嚴(yán)卓琳

（浙江省桐鄉(xiāng)市疾病預(yù)防控制中心，浙江 桐鄉(xiāng) 314500）

臨床標(biāo)本中常見的低活性大腸埃希菌利用糖類的能力較不活潑[1]。在SS瓊脂上的形態(tài)和在TSI上的生化特征與志賀菌屬相似，且與志賀菌屬有共同抗原[2]，在血清學(xué)上常存在交叉凝集，易造成錯誤鑒定?，F(xiàn)將一株與鮑氏志賀菌交叉凝集的大腸埃希菌的鑒定及體會報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

桐鄉(xiāng)市腸道門診監(jiān)測點(diǎn)上送的鮑氏志賀菌，從細(xì)菌性痢疾疑似病例大便中分離所得。

1.2 檢測用儀器、培養(yǎng)基及試劑。

1.2.1 儀器

ATB生化鑒定儀。

1.2.2 SS、TSI、MIU培養(yǎng)基和微量生化反應(yīng)管由北京陸橋生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；ATB生化鑒定試劑條ID32E腸桿菌和其他非苛氧性革蘭陰性菌鑒定系統(tǒng)由法國梅里埃公司生產(chǎn)；志賀診斷血清（50種）由蘭州生物制品研究所生產(chǎn)；致病性大腸埃希菌診斷血清、產(chǎn)毒性大腸埃希菌診斷血清、侵襲性大腸埃希菌診斷血清和O157：H7診斷血清由寧波天潤生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。上述試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法

菌株經(jīng)普通肉湯增菌后劃SS瓊脂，置37℃培養(yǎng)24h，挑取可疑菌落接種于TSI瓊脂和MIU培養(yǎng)基，置37℃培養(yǎng)24h，用微量生化反應(yīng)管和ATB生化儀ID32E生化鑒定條進(jìn)一步生化鑒定，同時做血清凝集試驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 培 養(yǎng)特性和細(xì)菌形態(tài)

在SS瓊脂為無色、圓形、直徑約1.5mm、光滑、濕潤、凸起的半透明菌落；在TSI瓊脂表現(xiàn)為底層黃色，斜面紅色，不產(chǎn) H2S，不產(chǎn)氣；MIU培養(yǎng)特性為動力陽性，吲哚試驗(yàn)陽性，脲酶陰性；染色鏡檢：革蘭陰性無芽胞短桿菌。

2.2 生化特征

生化反應(yīng)結(jié)果為氧化酶陰性，苯丙氨酸脫氨酶微量生化反應(yīng)管陰性，葡萄糖胺微量生化反應(yīng)管陽性。ID32E生化鑒定結(jié)果生化譜64471553500，結(jié)果為大腸埃希菌，%id=99.9，T=0.19，見表1。

2.3 血清學(xué)試驗(yàn)

生理鹽水：-，鮑氏志賀1～6型血清：+++，鮑氏Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ各型血清均不凝集，腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌OK多價1：+++；O6：K15：+++，其余腸致瀉性大腸艾希菌診斷多價血清均不凝集，O157和H7血清均不凝集。

3 討 論

表1 ATB細(xì)菌鑒定儀ID32E生化鑒定結(jié)果

臨床上在檢測志賀菌時，為節(jié)約時間和成本，存在部分檢驗(yàn)人員接種SS、MAC平板后挑取不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵乳糖的菌落到TSI上，則報告檢出志賀菌。由于志賀菌屬與大腸埃希菌之間的DNA相關(guān)性很高，尤其是與腸侵襲性大腸埃希菌（EIEC）在生化特征上較難鑒別，在血清學(xué)上有交叉反應(yīng)[3]，容易把此種大腸埃希菌誤判志賀菌。

除EIEC外，產(chǎn)毒性大腸埃希菌與志賀菌生化相似血清交叉的也有文獻(xiàn)報道[4]。本次分離到的ETEC也不分解乳糖，分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，且與鮑氏志賀菌屬有交叉反應(yīng)，易判斷為志賀菌。但其動力、賴氨酸脫羧酶和葡萄糖胺均陽性，可基本排除志賀菌屬[5]，結(jié)合微量生化鑒定結(jié)果和ID32E生化鑒定結(jié)果及腸致瀉性大腸埃希菌診斷血清的凝集結(jié)果，判斷為腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌O6：K15型。因此SS培養(yǎng)基和三糖鐵反應(yīng)類似志賀菌株，某些致瀉性大腸埃希菌（DDEC）仍不能排除，即使是某些血清學(xué)反應(yīng)符合的菌株，也應(yīng)結(jié)合生化反應(yīng)結(jié)果才能做出判斷，否則會引起鑒定結(jié)果的錯誤。

[1] 高雯潔，張建平，沈志英，等.一株與福氏志賀菌1a交叉凝集的低活性大腸埃希菌[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17(11)：2115-2116.

[2] 齊小秋.痢疾防治手冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：47.

[3] 俞樹榮.微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗(yàn)[M].2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：174.

[4] 高亞色.檢出一株雙糖鐵反應(yīng)似志賀氏菌屬血清學(xué)交叉的產(chǎn)毒型大腸埃希菌[J].海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2005，11(5)：55-56.

[5] GB/T4789.5-2003.食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)志賀氏菌檢測[S].2003.