王珍添,袁玉虹,何天友,陳凌艷,榮俊冬,鄭郁善
(1.福建農(nóng)林大學(xué)園林學(xué)院,福建 福州 350002;2.福建林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院資源環(huán)境系,福建 南平 353000;3.福建農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院,福建 福州 350002)
短葶山麥冬[Liriope muscari(Desne.)Bailey],又名福建麥冬,屬于百合科沿階草族山麥冬屬[1]多年生常綠宿根草本植物[2]。短葶山麥冬是一種很好的園林素材,播種苗培育1年即可作綠化材料[3]。在園林上常用作林下地被,還可用以叢植或配置假山石,也宜作花壇、花境、樹壇、花徑的鑲邊材料,亦可盆栽綠化[2]。同時(shí),短葶山麥冬也是一種重要的中藥植物資源,其根狀莖粗短,生有許多長(zhǎng)而細(xì)的須根,其中局部膨大成連珠狀或紡錘形的肉質(zhì)小塊根,可入藥,即為藥用的麥冬[4]。短葶山麥冬的干燥塊根具有生津潤(rùn)肺、養(yǎng)陰清熱的功能,用于治療肺燥干咳、虛勞咳嗽、津傷口渴、心煩失眠、腸燥便秘等病癥。研究發(fā)現(xiàn),在心血管、免疫系統(tǒng)方面也有較好的作用[1]。由此可見,短葶山麥冬是典型的園林綠化植物和藥用植物的有機(jī)結(jié)合。
目前國(guó)內(nèi)對(duì)短葶山麥冬的研究主要包括最佳采收期[5]、吸肥規(guī)律[6]、套種措施對(duì)其生境及生理特性的影響[7]等。種子休眠會(huì)大大降低種子萌發(fā)率,因此打破休眠十分重要。種子休眠的原因和破除方法多樣[8],其中激素處理是極為常見的一種。有研究表明GA3有打破種子休眠,促進(jìn)種子發(fā)芽的作用[9-12]。目前關(guān)于GA3和浸種溫度對(duì)短葶山麥冬種子發(fā)芽率影響的研究尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)旨在找出最佳的浸種溫度和GA3濃度,用以指導(dǎo)生產(chǎn)。
試驗(yàn)所用短葶山麥冬種子為2009年采自福建省泉州市東南中藥材種植有限公司試驗(yàn)種植區(qū)。供試藥劑為GA3。
采用 L8(41×24)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)短葶山麥冬種子進(jìn)行浸種處理(表1),以常規(guī)發(fā)芽試驗(yàn)(無(wú)激素處理、40℃浸種24 h)為對(duì)照。試驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù),每個(gè)處理50粒種子。
表1 L8(41×24)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)Table1 The L8(41×24)orthogonal design
1.3.1 溶液配制 分別配制 100、500、1000、1500 mg·L-1GA3,加一小滴 1 mol·L-1NaOH 溶解,并用蒸餾水定容至250 mL。
1.3.2 浸種處理 開啟兩臺(tái)恒溫水浴鍋,分別設(shè)定至60、50℃。然后根據(jù)所設(shè)計(jì)的試驗(yàn)方案進(jìn)行正交試驗(yàn)處理。
1.3.3 GA3處理 分別浸種8、12 h;浸種后用蒸餾水沖洗。
1.3.4 種子的置床 將經(jīng)過(guò)消毒、浸種后的種子,用清水沖洗2-3次后,再用已消毒的鑷子將種子均勻整齊地壓入沙土的表層,并編號(hào)。
將培養(yǎng)材料置于25℃、相對(duì)濕度70%的恒溫培養(yǎng)箱中,24 h光照下培養(yǎng)60 d。每3天檢測(cè)樣品及其水分、通氣、溫度、光照條件。輕微發(fā)霉的種??梢話鲇们逅疀_洗后放回原發(fā)芽床;發(fā)霉種粒較多的要及時(shí)更換發(fā)芽床或發(fā)芽容器。
短葶山麥冬種子在培養(yǎng)皿中發(fā)芽時(shí)間較短,胚根露出即為發(fā)芽。在試驗(yàn)第20天開始記錄發(fā)芽數(shù)。用DPS 7.05統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和極差分析。
從表2可以看出,經(jīng)過(guò)浸種處理的短葶山麥冬種子平均發(fā)芽率約52%,高于對(duì)照種子的平均發(fā)芽率(48%),說(shuō)明浸種處理有利于提高發(fā)芽率。同時(shí),不同浸種方式對(duì)短葶山麥冬種子發(fā)芽率的影響不同,處理2、3、6、7短葶山麥冬種子的發(fā)芽率均比對(duì)照處理低很多,最低僅23%,可能由于浸種溫度過(guò)高導(dǎo)致種子萌發(fā)的相關(guān)酶酶活性降低或失活。處理1、4、5、8發(fā)芽率有明顯的提高,比對(duì)照種子發(fā)芽率提高了12% -32%左右。其中處理5效果最好,即采用1000 mg·L-1的GA3浸泡8 h,然后再50℃浸種30 min,其發(fā)芽率達(dá)到80%。
為了驗(yàn)證以上試驗(yàn)結(jié)果,找出影響短葶山麥冬種子發(fā)芽的主要因素和最優(yōu)組合,對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行極差分析(表3)。從表3可見,浸種溫度對(duì)短葶山麥冬種子發(fā)芽影響最大,極差(R值)達(dá)到了33.50;GA3影響次之,R值達(dá)到了21.00;GA3處理時(shí)間的影響較小,R值為2.50;而浸種時(shí)間對(duì)其影響最小,R值僅0.50。再?gòu)膯我蜃泳捣治霰砻鳎?0℃的浸種溫度對(duì)短葶山麥冬種子發(fā)芽影響最大,均值達(dá)到了69.00;GA3為1000 mg·L-1時(shí)對(duì)其發(fā)芽影響次之,均值為62.50;同時(shí)GA3處理8 h比12 h更有利于其發(fā)芽;雖然浸種時(shí)間對(duì)其發(fā)芽影響不大,但15 min的浸種時(shí)間比30 min的均值高一點(diǎn)。綜上可知,短葶山麥冬種子發(fā)芽試驗(yàn)的最佳處理方法為:1000 mg·L-1GA3浸種8 h,再在50℃溫水浸泡15 min。由于浸種時(shí)間對(duì)發(fā)芽率影響不大,所以在最佳處理方法下,短葶山麥冬種子的發(fā)芽率應(yīng)也在80%左右。
表2 不同浸種處理的短葶山麥冬種子發(fā)芽率Table2 Germination rates of L.muscari seeds in different soaking treatments
表3 短葶山麥冬種子發(fā)芽率的極差分析Table3 Range analysis of germination rates of L.muscari seeds
方差分析(表4)表明,4個(gè)因素對(duì)短葶山麥冬種子發(fā)芽的影響程度如下:浸種溫度的影響達(dá)到了極顯著水平;GA3的影響達(dá)到了顯著水平;GA3處理時(shí)間和浸種時(shí)間的影響不顯著,二者的P值都大于0.05。從方差分析結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果可以看出,處理2、3、6、7均采用了60℃水浴浸種,發(fā)芽率都很低,均低于平均發(fā)芽率。由此可見,在短葶山麥冬種子發(fā)芽試驗(yàn)中,浸種溫度對(duì)種子萌發(fā)起著至關(guān)重要的作用,溫度過(guò)高則抑制種子的萌發(fā),應(yīng)該重視浸種溫度的控制。其次,適宜濃度的GA3對(duì)種子萌發(fā)也起了一定的促進(jìn)作用。
表4 短葶山麥冬種子的發(fā)芽率的方差分析Table4 Variance analysis of germination rates of L.muscari seeds
有關(guān)GA3溶液浸種能促進(jìn)種子內(nèi)部生理生化變化,并部分解除種子休眠的報(bào)道較多[9-12],但對(duì)作用機(jī)理有不同的解釋。Khan[13]認(rèn)為,脫落酸(ABA)是普遍存在于種皮、胚或胚乳內(nèi)的抑制物質(zhì),而GA3與細(xì)胞分裂素(CTK)則能促進(jìn)種子萌發(fā),GA3缺乏可導(dǎo)致種子休眠,在該3個(gè)因子中GA3對(duì)種子萌發(fā)起主要調(diào)節(jié)作用。也有研究顯示,GA3溶液處理可促進(jìn)種子提早發(fā)芽,其原因可能是在GA3的誘導(dǎo)下,種子中的水解酶(如α2淀粉酶、蛋白酶、核糖核酸酶、脂肪酶等)被激活,促進(jìn)核酸和蛋白質(zhì)合成,進(jìn)而促進(jìn)種子發(fā)芽[14]。本試驗(yàn)表明,適宜的GA3濃度對(duì)短葶山麥冬種子萌發(fā)起到一定的促進(jìn)作用,但是濃度過(guò)低(100 mg·L-1)或過(guò)高(1500 mg·L-1)則產(chǎn)生抑制作用。由此可見,GA3對(duì)植物種子的發(fā)芽不一定都起到促進(jìn)作用,GA3濃度不適宜則抑制。就本試驗(yàn)而言,1000 mg·L-1GA3對(duì)短葶山麥冬種子萌發(fā)起促進(jìn)作用。
溫度是種子萌發(fā)的必要條件之一。種子萌發(fā)伴隨的一系列內(nèi)部變化都要在酶的作用下進(jìn)行,而酶的作用需要適宜的溫度,高于或低于最適宜的溫度,種子萌發(fā)都會(huì)受到影響[15]。這與張如蓮等[16]的報(bào)道相似。本試驗(yàn)也驗(yàn)證了這一點(diǎn)。本試驗(yàn)表明,浸種溫度50℃對(duì)短葶山麥冬種子萌發(fā)效果最好,同時(shí)結(jié)合對(duì)照試驗(yàn)的浸種溫度來(lái)看,浸種溫度高于或低于50℃都不利于其萌發(fā)。
本試驗(yàn)表明,浸種溫度和GA3兩個(gè)因素是影響短葶山麥冬種子萌發(fā)的主要因子,發(fā)芽率高低基本取決于這兩個(gè)因子。浸種溫度過(guò)高則種子的發(fā)芽率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于平均發(fā)芽率。本試驗(yàn)中,處理5(1000 mg·L-1GA3浸種8 h,再在50℃溫水浸泡30 min)的發(fā)芽率最高,但由于浸種15 min的均值比30 min的均值高一點(diǎn),所以最佳的處理組合為:1000 mg·L-1GA3浸種8 h,再在50℃溫水浸泡15 min。該組合有利于種子的萌發(fā),可以大大提高發(fā)芽率。
本試驗(yàn)得出的最佳處理方法僅對(duì)4個(gè)因素進(jìn)行考慮和驗(yàn)證,對(duì)于常規(guī)試驗(yàn)加上本試驗(yàn)結(jié)論的綜合處理會(huì)不會(huì)有更好的效果,還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。
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