鄧明亮，紀素坤，張敏敏，郭愛珍

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點實驗室，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖北武漢 430070）

牛病毒性腹瀉的防控

鄧明亮，紀素坤，張敏敏，郭愛珍

（華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點實驗室，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，湖北武漢 430070）

牛病毒性腹瀉(BVD）又稱牛病毒性腹瀉-黏膜病，是由牛病毒性腹瀉病毒引起的一種病理過程復(fù)雜、臨床表現(xiàn)多樣的傳染病。急性病例以發(fā)熱、腹瀉、咳嗽、黏膜糜爛和潰瘍、白細胞減少為主要特征，但常表現(xiàn)為持續(xù)感染和免疫抑制，妊娠母?？杀憩F(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或畸形胎等癥狀。該病呈世界性分布，我國已有20多個省份報道了該病，并且感染情況日趨嚴重。該病毒除感染黃牛、奶牛和牦牛外，還感染羊、豬、鹿等多種家養(yǎng)和野生動物，嚴重威脅著我國畜牧養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，應(yīng)引起高度重視。

一、病原

牛病毒性腹瀉病毒屬于黃病毒科瘟病毒屬成員，是一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒。病毒粒子多呈球形，直徑約為23～50 nm。在分類學(xué)上與豬瘟病毒和邊界病毒同為一屬，抗原性有交叉。BVDV基因組長約12.5kb，包括5'端非翻譯區(qū)、一個大的開放閱讀框和3'端非編碼區(qū)。開放閱讀框編碼結(jié)構(gòu)蛋白（C、Erns或E0、E1和E2）和非結(jié)構(gòu)蛋白。根據(jù)病毒基因組5'-UTR序列不同可將BVDV分兩種基因型BVDV-1型和BVDV-2型，每種基因型又可分為多種基因亞型，我國主要流行BVDV-1b型。但近年來，我國開始出現(xiàn)BVDV-2型感染，并且感染率呈上升趨勢。BVDV-2型能引起持續(xù)感染和急性出血性綜合征，對牛的致病力更強，致死率更高。另外根據(jù)病毒對細胞的病變效應(yīng)，每種基因型可分為兩種生物型，即致細胞病理變化型和非致細胞病理變化型。本病毒能在胎牛腎、睪丸和肺，胎羊睪丸和豬腎細胞上增殖。急性高熱期病牛的血液和流產(chǎn)胎兒的脾和骨髓是常用于分離病毒的樣本。

該病毒對高溫敏感，在56℃下很快滅活，但在低溫下穩(wěn)定，真空凍干的病毒在-60℃～-70℃條件下可保存多年；對乙醚、氯仿、胰酶、pH3敏感。

二、流行病學(xué)

病毒可感染牛、羊、豬等多種家畜，以牛為主，各年齡的牛對該病均易感，以6～18月齡者居多。發(fā)病?？杀憩F(xiàn)為多種臨床癥狀如黏膜損害、腹瀉、肺炎、流產(chǎn)、出血性綜合征等急性感染癥狀。該病四季都有發(fā)生，冬季與早春多見，新疫區(qū)急性病例較多、發(fā)病率5%，死亡率高達90%以上，老疫區(qū)急性病例少、發(fā)病率和死亡率較低，而隱性感染率達50%以上。

隱性感染的主要形式是持續(xù)感染，其后果是損害機體的免疫機能，導(dǎo)致免疫抑制，增加其他病原體感染機會和疫苗的免疫失敗。持續(xù)性感染還導(dǎo)致感染畜天生具有免疫耐受性，體內(nèi)無BVDV抗體，因此不易被檢出，但一直帶毒并通過鼻涕、唾液、尿液、眼淚和乳汁等分泌物向體外排毒，成為該病危險的傳染源。

該病傳播途徑可為直接或間接接觸傳播，主要通過攝食被病毒污染的飼料、飲水而感染，也可因吸入因病畜咳嗽、劇烈呼吸噴出的傳染性飛沫而感染。另外運輸工具、飼養(yǎng)用具或者通過胎盤垂直感染、自然交配和人工授精等途徑也可以傳播該病。

三、臨床癥狀

根據(jù)臨床癥狀與發(fā)病過程，可分為急性和慢性兩種類型。

1.急性型。青年牛易發(fā)生，黏膜損害和腹瀉是主要癥狀。病牛發(fā)病急，高熱可達40℃～42℃，持續(xù)4～7 d后下降，有的出現(xiàn)體溫第二次升高；隨體溫升高白細胞減少，持續(xù)1～6 d，繼而白細胞數(shù)量又會增多，有的會發(fā)生第二次減少。病畜精神萎靡，厭食，呼吸急促伴咳嗽，鼻眼有漿液性分泌物；發(fā)病2～3 d后鼻鏡、舌、齒齦、腭、口腔黏膜充血并有潰瘍，流涎增多，呼出惡臭氣體。通常在口腔損傷之后發(fā)生嚴重腹瀉，腹瀉病牛的糞便從水樣逐漸到粘稠，含有大量粘液和氣泡，甚至帶血。病牛常在癥狀出現(xiàn)后5～7 d因嚴重脫水而死亡。

2.慢性型。該類型較少見。體溫只發(fā)生輕微波動，主要表現(xiàn)消瘦，鼻鏡潰爛，甚至連成一片；眼有分泌物，通常門齒齒齦發(fā)紅，但口腔里很少發(fā)生糜爛；蹄葉炎和趾間皮膚糜爛，病牛明顯跛行；可出現(xiàn)持續(xù)或間歇性腹瀉。多數(shù)病例在2～6個月內(nèi)死亡，也可達1年。妊娠母牛感染后可發(fā)生流產(chǎn)或產(chǎn)先天性缺陷犢牛。

四、病理變化

病理變化主要集中在消化道和淋巴組織。鼻鏡、鼻腔黏膜有小而淺的爛斑；消化道黏膜充血、出血和糜爛，尤以腸道變化最嚴重，腸道黏膜出現(xiàn)卡他性、出血性、壞死性、潰瘍性等不同表現(xiàn)的炎癥；真胃黏膜彌漫性出血和水腫，并伴有潰瘍。腸系膜淋巴結(jié)水腫，增大如棗樣，切口外翻，有混濁液體流出。運動失調(diào)的新生犢牛腦膜及腦膜下積水，心內(nèi)外膜出血。

五、診斷

可根據(jù)其流行病學(xué)、臨床癥狀及病理變化作出初步診斷，但牛感染時多為隱性感染，且該病易與其他疾病如牛瘟、口蹄疫、水皰性口炎、牛傳染性鼻氣管炎等病的臨床癥狀相混淆，因此確診有賴于實驗室檢查。

1.病毒分離和鑒定。急性發(fā)熱期可采集血液、眼鼻分泌物和尿液，死亡動物可采集甲狀腺、脾、腸系膜淋巴結(jié)、骨髓等材料。將病料負染和電鏡觀察，或接種于犢牛睪丸、腎、鼻甲細胞、胎牛肺細胞等牛源細胞作分離培養(yǎng)。

2.血清學(xué)診斷。常用的血清學(xué)診斷方法有血清中和試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、快速診斷試紙條等。血清中和試驗采取雙份血清（間隔3～4周），血清抗體滴度升高4倍以上者為陽性，該法可定性也可定量，但處于免疫耐受的牛不產(chǎn)生抗BVDV的抗體，血清學(xué)陰性，所以可能造成漏檢。酶聯(lián)免疫吸附試驗是用于檢測BVDV最廣泛的方法之一，具有特異性強、敏感性高、重復(fù)性好、可批量檢測等優(yōu)點，可用于檢測抗原或抗體。試紙條可用于快速檢測，操作簡單，不需特殊設(shè)備，也可檢測抗原或抗體。

3.分子生物學(xué)診斷。主要有反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR），該技術(shù)根據(jù)BVDV 5'端非翻譯區(qū)（5'-UTR）保守序列設(shè)計合成一對或幾對特異性引物，應(yīng)用RT-PCR技術(shù)對BVDV基因某段序列進行基因擴增。由于該方法高度特異靈敏性，得到了廣泛應(yīng)用。

六、防制

1.治療。本病無特效治療方法和藥物，實施對癥治療。由于本病引起的免疫抑制易導(dǎo)致其他病原體的繼發(fā)感染，在對發(fā)病牛進行對癥治療的同時，應(yīng)使用抗菌藥物（抗生素或磺胺類等）治療以減少繼發(fā)感染。針對病牛脫水電解質(zhì)平衡紊亂的情況可輸液擴充血容量并糾正酸中毒；腹瀉癥狀可投服收斂止瀉藥。用藥時需特別注意：急性感染牛禁用皮質(zhì)類固醇，因這類藥可加重消化道糜爛和潰瘍。對有飲食欲的?？捎眠m當劑量的阿司匹林進行退熱治療。

2.預(yù)防。需采取綜合性措施，進行全面預(yù)防。

（1）謹慎引牛，加強檢疫。堅持自繁自養(yǎng)，不從疫區(qū)購牛；對新購牛要用血清學(xué)診斷方法進行檢測，避免引入陽性牛。定期對牛群進行血清學(xué)檢查以便及時掌握本病在牛群中的流行狀況，如發(fā)現(xiàn)有少數(shù)牛出現(xiàn)抗體陽性，應(yīng)將其淘汰以防病情擴大。

（2）加強飼養(yǎng)管理，減少環(huán)境應(yīng)激。保持良好的環(huán)境衛(wèi)生，及時清除牛舍內(nèi)外、運動場上的糞便及其他污物，保持干燥并定期消毒。牛舍應(yīng)安裝通風(fēng)換氣設(shè)備，及時進行通風(fēng)換氣。

（3）做好免疫接種，提高機體免疫力。目前國內(nèi)有幾家單位都在研究新型疫苗，但尚無商業(yè)化國產(chǎn)疫苗問世。國外已經(jīng)有商品化的Ⅰ型和Ⅱ型毒株的減毒活疫苗和滅活疫苗。由于弱毒疫苗可導(dǎo)致妊娠母牛子宮感染引起流產(chǎn)或新生犢牛免疫抑制，因此妊娠母牛和6月齡以下的犢牛不能使用弱毒疫苗。弱毒疫苗接種年齡應(yīng)在9～12月齡。受威脅較大的牛群每隔3～5年接種1次，對育成母牛和種公牛應(yīng)于配種前再接種1次，多數(shù)牛可獲得終生免疫。也可將弱毒疫苗和滅活疫苗聯(lián)合使用提高免疫效果。有研究報道豬瘟兔化弱毒疫苗接種牛群可對該病提供保護，實際工作中也存在用豬瘟兔化弱毒疫苗接種牛群預(yù)防牛病毒性腹瀉的情況，但這種應(yīng)用的生物安全后果未進行過全面評估。

七、結(jié)語

牛病毒性腹瀉是呈世界性分布的重要傳染病，尤其在養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達的國家，這種疾病的發(fā)生更為嚴重，給養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。一些歐美國家已經(jīng)將此病列為重大疫病，并通過淘汰持續(xù)感染牛和疫苗預(yù)防接種等措施實施根除計劃，取得良好效果。隨著我國牛養(yǎng)殖量的增加，飼養(yǎng)方式向規(guī)?；图s化等現(xiàn)代養(yǎng)殖模式的轉(zhuǎn)變，我國養(yǎng)牛業(yè)受該病的威脅也越來越大。然而，我國對該病缺乏深入研究，流行病學(xué)資料不全，缺乏檢測試劑盒和疫苗等防控產(chǎn)品，給該病的防控帶來了很大困難。只有加強相關(guān)研究和技術(shù)推廣，并建立扎實完善的生物安全體系，通過對引牛、牛舍環(huán)境衛(wèi)生、預(yù)防接種、持續(xù)感染監(jiān)測、淘汰持續(xù)感染牛和牛群移動限制等多環(huán)節(jié)進行有效監(jiān)督和控制，最終達到凈化該病的目的。

（略）