林麗文，李 山，呂 慧，黃 珊，高 勇，譚愛花，楊曉波，秦 雪△，莫曾南

（廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院：1.臨床醫(yī)學(xué)實驗部；2.泌尿外科，南寧 530021；廣西醫(yī)科大學(xué)：3.基因組與個性化醫(yī)學(xué)研究中心；4.公共衛(wèi)生學(xué)院，南寧 530021）

癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）是首先從結(jié)腸癌患者的血清中發(fā)現(xiàn)的一種糖蛋白，在健康胎兒3～6個月的血清中也可以檢測到。在多種腫瘤，特別是消化系統(tǒng)腫瘤患者的血清中可以檢測到CEA水平的升高，是臨床上常用的廣譜性腫瘤標志物。然而正確判斷血清CEA水平是否升高必須依賴健康人參考區(qū)間的建立。意大利學(xué)者Ceriotti等［1］認為正常參考區(qū)間需要定期進行更新，尤其是當檢測中或檢測前處理發(fā)生改變的時候。美國臨床實驗室標準化研究所（Clinical and Laboratory Standard Institure，CLSI）亦指出每個實驗室應(yīng)該建立自己的參考區(qū)間［2］。目前，國內(nèi)外很少有實驗室做到這一點，而只是簡單的套用試劑說明書提供的參考區(qū)間或參照發(fā)達國家采用的參考值。本研究調(diào)查了廣西防城港地區(qū)健康成年男性血清CEA水平，并分析其與年齡、吸煙、飲酒的關(guān)系，為該地區(qū)健康成年男性血清CEA參考區(qū)間的建立提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2009年9～12月廣西防城港地區(qū)4 303名成年健康男性參與調(diào)查，均提供了知情同意書，該研究獲當?shù)貍惱砦瘑T會的批準。本研究選擇南方壯族這樣一個特定人群進行分析，并按照CLSI的建議制定了納入和排除標準［2］。納入標準：（1）受檢者及其父母均為壯族；（2）調(diào)查前一個月內(nèi)身體健康。排除標準：（1）急、慢性消化系統(tǒng)疾病患者；（2）調(diào)查前24h內(nèi)飲酒者；（3）過去半個月內(nèi)服用過處方藥；（4）過去半年內(nèi)曾獻血者。經(jīng)過篩選，共納入282例健康男性進行下一步篩選。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 采集空腹靜脈血液10mL，2h內(nèi)低溫運送到廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，1 500g離心15～25min，－80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 實驗室檢測 血清標本在室溫下解凍，并在4h內(nèi)完成檢測。采用德國羅氏COBAS 6000system E601（Elecsys module）免疫分析儀及其配套試劑進行測定，儀器檢測范圍0.200～1 000ng／mL。

1.2.3 質(zhì)量控制 檢測前對儀器調(diào)試和校正，并應(yīng)用Elecsys低值和高值質(zhì)控血清對每一批樣本分析進行質(zhì)量控制，其批內(nèi)變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）值分別為3.4%和4.8%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析。極端值的排除采用Horn等［3］推薦的Box－Cox法。正態(tài)性檢驗采用單樣本Kolmogorov－Smirnov法。單因素方差分析用來比較不同組別CEA值的差異。年齡、吸煙、體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）和飲酒對血清CEA值的影響采用多元回歸分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。參考區(qū)間的計算采用95%置信區(qū)間。

2 結(jié) 果

2.1 樣本人群基本情況 此次調(diào)查共抽樣4 303名，年齡17～88歲，經(jīng)過實驗室檢查和體格檢查，按照納入和排除標準篩選后，最后納入健康壯族男性282名，年齡22～69歲，平均（37.9±9.9）歲，采用Box－Cox法未檢測出極端值。

2.2 正態(tài)性檢驗 單樣本Kolmogorov－Smirnov法檢測結(jié)果顯示血清CEA值呈正偏態(tài)分布（Z＝2.071，P＜10－5），進行對數(shù)轉(zhuǎn)換后符合正態(tài)分布（Z＝0.818，P＝0.515）。

2.3 多元回歸分析與參考區(qū)間的計算 多元回歸分析結(jié)果顯示血清CEA值與年齡和吸煙存在相關(guān)，而與BMI和飲酒不相關(guān)（表1）。單因素方差分析結(jié)果也顯示血清CEA值在吸煙和不吸煙組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），而在飲酒與不飲酒組差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（P＝0.984）。Spearman秩相關(guān)分析結(jié)果顯示血清CEA值與年齡存在較弱的正相關(guān)（rs＝0.139，P＜0.05）。因此將研究對象按年齡分為兩組：20～44歲、45～69歲；按是否吸煙分為吸煙和不吸煙組，分別計算單側(cè)95%置信區(qū)間（表2）。

表1 282例壯族健康成年男性血清CEA的多元回歸分析

表2 不同組別血清CEA單側(cè)95%置信區(qū)間（ng／mL）

3 討 論

CEA廣泛存在于內(nèi)胚葉起源的消化系統(tǒng)中，如大腸癌、胃癌、肝癌、胰腺癌，也可存在于小細胞肺癌、乳腺癌、甲狀腺髓樣癌中。因此，檢測血清中CEA含量對上述癌癥的診斷具有輔助價值。良性腫瘤、炎癥和退行性疾病，如結(jié)腸息肉、潰瘍性結(jié)腸炎、胰腺炎和酒精性肝硬化患者血清CEA也有部分升高，但遠遠低于惡性腫瘤。

由于血清CEA水平過低在臨床上的意義不大，因此，本研究采用單側(cè)95%置信區(qū)間進行計算，共納入廣西防城港地區(qū)壯族健康成年男性282例，并采用電化學(xué)發(fā)光法進行檢測。血清CEA 95%置信區(qū)間不大于5.12ng／mL（非參數(shù)法）或不大于5.16ng／mL（參數(shù)法），這與國外報道的血清CEA的95%置信區(qū)間不盡相同。國外報道健康成人血清CEA參考區(qū)間研究人群來自北歐［4］、科威特［5－6］、美國［7］，而95%置信區(qū)間最低的不大于3.4ng／mL，最高的不大于6.9ng／mL。造成這種差異的因素是多方面的，檢測方法、研究人群（包括地域、民族、生活習(xí)慣等）的不同可能導(dǎo)致了研究結(jié)果的不同。因此，每個臨床實驗室應(yīng)該根據(jù)所處地區(qū)的特殊性建立屬于自己的正常參考值范圍。

經(jīng)過多元回歸分析發(fā)現(xiàn)血清CEA值與年齡和吸煙存在較弱的相關(guān)，而與BMI和飲酒不相關(guān)。吸煙能夠?qū)е卵錍EA水平的升高已經(jīng)得到許多學(xué)者的認可［8－10］，而隨著年齡的增加機體的許多生理指標都會發(fā)生改變，患癌癥的概率也會大大增加［11－12］。因此有必要對血清CEA水平的參考區(qū)間進行分層分析，按照是否吸煙分別建立參考區(qū)間已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床，而按年齡分層則還未被認可。挪威學(xué)者Bjerner等［4］在研究中也發(fā)現(xiàn)血清CEA水平與年齡存在正相關(guān)，本研究中以年齡45歲為分界點進行分組，計算血清CEA參考區(qū)間，但由于壯族人群人群血清樣本較難收集，45～60歲年齡組例數(shù)未達到CLSI規(guī)定的120例，該結(jié)果需要更多的樣本例數(shù)來進行驗證。

隨著社會的不斷發(fā)展，人們的生活水平提高很快，生活環(huán)境也在慢慢得發(fā)生變化，外在環(huán)境的改變必然會在一定程度上引起內(nèi)環(huán)境的變化，因此參考值范圍的亦需要定期地進行更新。本研究調(diào)查了廣西防城港地區(qū)壯族健康成年男性血清CEA參考值水平，并強調(diào)根據(jù)年齡分組建立參考區(qū)間，為該地區(qū)血清CEA參考值范圍的建立提供參考。

［1］ Ceriotti F，Hinzmann R，Panteghini M.Reference intervals：the way forward［J］.Ann Clin Biochem，2009，46（Pt 1）：8－17.

［2］ Institute CALS.Defining，establishing，and verifying reference intervals in the clinical laboratory；approved guideline［M］.3rd ed.Wayne：Clinical and Laboratory Standards Institute，2008.

［3］ Horn PS，F(xiàn)eng L，Li Y，et al.Effect of outliers and nonhealthy individuals on reference interval estimation［J］.Clin Chem，2001，47（12）：2137－2145.

［4］ Bjerner J，Hogetveit A，Wold AK et al.Reference intervals for carcinoembryonic antigen（CEA），CA125，MUC1，Alfa－foeto－protein（AFP），neuron－specific enolase（NSE）and CA19.9from the NORIP study［J］.Scand J Clin Lab Invest，2008，68（8）：703－713.

［5］ Behbehani AI，Mathew A，F(xiàn)arghaly M，et al.Reference levels of the tumor markers carcinoembryonic antigen，the carbohydrate antigens 19－9and 72－4，and cytokeratin fragment 19using the Elecsys Relecsys 1010analyzer in a normal population in Kuwait.The importance of the determination of local reference levels［J］.Int J Biol Markers，2002，17（1）：67－70.

［6］ al－Sayer H，al－Bader A，Hussein T，et al.A profile of tumor markers in the population of Kuwait［J］.Anticancer Res，1999，19（3B）：2369－2372.

［7］ Kratz A，F(xiàn)erraro M，Sluss PM，et al.Case records of the Massachusetts General Hospital.Weekly clinicopathological exercises.Laboratory reference values［J］.N Engl J Med，2004，351（15）：1548－1563.

［8］ Sajid KM，Parveen R，Durr－e－Sabih，et al.Carcinoembryonic antigen（CEA）levels in hookah smokers，cigarette smokers and non－smokers［J］.J Pak Med Assoc，2007，57（12）：595－599.

［9］Stevens DP，Mackay IR.Increased carcinoembryonic antigen in heavy cigarette smokers［J］.Lancet，1973，2（7840）：1238－1239.

［10］Alexander JC，Silverman NA，Chretien PB.Effect of age and cigarette smoking on carcinoembryonic antigen levels［J］.JAMA，1976，235（18）：1975－1979.

［11］Anisimov VN.Biology of aging and cancer.Cancer Control［J］.Cancer Contril，2007，14（1）：23－31.

［12］Anisimov VN，Sikora E，Pawelec G.Relationships between cancer and aging：a multilevel approach［J］.Biogerontology，2009，10（4）：323－338.