陳紅艷 廖國(guó)周 王桂瑛 樊月圓 蘇子峰 廖啟順 楊建發(fā) 程志斌

（1.云南農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650031；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南昆明 650201；3.大理學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南大理 671003）

安全高效飼料添加劑的使用是保障畜禽健康環(huán)保養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)之一（程志斌等，2011a、b、c；楊俊琦等，2011）。大量研究表明，枯草芽孢桿菌（Bacillus Subtilis）通過(guò)調(diào)控畜禽腸道菌群、補(bǔ)充腸道多種內(nèi)源酶不足、改善飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率，顯著提高畜禽生產(chǎn)性能，是替代飼用抗生素的高效飼料添加劑之一（陳亮等，2011；解廣勤等，2011；張博等，2011；卞國(guó)順等，2012；成廷水等，2012；侯玉潔等，2012；楊光宇，2012；周映華等，2012a、b）。絲蘭提取物（yucca extracts）能夠有效地減少雞舍氨氣、硫化氫等有害氣體，改善肉雞生長(zhǎng)性能的同時(shí)降低養(yǎng)殖環(huán)境污染（Yeo等，1997；劉春龍等，2005；Windisch 等，2008）。本課題組前期試驗(yàn)也證明（程志斌等，2012a），將絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌組合使用，能改善規(guī)模化養(yǎng)殖肉雞的生長(zhǎng)性能，降低雞舍氨氣和硫化氫濃度，符合當(dāng)前肉雞規(guī)?；】淡h(huán)保養(yǎng)殖的實(shí)際生產(chǎn)需求。本試驗(yàn)在前期工作基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌組合使用的效果及機(jī)理，為肉雞健康環(huán)保養(yǎng)殖提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)分組

本試驗(yàn)選擇1日齡新出生的羅斯308（ROSS 308）肉仔雞240只，依據(jù)試驗(yàn)日糧中絲蘭提取物和枯草芽孢桿菌的使用不同,分為4個(gè)試驗(yàn)處理組,見表1。每個(gè)處理組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只，公、母各半。

表1 試驗(yàn)處理組設(shè)計(jì)

1.2 試驗(yàn)日糧

日糧配方參考《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 33—2004）》，結(jié)合云南肉雞養(yǎng)殖實(shí)際情況，配制兩階段試驗(yàn)日糧，基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。處理組1肉雞日糧添加金霉素，并遵守農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》；處理組2日糧添加枯草芽孢桿菌，添加量為5×1011cfu/kg全價(jià)日糧，枯草芽孢桿菌由云南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院（云南昆明）提供；處理組3日糧添加絲蘭提取物（富蘭寶，美國(guó)DPI公司，美國(guó)），添加量為120 mg/kg全價(jià)日糧；處理組4同時(shí)添加絲蘭提取物（120 mg/kg全價(jià)日糧）和枯草芽孢桿菌（5×1011cfu/kg全價(jià)日糧）。試驗(yàn)日糧低溫（65℃）制粒。

表2 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)肉雞采用籠養(yǎng)方式飼養(yǎng)于同一雞舍，單籠為1個(gè)試驗(yàn)組重復(fù)，試驗(yàn)在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)雞場(chǎng)進(jìn)行。按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫，專人負(fù)責(zé)飼養(yǎng)試驗(yàn)。自然光照輔以人工照明，光照時(shí)間22 h，試驗(yàn)周期42 d。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 生長(zhǎng)性能

測(cè)定體重、飼料消耗，計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料重比（飼料轉(zhuǎn)化效率）等生長(zhǎng)性能指標(biāo)。

1.4.2 飼料養(yǎng)分利用率

采用Cr2O3指示劑法，在肉雞15～21日齡和36～42日齡進(jìn)行飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀代謝率測(cè)定，預(yù)飼4 d,正式代謝試驗(yàn)3 d,具體方法參考丁雪梅等(2011)報(bào)道。

1.4.3 脲酶活性

試驗(yàn)肉雞21日齡和42日齡早晨空腹稱重后，每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)組隨機(jī)抽取2只健康肉雞（1公、1母）處死，取小腸和大腸組織，分析脲酶活性，具體方法參考Yeo等（1997）的報(bào)道。脲酶活性單位（1 U國(guó)際單位）定義為：1 g腸組織培養(yǎng)物37℃條件下每30 min分解尿素的毫摩爾數(shù)。分析測(cè)定在云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室完成。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和組間多重比較，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響（見表 3）

表3 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

試驗(yàn)全期平均日增重和料重比指標(biāo)，處理組4肉雞顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.05），而處理組2和3之間差異不顯著（P＞0.05）。此外，所有處理組之間肉雞平均日采食量無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.2 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞飼料養(yǎng)分利用的影響（見表4）

表4 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞飼料養(yǎng)分利用的影響(%)

肉雞對(duì)飼料粗蛋白的表觀代謝率指標(biāo)，在肉雞19～21日齡和40～42日齡階段，均表現(xiàn)為處理組2和4 顯著大于處理組 1（P＜0.05）。19～21 日齡階段肉雞對(duì)飼料代謝能利用率指標(biāo)，處理組4顯著大于處理組1(P＜0.05),處理組2和3之間差異不顯著(P＞0.05)。此外,其他測(cè)定指標(biāo)，4個(gè)處理組之間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

2.3 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞腸道脲酶活性的影響（見表5）

肉雞21日齡，處理組1小腸和大腸組織脲酶活性均顯著大于（P＜0.05）其他3個(gè)處理組，其中處理組4小腸組織脲酶活性數(shù)值最低。肉雞42日齡，小腸和大腸組織脲酶活性所有處理組之間無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表5 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞腸道脲酶活性的影響(U/g)

3 討論

3.1 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

試驗(yàn)全期采食單獨(dú)添加枯草芽孢桿菌日糧的處理組2肉雞平均日增重顯著大于使用飼用抗生素的處理組1肉雞。單獨(dú)添加絲蘭提取物的處理組3肉雞平均日增重、末體重、料重比等生長(zhǎng)性能指標(biāo)，雖有優(yōu)于處理組1的趨勢(shì)，但數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)差異不顯著。同時(shí)添加枯草芽孢桿菌和絲蘭提取物的處理組4肉雞平均日增重、末體重、料重比顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.05）。以上結(jié)果說(shuō)明：肉雞日糧中添加枯草芽孢桿菌或絲蘭提取物均能改善肉雞生長(zhǎng)性能，而枯草芽孢桿菌的改善效果更明顯，且枯草芽孢桿菌和絲蘭提取物組合使用具有協(xié)同效應(yīng)，肉雞生長(zhǎng)性能更好。本試驗(yàn)結(jié)果與我們過(guò)去的報(bào)道（程志斌等，2012a）及前人的結(jié)論（張博等，2011；卞國(guó)順等，2012）一致。

3.2 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞飼料養(yǎng)分利用的影響

畜禽良好的生產(chǎn)性能取決于對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的充分消化、吸收與利用（Cheng等，2006；程志斌等，2011d、e、f；程志斌等，2012b、c），采用 Cr2O3指示劑法測(cè)定的飼料養(yǎng)分表觀代謝率能夠客觀反映肉雞對(duì)日糧的消化與利用狀況（丁雪梅等，2011）。表4結(jié)果顯示：采食添加枯草芽孢桿菌日糧的處理組2和4肉雞對(duì)飼料粗蛋白的表觀代謝率顯著大于使用飼用抗生素的處理組1。這與表3肉雞平均日增重的結(jié)果基本相符，充分說(shuō)明日糧添加枯草芽孢桿菌有利于提高肉雞對(duì)飼料蛋白的消化吸收，從而改善肉雞的生長(zhǎng)性能。我們的結(jié)果也印證了過(guò)去關(guān)于枯草芽孢桿菌具有補(bǔ)充或維持動(dòng)物腸道多種消化酶，增加營(yíng)養(yǎng)攝入而改善畜禽生長(zhǎng)性能的機(jī)理（Chen等，2009；鮑振國(guó)等，2012；劉星等，2012）。

肉雞對(duì)飼料粗蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)利用率的提高意味著糞尿中飼料氮排放的減少，這對(duì)降低高密度、規(guī)?；F(xiàn)代肉雞養(yǎng)殖舍有害氣體濃度，保障肉雞健康環(huán)保養(yǎng)殖有積極意義（白兆鵬等，2011；李連任，2012；唐艷林，2012）。因此，本試驗(yàn)結(jié)果也支持了我們的前期報(bào)道（程志斌等，2012a）：日糧添加枯草芽孢桿菌不僅提高肉雞的生長(zhǎng)性能，也能有效降低雞舍氨氣和硫化氫的濃度，降低養(yǎng)殖環(huán)境污染。

3.3 絲蘭提取物與枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞腸道脲酶活性的影響

氨氣和硫化氫是規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)空氣污染的主體(白兆鵬等，2011)，關(guān)于絲蘭提取物降低養(yǎng)殖環(huán)境空氣污染的內(nèi)容已有大量報(bào)道（Yeo等，1997；劉春龍等，2005；Windisch等，2008），我們前期試驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)（程志斌等，2012a）：就改善養(yǎng)殖環(huán)境空氣污染的作用效果而言，絲蘭提取物對(duì)減少雞舍氨氣和硫化氫的效果優(yōu)于枯草芽孢桿菌。劉春龍等（2005）認(rèn)為，絲蘭提取物可能通過(guò)改善飼料養(yǎng)分利用率、與有害氣體結(jié)合、抑制脲酶活性等多種途徑，綜合降低養(yǎng)殖場(chǎng)有害氣體污染。因此，本試驗(yàn)在測(cè)定肉雞對(duì)飼料養(yǎng)分利用的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步分析了肉雞腸道組織的脲酶活性。

表5結(jié)果顯示：21日齡肉雞的小腸和大腸組織脲酶活性指標(biāo),處理組1均顯著大于其他3個(gè)處理組,其中處理組4小腸組織脲酶活性數(shù)值最低。這一結(jié)果似乎說(shuō)明絲蘭提取物不僅能夠有效降低肉雞腸道脲酶活性，減少養(yǎng)殖舍空氣污染，而且枯草芽孢桿菌也具有相似的功能。然而，當(dāng)前國(guó)內(nèi)外動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)家對(duì)絲蘭提取物添加劑是否通過(guò)降低畜禽腸道脲酶活性而減少空氣污染，存在一定爭(zhēng)議（Yeo等，1997；劉春龍等，2005；Windisch 等，2008）。本次試驗(yàn)（表 5）也佐證了這一觀點(diǎn)：42日齡肉雞的小腸和大腸組織脲酶活性，所有處理組之間無(wú)顯著差異。結(jié)合表4飼料養(yǎng)分利用率數(shù)據(jù)，這一結(jié)果難以解釋：絲蘭提取物對(duì)減少雞舍氨氣和硫化氫的效果優(yōu)于枯草芽孢桿菌（程志斌等，2012a）。分析表5脲酶活性測(cè)定值，我們發(fā)現(xiàn)大部分脲酶測(cè)定值的變異系數(shù)較大，因此結(jié)合前人試驗(yàn)報(bào)道我們推測(cè)：肉雞的日齡、取樣部位（組織或食糜）、脲酶的測(cè)定方法等因素對(duì)脲酶活性測(cè)定值的影響很大，可能影響試驗(yàn)最終結(jié)論。鑒于國(guó)內(nèi)外畜禽脲酶活性測(cè)定的試驗(yàn)報(bào)道較少，這一推測(cè)值得我們進(jìn)一步深入研究。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)證明，枯草芽孢桿菌與絲蘭提取物能提高肉雞對(duì)飼料蛋白的消化與利用率，具有協(xié)同改善肉雞生長(zhǎng)性能的作用，其作用效果優(yōu)于單一使用。

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