李 勇 孟艷莉 白修云 張甦寅 鄭紅松 劉旭明

(1.國家蛋品工程技術(shù)研究中心，北京 102115；2.北京德青源農(nóng)業(yè)科技股份有限公司，北京102115)

玉米和小麥?zhǔn)莿?dòng)物飼料原料中兩種主要的能量飼料。歐洲是小麥主產(chǎn)區(qū)，在歐洲動(dòng)物日糧較多用小麥型日糧。在我國玉米和小麥同屬主產(chǎn)作物，但是由于玉米價(jià)格長期低于小麥，因而在我國玉米成為動(dòng)物日糧中的主要能量飼料原料。但是，自2010年3月份以來，玉米和小麥價(jià)格出現(xiàn)倒掛，小麥價(jià)格開始低于玉米，同時(shí)由于小麥中粗蛋白含量較高，在動(dòng)物日糧中應(yīng)用能夠較大程度地降低動(dòng)物養(yǎng)殖成本，因而近來，小麥型日糧開始廣泛應(yīng)用。小麥與玉米雖然都屬能量飼料，但是小麥中富含抗?fàn)I養(yǎng)因子——可溶性非淀粉多糖，研究顯示，其在動(dòng)物腸道遇水后導(dǎo)致食糜變黏，進(jìn)而能夠阻礙營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，降低營養(yǎng)物質(zhì)的消化率（Petersen 等，1999；Karimi等，2007），影響腸道黏膜結(jié)構(gòu)及微生物種類與數(shù)量，甚至能夠影響動(dòng)物免疫功能(王金全等,2005；丁雪梅等,2009),為此使用小麥作為動(dòng)物日糧能量飼料時(shí)，通常需要添加非淀粉多糖酶制劑以降低非淀粉多糖的抗?fàn)I養(yǎng)作用。然而,目前市場(chǎng)上非淀粉多糖酶制劑種類較多,質(zhì)量參差不齊,因此,為了了解目前市場(chǎng)上主要酶制劑產(chǎn)品的效果,同時(shí)也為了篩選一種效果較好的酶制劑產(chǎn)品，本試驗(yàn)選擇行業(yè)內(nèi)具有較大影響力的7家公司的小麥專用酶制劑產(chǎn)品,研究了小麥日糧添加不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)4～9周齡蛋雞生產(chǎn)性能、免疫功能及營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響,旨在為蛋雞生產(chǎn)中小麥日糧的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 酶制劑產(chǎn)品

A、B、C、D、E、F、G 7 種酶制劑產(chǎn)品分別來自于 7家不同酶制劑公司，其中A、B、C、D為國產(chǎn)酶制劑產(chǎn)品，E、F、G為進(jìn)口酶制劑產(chǎn)品，酶制劑添加量按照各公司推薦量添加，分別為 200、200、200、200、200、100、250 g/t。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

選擇體重相近的21日齡海蘭褐青年蛋雞1 120只，隨機(jī)分為8個(gè)處理，每個(gè)處理7個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。其中對(duì)照組蛋雞飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，7個(gè)試驗(yàn)組蛋雞分別飼喂小麥型基礎(chǔ)日糧+不同酶制劑產(chǎn)品的試驗(yàn)日糧，酶制劑添加量參考各酶制劑供應(yīng)商推薦添加量。試驗(yàn)周期為6周。

1.3 日糧配制

按照海蘭育種公司推薦的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)分別配制4～6周和7～9周海蘭青年蛋雞玉米-豆粕型日糧和小麥型基礎(chǔ)日糧。小麥型基礎(chǔ)日糧中,小麥添加比例為70%,具體日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

蛋雞飼養(yǎng)試驗(yàn)在北京市延慶縣張山營鎮(zhèn)北京德青源生態(tài)園試驗(yàn)雞場(chǎng)進(jìn)行，蛋雞采用三層全重疊籠養(yǎng)方式全封閉飼養(yǎng)，舍內(nèi)配置風(fēng)機(jī)、濕簾及自動(dòng)清糞設(shè)備，飼養(yǎng)期間蛋雞自由采食和飲水，其它飼養(yǎng)管理及免疫程序按照海蘭育種公司推薦的常規(guī)飼養(yǎng)管理程序及免疫程序進(jìn)行。

1.5 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)測(cè)定

分別于蛋雞 21、28、35、42、49、56、63 日齡早 8:00，以重復(fù)為單位對(duì)雞只進(jìn)行空腹稱重，同時(shí)記錄雞只采食量，計(jì)算雞只平均體重、日增重、日采食量及料重比。

1.5.2 免疫功能指標(biāo)測(cè)定

分別于蛋雞35、49、63日齡早8:00，每個(gè)重復(fù)選取試雞2只，翅下靜脈采血2 ml促凝制備血清，-20℃保存，待測(cè)新城疫、禽流感H5-4及H9抗體滴度，抗體滴度采用血紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)測(cè)定；另外，于63日齡早8:00，每個(gè)重復(fù)選取試雞2只，采血2 ml抗凝制備全血，4 h內(nèi)分離T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)，測(cè)定T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，具體測(cè)定方法參考劉永祥等（2012）方法。具體如下：將100 μl淋巴細(xì)胞懸液加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，再加入含絲裂原伴刀豆球蛋白（ConA，終濃度45 μg/ml）,對(duì)照組則加等體積的不含絲裂原的培養(yǎng)液,培養(yǎng)體系每孔共200 μl，3個(gè)重復(fù)。于 5%CO2、37 ℃條件下培養(yǎng)68 h。在培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入20 μl CCK溶液，繼續(xù)培養(yǎng)2 h。之后用酶標(biāo)儀于420 nm波長下測(cè)定OD值。

1.5.3 粗蛋白消化率測(cè)定

消化試驗(yàn)于蛋雞57日齡開始進(jìn)行，預(yù)試3 d，正試4 d。粗蛋白消化率采用TiO2作為外源指示劑的方法測(cè)定。試驗(yàn)日糧中TiO2的添加量為0.4%。正試期前禁飼12 h，以盡可能排空雞只腸道食糜。糞樣收集于蛋雞60、61、62、63日齡早8:00以重復(fù)為單位進(jìn)行，糞樣采用活動(dòng)糞盤墊塑料布的方法收集，具體如下：取出糞盤后先噴灑10%稀HCl，之后以重復(fù)為單位混勻糞樣，并按一定比例取樣，期間揀出羽毛廢料等雜物,4 d收集的糞樣混合均勻后，于65℃烘干制備風(fēng)干樣，待測(cè)TiO2及粗蛋白含量等指標(biāo)。TiO2測(cè)定參考鄧雪娟等（2008）方法，粗蛋白含量采用凱氏定氮儀測(cè)定。粗蛋白消化率計(jì)算公式如下：

粗蛋白消化率(%)=[1-（日糧TiO2含量×糞粗蛋白含量）/(糞 TiO2含量×日糧粗蛋白含量)]×100。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

利用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS16.0中One-Way ANOVA模塊對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,數(shù)據(jù)以“Mean±SE”表示，顯著水平設(shè)為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞生產(chǎn)性能的影響（見表2）

表2 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)蛋雛雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，對(duì)照組及各酶制劑添加組青年蛋雞4～6周齡及7～9周齡平均體重、日增重、日耗料量及料重比均無顯著差異(P＞0.05)。

2.2 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞免疫功能的影響（見表 3、表 4）

由表3可知，對(duì)照組及不同酶制劑添加組青年蛋雞5、7及9周齡末的ND、禽流感H5-4及H9抗體水平均無顯著差異（P＞0.05）。由表4可知，對(duì)照組及不同酶制劑添加組青年蛋雞9周齡末外周血液T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率無顯著差異（P＞0.05）。

2.3 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞小麥型日糧粗蛋白消化率的影響（見表5）

由表5可知，對(duì)照組及酶制劑添加組之間青年蛋雞日糧粗蛋白消化率存在顯著差異，其中，A酶制劑組青年蛋雞日糧粗蛋白消化率顯著低于對(duì)照組粗蛋白消化率（P＜0.05），而其它各組與對(duì)照組相比青年蛋雞日糧粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05）；不同酶制劑組之間，D、E、F酶制劑組日糧粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05），D和E酶制劑組日糧粗蛋白消化率顯著高于A、B、C、G酶制劑組（P＜0.05），B、C、F、G 酶制劑組間粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05），而F、G組粗蛋白消化率顯著高于A組（P＜0.05），A、B、C 酶制劑組間粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞抗體水平的影響

表4 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)9周齡末蛋雞外周

血液T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率(SI)的影響(%)

表5 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)蛋雞日糧粗蛋白消化率的影響(%)

3 討論

盡管小麥在動(dòng)物日糧中的應(yīng)用目前已有較多的研究，然而由于小麥在動(dòng)物日糧中的應(yīng)用效果受多種因素的影響，如動(dòng)物種類、品種、年齡、健康狀況、飼養(yǎng)環(huán)境及酶制劑質(zhì)量等，為了確定市場(chǎng)上主要小麥酶制劑產(chǎn)品的應(yīng)用效果,本試驗(yàn)以4～9周海蘭褐青年蛋雞為研究對(duì)象，研究了小麥添加70%，同時(shí)添加不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞生長性能、免疫功能及日糧粗蛋白消化率的影響，旨在為小麥在青年蛋雞日糧中應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。

3.1 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞生產(chǎn)性能的影響

玉米、小麥在動(dòng)物飼料中同屬能量飼料，較多的研究表明，在使用酶制劑的前提下利用小麥替代玉米作為動(dòng)物日糧的能量來源，不僅能夠使動(dòng)物生長性能達(dá)到與飼喂玉米同樣的效果，甚至能超過使用玉米作為能量來源的日糧的飼喂效果。何艷平等(2006)、孫永剛等（2010）在肉仔雞上的研究均表明，小麥日糧添加木聚糖酶后，其在生產(chǎn)性能方面的效果超過了玉米-豆粕型日糧的飼喂效果。王繼強(qiáng)等（2004）在蛋雞上的研究也表明，日糧中小麥添加量達(dá)到70%，在使用酶制劑的條件下，飼喂小麥日糧蛋雞的生產(chǎn)性能等于甚至高于玉米對(duì)照組蛋雞的生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)在4～9周齡海蘭褐青年蛋雞上的研究結(jié)果顯示，日糧中小麥添加量達(dá)到70%，幾乎完全替代玉米，同時(shí)使用7種公司小麥專用酶制劑產(chǎn)品，按照推薦量添加，飼喂小麥日糧蛋雞的體重、日增重、日耗料量及料重比指標(biāo)均與飼喂玉米-豆粕型日糧蛋雞的各項(xiàng)指標(biāo)無顯著差異，一方面表明在使用酶制劑的前提下，小麥日糧可以達(dá)到與玉米-豆粕型日糧同樣的飼喂效果，而且小麥幾乎可以完全替代玉米；另一方面也表明，國產(chǎn)小麥酶制劑在蛋雞小麥日糧上應(yīng)用的促生長效果與進(jìn)口酶制劑的應(yīng)用效果沒有差異。

3.2 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞免疫功能的影響

玉米中富含亞油酸,許多研究顯示,亞油酸能夠增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫功能(劉永祥等,2012；趙占宇等,2009；賴長華等，2004)，而小麥中亞油酸含量極少，因此小麥替代玉米，有可能對(duì)動(dòng)物免疫功能產(chǎn)生不利影響，基于此，本試驗(yàn)研究了小麥替代玉米對(duì)青年蛋雞免疫功能的影響。動(dòng)物機(jī)體特異性免疫在動(dòng)物免疫功能上具有極其重要的意義，能夠直接反映動(dòng)物機(jī)體的免疫功能。而動(dòng)物特異性免疫主要包括兩個(gè)方面，一方面是動(dòng)物特異性體液免疫，可以通過檢測(cè)血清抗體免疫水平來反映，另一方面是動(dòng)物特異性細(xì)胞免疫，可以通過檢測(cè)動(dòng)物外周血液T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率來反映。本試驗(yàn)分別研究了小麥日糧對(duì)海蘭褐青年蛋雞的抗體水平和T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率產(chǎn)生的影響,結(jié)果顯示,小麥日糧添加酶制劑與玉米-豆粕型日糧相比，對(duì)海蘭褐青年蛋雞 5、7、9周齡末 ND、H5-4、H9抗體水平及 9周齡末外周血T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均無顯著影響。這一結(jié)果與前人研究結(jié)果不盡一致。王金全等（2005）、丁雪梅等（2009）在肉仔雞上的研究結(jié)果顯示，小麥日糧添加酶制劑能使肉雞免疫功能優(yōu)于玉米對(duì)照組肉雞免疫功能，分析可能是由于酶制劑提高了動(dòng)物營養(yǎng)物質(zhì)消化率進(jìn)而改善了動(dòng)物免疫功能，而本試驗(yàn)結(jié)果并未顯示小麥日糧添加酶制劑與玉米對(duì)照組相比能夠提高蛋雞免疫功能，但是結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，使用酶制劑條件下，小麥日糧對(duì)蛋雞免疫功能無不利影響。之所以造成與王金全等（2005）、丁雪梅等（2009）研究結(jié)果不完全一致，分析原因可能是由于本試驗(yàn)中蛋雞在新建雞舍中飼養(yǎng)，同時(shí)完善的風(fēng)機(jī)、濕簾及自動(dòng)清糞等環(huán)控設(shè)備保證了蛋雞生長在良好的飼養(yǎng)環(huán)境中，因此未能完全體現(xiàn)出酶制劑的使用效果所致。

3.3 不同酶制劑產(chǎn)品對(duì)青年蛋雞日糧粗蛋白消化率的影響

目前，市場(chǎng)上所使用的小麥日糧專用酶制劑多為復(fù)合型酶制劑，除了含有能消除非淀粉多糖的主要酶制劑木聚糖酶成分外，多數(shù)還包括了蛋白酶、淀粉酶甚至甘露聚糖酶等酶制劑，因此，小麥日糧中添加酶制劑提高日糧營養(yǎng)成分消化率的功能大大增強(qiáng)，本研究結(jié)果顯示，除A酶制劑外，其余6種酶制劑使小麥日糧粗蛋白消化率達(dá)到甚至超過了對(duì)照組日糧粗蛋白消化率，上述結(jié)果表明，除A酶制劑外，其它6種酶制劑均能消除小麥中非淀粉多糖造成的腸道食糜變黏，進(jìn)而阻止?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)在腸道內(nèi)消化的不利影響。這一結(jié)果也與多數(shù)研究報(bào)道的結(jié)果一致，如王金全等(2005)、王永偉等(2010)分別報(bào)道小麥日糧添加木聚糖酶能夠提高日糧粗蛋白和能量的表觀消化率。本試驗(yàn)中A酶制劑組蛋雞日糧粗蛋白消化率未達(dá)到與對(duì)照組同樣的水平可能與其包含的成分有關(guān)。另外，盡管研究結(jié)果顯示與對(duì)照組相比，D和E兩種酶制劑提高了小麥日糧粗蛋白消化率，但并未最終提高蛋雞生產(chǎn)性能，分析可能與兩方面原因有關(guān)，一方面與消化吸收后營養(yǎng)物質(zhì)的代謝效率有關(guān)；另一方面也與本試驗(yàn)良好的飼養(yǎng)環(huán)境及雞群健康狀況有關(guān)。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)研究了小麥替代玉米，同時(shí)使用7家公司不同的小麥專用酶制劑產(chǎn)品對(duì)4～9周齡海蘭褐青年蛋雞生產(chǎn)性能、免疫功能及日糧粗蛋白消化率的影響，結(jié)果表明，日糧中70%添加小麥同時(shí)使用酶制劑能夠達(dá)到與玉米-豆粕型日糧幾乎同樣的飼喂效果；另外，7種酶制劑產(chǎn)品中，就對(duì)青年蛋雞生產(chǎn)性能及免疫功能影響效果而言，A、B、C、D 4種國產(chǎn)酶制劑與E、F、G 3種進(jìn)口酶制劑效果無顯著差異，就日糧粗蛋白消化率而言，B、C國產(chǎn)酶制劑和F、G進(jìn)口酶制劑無顯著差異，D國產(chǎn)酶制劑和E進(jìn)口酶制劑無顯著差異，表明國產(chǎn)小麥專用酶制劑基本能達(dá)到與進(jìn)口酶制劑相同的使用效果。

[1]Karimi A,Bedford M,Kamyab A,et al.Comparative effects of xylanase supplementation on broiler,broiler breeder and layer chick performance and feed utilization on wheat based diet[J].The Journal of Poultry Science,2007,44:322-329.

[2]Petersen S T,Wiseman J,Bedford M R.Effect of age and diet on viscosity of intestinal contents in broiler chicks[J].British Poultry Science,1999,40:364-370.

[3]王金全,蔡輝益,陳寶江,等.小麥日糧中添加木聚糖酶對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能、免疫、消化器官發(fā)育和血液代謝激素水平的影響[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,28(1):73-76.

[4]丁雪梅,張克英.小麥-豆粕型日糧添加木聚糖酶對(duì)艾維茵肉雞免疫指標(biāo)、腸道形態(tài)和微生物菌群的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2009,21(6):931-937.

[5]劉永祥,劉艷麗,徐秋良,等.飼糧添加共軛亞油酸對(duì)肉仔雞腸道黏膜免疫反應(yīng)的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2012,24(1):124-130.

[6]鄧雪娟,劉國華,蔡輝益,等.分光光度計(jì)法測(cè)定家禽飼料和食糜中二氧化鈦[J].飼料工業(yè),2008,29(2):57-58.

[7]何艷平,孟曉玲,劉來亭.小麥型日糧中添加酶制劑替代玉米型日糧對(duì)肉雞生長性能的影響[J].中國飼料添加劑,2006(6):28-32.

[8]孫永剛,亢娟娟,杜思剛,等.不同營養(yǎng)水平小麥日糧添加木聚糖酶對(duì)肉雞生長性能和血液生化指標(biāo)的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2010（2）:78-79.

[9]王繼強(qiáng),張波,劉福柱.小麥基礎(chǔ)日糧中添加酶制劑對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響[J].中國飼料,2004(21):5-10.

[10]趙占宇,吳天星,唐宏剛,等.共軛亞油酸對(duì)大黃魚生長和免疫指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào),2009(2):205-211.

[11]賴長華,尹靖東,李德發(fā),等.共軛亞油酸對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能和免疫功能的影響[J].中國畜牧雜志,2004(12):9-12.

[12]王永偉,劉國華,汝應(yīng)俊,等.添加木聚糖酶的小麥型日糧對(duì)肉仔雞表觀代謝能的影響[J].飼料工業(yè),2010,31（22）:8-11.