣品結(jié)果見(jiàn)表3。從結(jié)果來(lái)看，伊潘立酮中殘留溶劑主要是丙酮和石油醚。

表3 樣品測(cè)定結(jié)果（%，n=5）

3 討論

伊潘立酮原料藥幾乎不溶于水，所以選擇二甲基甲酰胺為樣品的溶解介質(zhì)，其沸點(diǎn)較該原料藥中含有的有機(jī)溶劑要高，因此在本研究建立的色譜條件下，二甲基甲酰胺在所有待測(cè)組分之后出峰，不干擾樣品的測(cè)定。

伊潘立酮原料藥中3種殘留溶劑均為ICH中規(guī)定的應(yīng)控制溶劑，都屬于較低沸點(diǎn)、揮發(fā)性較高的有機(jī)溶劑，且蒸汽壓較高，因此適合應(yīng)用進(jìn)行分析定量，完全可以用同一個(gè)色譜系統(tǒng)來(lái)同時(shí)定量，而且該頂空進(jìn)樣的進(jìn)樣方式不僅可以減少溶解樣品所需的溶劑，還能夠很大程度降低樣品本身對(duì)色譜系統(tǒng)帶來(lái)的干擾和污染。

本研究方法表明，對(duì)丙酮、乙醇以及石油醚的檢測(cè)具有較高的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確性，方法丙酮、乙醇以及石油醚的保留時(shí)間分別為2.1、4.2、6、6.8及7.3 min，整個(gè)分析過(guò)程在10 min內(nèi)完成，方法快速簡(jiǎn)便。本方法的建立進(jìn)一步為伊潘立酮的質(zhì)量控制和安全使用提供科學(xué)依據(jù)，具有非常重要的意義。

[1]徐勤耀，任白燕，楊琍蘋(píng)，等.伊潘立酮的合成[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2011，42（2）：88-89．

[2]王翰華，王向軍，曾蘇，等.頂空毛細(xì)管氣相法測(cè)定雞肝散提取物中有機(jī)溶劑殘留量 [J].藥物分析雜志，2008，28（2）：267-270．

[3]劉雪峰，衷紅梅，席志芳，等.頂空氣相色譜法測(cè)定紅霉素原料藥中的殘留溶劑 [J].科學(xué)技術(shù)與工程，2010，28（10）：7066-7069．

[4]段東紅，康玉英，劉世斌．毛細(xì)管氣相色譜法檢測(cè)多潘立酮中的殘留溶劑[J].藥物分析雜志，2006，13（4）：541-542．

[5]祝波，趙魯青，陳安珍，等.頂空采樣-毛細(xì)管氣相色譜法分析格列美脲原料藥中的溶劑殘留 [J].色譜，2009，27（6）：755-759．

Determination of residue organic solvent in crude drug of IIoperidone by headspace-capillary gas chromatography

TANG Jun ZHANG Yunxia GE Haitao
Jiangsu Huanghe Medicine Co.,Ltd.,Fu'ning 224400,China

Objective To determin organic solvent residual volume in IIoperidone raw material by headspace gas chromatography.Methods The residual organic solvents including acetone, ethanol and petroleumether were quantitatively determined by headspace gas chromatography method.A column DB-FFAP(25 m×320μm×3μm)was adopted.N2 was the carrier gas.Results Three residual organic solvents were completely separated.The residues of solvents in IIoperidone were determined as follow,acetone was 0.0371% and petroleumether was 0.0291%,ethanol was not determined.Conclusion The method is simple,sensitive,accurate and be used for the quality control of IIoperidone.

IIoperidone;Residual organic solvent;Headspace gas chromatorgraphy

R927.2

B

2095-0616（2012）03-154-02

2011-12-05）