易麗君 ，龔道新，陳 金，張素芳

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學煙草工程技術研究中心，湖南 長沙 410128；2.桃源縣煙草專賣局，湖南 常德 415700；3.湖南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)環(huán)境保護研究所，湖南 長沙 410128）

吡嘧磺隆和苯噻酰草胺是目前應用較為廣泛、使用比較安全的除草劑，同時也是生產(chǎn)除草混劑較好的原料藥品。采用高效液相色譜法分別測定分析這兩種農(nóng)藥單劑的研究已有報道，而且單獨測定的方法成熟、簡便、易操作，但同時檢測分析這兩種農(nóng)藥的研究卻未見報道。為了同時檢測分析土壤中吡嘧磺隆和苯噻草胺混合顆粒劑的殘留，特以植煙土壤為材料進行高效液相色譜分析，分析效果較為理想。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

儀器：HP1100 型高效液相色譜儀（HPLC），SHY-2AS 水浴恒溫振蕩器，TP-220A 電子天平，SHZ-D（III）循環(huán)水式真空泵，RE-2000A 型旋轉濃縮儀，玻璃層析柱（長20 cm，直徑1.5 cm），梨形抽濾瓶，具塞三角瓶，量筒，250 mL 分液漏斗，布氏漏斗，容量瓶，移液管，滴定管，玻璃棒等常用實驗儀器。

試劑：弗羅里硅土（用前在650℃下烘3～5 h，冷卻后以2%蒸餾水脫活，保存在130℃的烘箱中，備用），二氯甲烷、冰乙酸，甲醇、無水硫酸鈉、氯化鈉等，以上試劑均為分析純級別。

1.2 試驗方法

1.2.1 藥品檢測 （1）樣品的制備。在未施用過吡嘧磺隆和苯噻草胺農(nóng)藥的植煙土壤中隨機采10 個點取0～15 cm 的耕作層土壤約500 g，去除植物根系及礫石等非土壤部分，混合均勻后過10 目篩，按四分法留樣300 g，盛裝在潔凈的封口塑料袋中，置于-20℃條件下冷凍保存。（2）提取。準確稱取已制備好的土壤樣品20.0 g，置于250 mL 具塞三角瓶中，加入80 mL 甲醇，并加入適量冰乙酸調(diào)節(jié)pH值至5～6，在水浴恒溫（25℃）振蕩器中振蕩30 min，經(jīng)布氏漏斗減壓抽濾，再用甲醇洗滌殘渣和抽濾瓶2 次（30 mL/次），合并抽濾液無損轉入250 mL 具塞三角瓶中，在旋轉蒸發(fā)儀上濃縮近干，轉入盛有20 mL 10%NaCl 溶液的250mL 分液漏斗中，再分別用二氯甲烷30 mL，30 mL，20 mL 連續(xù)萃取3 次，合并二氯甲烷萃取液，在旋轉蒸發(fā)儀上濃縮近干，用5 mL 二氯甲烷和甲醇的混合液（1∶1，v∶v）溶解，待弗羅里硅土層析柱凈化。（3）凈化。弗羅里硅土（Florisil）層析柱從下至上依次裝填有少許脫脂棉、2 cm 厚無水硫酸鈉、5 g 弗羅里硅土、2 cm 厚無水硫酸鈉，在裝柱的過程中要敲緊敲實，在層析柱裝好后，先用20 mL 二氯甲烷和甲醇的混合液（1∶1，v∶v）預淋，再將上述提取濃縮液無損移入弗羅里硅土凈化柱中，用70 mL 二氯甲烷和甲醇的混合液（1∶1，v∶v）淋洗（每次5 mL 左右），收集淋出液，于旋轉蒸發(fā)器上濃縮近干，再用色譜甲醇定容至5.0 mL，待HPLC 檢測。（4）液相色譜檢測。液相色譜柱：150 mm×4.6 mm，Cl8 不銹鋼色譜柱；檢測波長：240 nm；流動相為甲醇∶水∶冰乙酸的混合液（70∶30∶0.3，v∶v∶v）；流速：0.6 mL/min；柱溫：30℃；進樣量：20 μL；檢測運行時間：14 min。

1.2.2 標準曲線繪制 采用梯度稀釋法配制吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的濃度分別為0.05、0.10、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/L 的標準工作溶液，在上述選定的HPLC 條件下檢測，測定出各濃度的標準工作溶液所對應色譜峰的峰面積。然后以標準工作溶液的濃度（X，mg/L）與所對應的色譜峰的峰面積（Y）繪制標準工作曲線。

1.2.3 添加回收率試驗 在植煙土壤空白對照樣品中分別添加吡嘧磺隆的標準溶液，使樣品中吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的濃度分別為0.05、0.10、1.00 mg/kg，每個處理重復5 次，按上述所選定的分析方法及檢測條件進行樣品的分析與檢測，

2 結果和討論

2.1 標準曲線

從圖1 和圖2 可知：當藥品濃度在0.05～2.00 mg/L 范圍內(nèi)變化時，吡嘧磺隆和苯噻酰草胺標準工作溶液的濃度與其所對應的色譜峰的峰面積之間呈良好的線性關系，經(jīng)分析得到吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的回歸方程式分別為：Y=115.84 x+0.970 8；Y=152.05 x-0.177 9，相關系數(shù)均為0.999 9，達到了極顯著水平。這表明該檢測方法可滿足定量分析吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的要求。

圖1 吡嘧磺隆的標準曲線

圖2 苯噻酰草胺的標準曲線

2.2 最小檢出量和最小檢驗濃度

試驗結果表明：在所選定的液相色譜分析條件下，吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的最小檢出量為：1.0×10-9g，最小檢出濃度為：1.25×10-2mg/kg。

2.3 添加回收率試驗

從表1 可知：當添加濃度為0.05、0.10、1.00 mg/kg 時，吡嘧磺隆在土壤中的添加回收率在82.15%～97.12%之間，平均回收率為84.00%～95.32%，相對標準偏差為1.39%～1.55%；苯噻酰草胺在土壤中的添加回收率在81.11%～101.15%之間，平均回收率為84.47%～98.53%，相對標準偏差為0.85%～3.50%。結果表明吡嘧磺隆和苯噻酰草胺的添加回收率和相對標準偏差均在農(nóng)藥殘留試驗準則允許的范圍內(nèi)，這說明所選定的方法符合農(nóng)藥殘留量分析與檢測的技術要求。

表1 吡嘧磺隆和苯噻酰草胺在植煙土壤中的添加回收試驗

2.4 儀器檢測條件的選擇

苯噻酰草胺和吡嘧磺隆混劑在分別中性、弱堿性和弱酸性條件下的檢測情況顯示：在弱堿性條件下基本無峰；在中性條件下檢測峰形拖尾，苯噻酰草色譜峰與吡嘧磺隆色譜峰相距較近、不易分離，且線性關系不理想；在弱酸性條件下檢測峰較為理想。

3 討 論

研究并建立了采用高效液相色譜同時測定吡嘧磺隆·苯噻酰草胺混劑的分析方法，該方法有抗干擾能力強、操作簡易、準確度和靈敏度較高等特點。當添加濃度為0.05～1.00 mg/kg 時，吡嘧磺隆在土壤中的添加回收率在82.15%～97.12%之間，相對標準偏差為1.39%～1.55%；苯噻酰草胺在土壤中的添加回收率在81.11%～101.15%之間，相對標準偏差為0.85%～3.50%；該方法測定植煙土壤中殘留的吡嘧磺隆和苯噻酰草胺，其最小檢出濃度均為1.25×10-2mg/kg。綜上所述，說明該方法能有效檢測植煙土壤中的吡嘧磺隆和苯噻酰草胺殘留，可推廣應用于其他類型土壤的農(nóng)殘檢測。

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