顏 玲， 黃德斌

(湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院 ，湖北恩施445000)

現(xiàn)有資料表明，老年性癡呆 (Alzheimer disease，AD)的發(fā)病機(jī)制主要與神經(jīng)遞質(zhì)紊亂、自由基損傷、神經(jīng)元凋亡等密切相關(guān)［1］。中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system，CNS)神經(jīng)元軸突的生長是嘌呤敏感機(jī)制予以調(diào)控的一個基因表達(dá)程序［2］。這種特征性的基因表達(dá)程序?qū)τ谝呀?jīng)成熟的中樞神經(jīng)細(xì)胞來說，可被再次激活而誘導(dǎo)軸突生長與延伸［3］。有研究表明，海馬組織在缺血后，其c－fos mRNA的表達(dá)明顯增加［2］。這間接說明，至少c－Fos蛋白是促進(jìn)神經(jīng)結(jié)構(gòu)重塑并刺激神經(jīng)生長的重要因素。黃芪多糖(astragalan，AG)是從黃芪(Astragalus mongholicus)中提取的活性化合物，目前對于黃芪多糖的研究主要集中在調(diào)節(jié)免疫、抗氧化和延緩衰老的研究［1］，但未發(fā)現(xiàn)黃芪多糖對于海馬神經(jīng)遞質(zhì)和c－fos mRNA表達(dá)的研究。本研究采用大鼠大腦中動脈缺血再灌注的模型，探討AG在缺血性腦損傷后，海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及c－fos mRNA表達(dá)的影響。

材料和方法

1 材料

1.1 動物及分組 經(jīng)過行為學(xué)實(shí)驗(yàn)篩選合格的封閉群Wistar雄性大鼠100只(體重180～220 g)，購于重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心(醫(yī)動字4110302)。將大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組(sham－operated group，SOG)、模型組(model group，MG)、低劑量黃芪多糖治療組(low－dose astragalan treatment group，LAGTG)和高劑量黃芪多糖治療組(high－dose astragalan treatment group，H－AGTG)，每組10只。

1.2 器材及藥品 黃芪多糖(Sigma);氯化 －2，3，5三苯基四氮唑(TTC，Sigma);水合氯醛(上海金貿(mào)泰化工有限公司);乙酰膽堿(acetylcholine，ACh)ELISA檢測試劑盒由研域(上海)化學(xué)試劑有限公司提供;去甲腎上腺素/5－羥色胺［norepinephrine(NE)/5－h(huán)ydrotytryptamine(5－HT)］ELISA檢測試劑盒(96T，上海江萊生物科技有限公司);β－actin引物和c－fos引物由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司提供;MK3型酶標(biāo)儀;立體顯微鏡;單道可調(diào)加樣槍;多普勒血流探測儀;全自動生化分析儀;牙科鉆;MG96G型PCR儀由杭州朗基科學(xué)儀器有限公司提供;LG2020D型凝膠成像分析系統(tǒng)、JY300+型電泳儀以及JY－SCZ2型電泳槽由北京君意東方電泳設(shè)備有限公司提供;A1301026型低溫離心機(jī)由上海艾測電子科技有限公司提供;DQ300型Hoefer核酸蛋白熒光定量分析儀(上海吉泰生物科技有限公司提供)。

2 方法

2.1 動物處理［4］各組動物麻醉后(10%水合氯醛300 mg·kg－1，ip)，仰臥位固定，于右腹股溝處切開暴露股動脈并插管備用。于頸正中縱行切開約1～1.5 cm，逐層分離，分別暴露右側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈及頸外動脈。于插管的股動脈采血(作對照分析)后，MG、L－AGTG和H－AGTG組結(jié)扎并切斷頸外動脈及其分支，徹底止血，隨后沿頸內(nèi)動脈根部結(jié)扎其顱外分支(翼腭動脈)，應(yīng)用文獻(xiàn)［4－5］線栓法，由右頸外－頸內(nèi)動脈插入絲線(5－0，頭端粘有硅膠，連續(xù)而光滑，直徑0.21～0.27 mm)，制造右大腦中動脈阻塞再灌注模型［4］。隨后，沿著頸外動脈殘端插入同樣黑色尼龍絲線，沿頸外動脈與頸總動脈分叉處，輕輕向頸內(nèi)動脈推進(jìn)至頸內(nèi)動脈顱內(nèi)分叉處［進(jìn)線長度約(1.7±0.2)cm］，此時流入大腦中動脈的血流可被阻斷。在MG、L－AGTG和H－AGTG組缺血2 h后，輕輕拔退栓線至頸總動脈，按文獻(xiàn)［4－5］要求，缺血性腦損傷組選擇的再灌注時點(diǎn)分別為1 d、3 d和7 d。L－AGTG和H－AGTG缺血2 h后分別每天2 次 ip AG 5 mg·kg－1和15 mg·kg－1(以生理鹽水稀釋成2 mL)，直至處死取材。MG缺血2 h后分別每天2次注射等容量生理鹽水(ip)。SOG任何血管均不予以結(jié)扎、剪斷、插管和阻塞再灌流，只是假手術(shù)。各組動物室溫均保持在25℃左右，維持正常肛溫為(37.0±0.5)℃。

2.2 神經(jīng)功能缺損評分(neurologic impairment score，NIPS) 各組大鼠均按文獻(xiàn)［2，4］所擬 NIPS 法在造模前和處死取材前進(jìn)行評分，即:0分:無神經(jīng)功能缺失;1分:腦缺血的對側(cè)前肢出現(xiàn)屈曲;2分:自由活動時不向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈，手推腦缺血的對側(cè)肩部時，其肌抵抗力降低;3分:自由活動時向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈，手推腦缺血的對側(cè)肩部時，其肌抵抗力降低。

2.3 取材方法 參考文獻(xiàn)［6］，最后1次腹腔注射藥物后，所有大鼠禁食12 h斷頭取血，將頭迅速置于冰塊上開顱取腦，將取出的腦組織置于墊有冰盤的濾紙上，以生理鹽水沖洗3～5次，待腦組織血液清洗干凈后，小心剝?nèi)ゴ竽X皮層，暴露并剝離出完整海馬，左右兩側(cè)切開分離，左側(cè)海馬組織作為對照切片。左右兩側(cè)以生理鹽水沖洗干凈，用LKBⅢ型超薄切片機(jī)從前端開始連續(xù)海馬各區(qū)冠狀切片各3張(5～8 μm)，立即放入10%甲醛中，在恒溫37℃狀態(tài)下，避光進(jìn)行Bielschowsky嗜銀染色，30 min后觀察切片。每張片每個部位取10個視野，在光學(xué)顯微鏡下觀察神經(jīng)元情況。剩下海馬組織分別迅速放入5 mL的清潔塑料離心管，存冰箱中備用(－85℃)，分別檢測海馬勻漿ACh、5－HT、NE的含量以及海馬內(nèi)c－fos mRNA表達(dá)。

2.4 海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)測定 嚴(yán)格按ACh、5－HT和NE的ELISA檢測試劑盒說明進(jìn)行。

2.5 海馬組織總RNA提取與鑒定 參考文獻(xiàn)［7］，用RT－PCR法半定量分析海馬c－fos mRNA水平(用Trizol試劑提取海馬組織總RNA)。首先吸取60～80 mg海馬組織，加入Trizol 1 mL，用勻漿器勻漿至液態(tài)。將勻漿置入1.5 mL離心管中，于25℃靜置3 min后，4 000 r/min(4℃，離心力12 000×g)離心10 min，吸取上清液放入新的離心管，去除不溶組織沉淀。向上清液中加入氯仿200 μL，顛倒混勻15 s，于25℃靜置3 min，按上述操作繼續(xù)離心15 min。小心吸取上清液，加入到另一離心管中，加入異丙醇500 μL，搖勻。于25℃靜置10 min后，按上述操作繼續(xù)離心10 min，去除上清液，以1 mL 75%乙醇洗滌RNA沉淀，混勻后，以4℃離心力7 500×g離心5 min，去除上清液，于25℃干燥，沉淀RNA 5～10 min，用DEPC(二乙基焦磷酰胺)處理過的50 μL無菌水溶解RNA，55℃水浴助溶10 min。取5 μL進(jìn)行瓊脂糖甲醛變性膠電泳鑒定，再取5 μL加入DEPC處理的45 μL無菌水，用核酸蛋白熒光定量分析儀測定RNA含量，余下的RNA液存于－85℃冰箱備用。

2.6 c－fos mRNA的擴(kuò)增 反轉(zhuǎn)錄在20 μL反應(yīng)體積中進(jìn)行。按文獻(xiàn)［8］用AMV 反轉(zhuǎn)錄酶0.5 μL(1×107U/L)，dNTP 2 μL(10 mmol/L)，RNasin 0.7 μL(3×107U/L)，于42℃和95℃中分別變性45 min和5 min。PCR反應(yīng)體系于50 μL中進(jìn)行。其方法為:c－fos mRNA于94℃、62℃、72℃和55℃中分別延伸45 s、45 s、1 min 以及 5 min。β－actin mRNA 于94℃、58℃、72℃和55℃中分別延伸1 min、1 min、1 min以及5 min，共循環(huán)30次。β－actin的PCR產(chǎn)物長度為200 bp，上游引物5'－TCG AAT GGC TCC TAC ATT－3'，下游引物 5'－AGG TCA ACC AGA ACG GCA－3'。c－fos的PCR產(chǎn)物長度為400 bp，上游引物5'－ACG GCA CTT TAT ATT GAC－3'，下游引物為5'－TCC GGC TAT TAA AAT GAT－3'。

3 結(jié)果分析、圖像與統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

取PCR產(chǎn)物20 μL與緩沖液均勻混合后，在100V恒壓下于瓊脂糖凝膠中(濃度1.5%)電泳40 min后，將凝膠置于凝膠圖像分析儀(JY04S－3D)上予以分析和拍照，并對膠片灰度掃描，半定量分析目的條帶灰度值與β－actin條帶灰度值的比值。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，測得的數(shù)據(jù)用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。用單因素方差分析比較組間差異，兩兩比較用LSD法。神經(jīng)功能評分用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 AG對腦缺血再灌注大鼠NIPS的影響

結(jié)果顯示，各組隨時間延長，其NIPS顯著降低。L－AGTG和H－AGTG NIPS減少明顯強(qiáng)于MG，HAGTG又強(qiáng)于L－AGTG(P＜0.05或 P＜0.01)，呈明顯的劑量依賴性，見圖1。

Figure 1.Effects of AG on NIPS after cerebral ischemia reperfusion in rats.±s.n=10.*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs MG at the same time;△△P ＜0.01 vs 1 d in the same group;#P＜0.05，##P＜0.01 vs 3 d in the same group.圖1 AG對腦缺血再灌注大鼠NIPS的影響

2 腦缺血再灌注大鼠7 d海馬病理觀察

MG、L－AGTG和H－AGTG各時段除右側(cè)海馬CA1區(qū)有明顯改變外，其它各區(qū)與左側(cè)非缺血海馬相應(yīng)各區(qū)相似，改變不明顯，正常神經(jīng)元數(shù)量為(150±23)/mm2，無顯著差異(P＞0.05)。SOG左右兩側(cè)海馬CA1區(qū)未發(fā)現(xiàn)明顯的病理改變，神經(jīng)原纖維排列有序、稀疏，無神經(jīng)纖維纏結(jié)(NFT)，海馬錐體神經(jīng)元呈錐形，外形規(guī)則，細(xì)胞膜完整，可見有較大的頂樹突，細(xì)胞核多為圓形或橢圓形，核染色質(zhì)均勻清晰，正常神經(jīng)元數(shù)量為(148±21)/mm2;MG右側(cè)海馬CA1區(qū)神經(jīng)原纖維密集、排列紊亂，部分融合，凝集成寬帶狀，銀染加深，部分可見大量NFT，錐體細(xì)胞胞漿輕度腫脹，細(xì)胞核固縮，核染色質(zhì)濃縮，核膜不清，正常神經(jīng)元數(shù)量為(87±41)/mm2;L－AGTG 7 d右側(cè)海馬CA1區(qū)神經(jīng)原纖維排列部分紊亂，部分密集，可見少許NFT，正常神經(jīng)元數(shù)量為(109±34)/mm2明顯多于 MG而少于 SOG(P＜0.05或 P＜0.01);H－AGTG 7 d右側(cè)海馬CA1區(qū)神經(jīng)原纖維病變較MG明顯減輕，神經(jīng)原纖維排列有序，密集程度明顯緩解，未見NFT，正常神經(jīng)元數(shù)量為(127±28)/mm2，明顯多于 MG和 L－AGTG 7 d而少于SOG(P＜0.05或P＜0.01)。表明AG對缺血區(qū)海馬CA1區(qū)神經(jīng)元病理改變具有部分逆轉(zhuǎn)作用，而且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性，見圖2。

Figure 2.The sections of hippocampus CA1 region(Bielschowsky silver staining，×400).圖2 海馬CA1區(qū)切片

3 AG 對腦缺血再灌注大鼠海馬ACh、5－HT和NE的影響

腦缺血再灌注后，各組右側(cè)海馬組織ACh、5－HT和 NE含量有顯著差異。其中，MG海馬勻漿ACh和5－HT含量明顯低于SOG(P＜0.01)，表明海馬ACh和5－HT能神經(jīng)功能降低，AG能顯著增加海馬ACh和5－HT含量，且L－AGTG弱于HAGTG(P＜0.05)，呈現(xiàn)明顯的劑量依賴趨勢;結(jié)果還顯示，L－AGTG 7 d和 H－AGTG 7 d海馬ACh和5－HT含量與SOG相當(dāng)(P＞0.05)，表明AG雖能加速海馬勻漿ACh和5－HT含量的增加，但不能超過正常水平;腦缺血再灌注后，MG 1 d、3 d海馬NE含量顯著低于SOG(P＜0.01)，而后逐漸恢復(fù)至正常水平，與SOG相當(dāng)(P＞0.05)，且其恢復(fù)過程L－AGTG和H－AGTG相當(dāng)(P＞0.05)，見表1。

表1 AG對腦缺血再灌注大鼠海馬ACh、5－HT和NE的影響Table 1.Effects of AG on ACh，5－HT and NE content in rat hippocampus after cerebral ischemia reperfusion(±s)

表1 AG對腦缺血再灌注大鼠海馬ACh、5－HT和NE的影響Table 1.Effects of AG on ACh，5－HT and NE content in rat hippocampus after cerebral ischemia reperfusion(±s)

*P＜0.05，＊＊P ＜0.01 vs SOG;#P ＜0.05，##P ＜0.01 vs 1d in the same group;▲▲P ＜0.01 vs 3 d in the same group;△P ＜0.05，△△P ＜0.01 vs MG at the same time;○P＜0.05 vs L－AGTG at the same time.

Group n ACh(μg/g) NE(ng/g) 5－HT(ng/g)SOG 10 176.12 ±21.47 81.78 ±9.24 97.64 ±12.73 MG 1 d 10 98.09 ±17.43＊＊ 44.23 ±8.34＊＊ 51.57 ±15.32＊＊3 d 8 119.06 ±21.13＊＊# 57.17 ±9.73＊＊# 62.63 ±11.74＊＊7 d 9 137.34 ±18.06＊＊## 78.41 ±11.73##▲▲ 73.21 ±15.86＊＊##L－AGTG 1 d 10 103.76 ±25.72＊＊ 51.97 ±10.46＊＊ 57.63 ±18.91＊＊(5 mg·kg－1) 3 d 8 137.12 ±18.43＊＊## 63.63 ±14.74＊＊ 76.42 ±21.34＊＊##7 d 9 165.53 ±20.65##▲▲△△ 85.73 ±18.42## 89.65 ±11.54##△H－AGTG 1 d 8 107.27 ±15.98＊＊ 46.68 ±12.85＊＊ 67.82 ±9.53＊＊(15 mg·kg－1) 3 d 9 154.89 ±19.72*##△△ 64.09 ±14.68＊＊## 92.56 ±8.95##△△○7 d 8 183.71 ±22.48##△△ 83.23 ±16.73##▲▲ 103.74 ±13.46##△△○

4 腦缺血再灌注大鼠海馬β－actin與c－fos mRNA電泳結(jié)果

各圖泳道排列為從左至右依次是SOG、MG－7d、L－AGTG 7 d、H－AGTG 7 d 及 DNA marker。海馬RNA甲醛瓊脂糖變性膠電泳為3條帶，即28S、18S和5S，前兩條熒光信號較強(qiáng)，后一條帶熒光信號較弱。RNA的A250和A270比值為0.926，提示RNA的純度可靠，見圖3。β－actin與c－fos mRNA電泳條帶結(jié)果表明，L－AGTG 7 d與H－AGTG 7 d熒光信號顯著強(qiáng)于SOG和MG，而且H－AGTG 7 d強(qiáng)于L－AGTG 7 d。提示AG能顯著促進(jìn)β－actin與cfos mRNA 的表達(dá)，見圖4、5。

Figure 3.Hippocampus RNA in 1 d.圖3 各組1 d的海馬RNA條帶

Figure 4.RT－PCR results of hippocampus β－actin in 7 d.圖4 各組7 d的海馬β－actin條帶

Figure 5.RT－PCR results of hippocampus c－fos mRNA in 7 d.圖5 各組7 d的海馬c－fos mRNA條帶

5 大鼠海馬內(nèi)c－fos mRNA表達(dá)的半定量RTPCR測定

MG腦缺血再灌注后，隨時間的推移，海馬cfos灰度值/β－actin灰度值逐漸增加;H－AGTG海馬c－fos灰度值/β－actin灰度值增加顯著強(qiáng)于MG(P ＜0.05)，見表2。

表2 AG對腦缺血再灌注大鼠海馬c－fos mRNA表達(dá)的影響Table 2.Effects of AG on c－fos mRNA expression of hippocampus after cerebral ischemia reperfusion in rats(±s)

表2 AG對腦缺血再灌注大鼠海馬c－fos mRNA表達(dá)的影響Table 2.Effects of AG on c－fos mRNA expression of hippocampus after cerebral ischemia reperfusion in rats(±s)

*P ＜0.05 vs MG at the same time;△△P ＜0.01 vs 1 d in the same group;▲P ＜0.05;▲▲P＜0.01 vs 3 d in the same group.

Group n c－fos/－actin SOG 10 0.23 ±0.09 MG 1 d 10 0.28 ±0.12 3 d 8 0.32 ±0.11 7 d 9 0.48 ±0.14△△▲▲L－AGTG(5 mg·kg－1)1 d 10 0.24 ±0.08 3 d 8 0.41 ±0.13△△7 d 9 0.53 ±0.13△△▲H－AGTG(15 mg·kg－1)1 d 8 0.25 ±0.16 3 d 9 0.47 ±0.10＊△△7 d 8 0.61 ±0.14△△▲

討 論

黃芪多糖是從黃芪中提取的活性化合物，具有調(diào)節(jié)免疫、保護(hù)腦組織、促進(jìn)損傷神經(jīng)恢復(fù)、抗氧化、降低血糖、延緩衰老和促進(jìn)代謝等多種作用［9－10］。但沒有黃芪多糖改善腦神經(jīng)功能的相關(guān)報道，特別是沒有對海馬ACh、NE、5－HT以及c－fos mRNA表達(dá)的深入研究報道。本研究發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖能呈劑量依賴性地減少損傷神經(jīng)功能評分，改善腦功能狀態(tài)，部分逆轉(zhuǎn)海馬神經(jīng)元病理改變。

研究證實(shí)，海馬神經(jīng)遞質(zhì)ACh、NE、5－HT和多巴胺(DA)等的生理功能是增強(qiáng)機(jī)體適應(yīng)力和敏感性，保持覺醒和警覺狀態(tài)，確保人體學(xué)習(xí)力與注意力，促進(jìn)神經(jīng)信號傳遞。腦缺血首先導(dǎo)致腦急性能量代謝障礙，使得神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)外離子平衡失調(diào)，細(xì)胞內(nèi)積聚大量鈉鈣，導(dǎo)致細(xì)胞水腫，甚至破裂［11］。其中，海馬神經(jīng)元對缺血缺氧性損害極其敏感，特別是CA1區(qū)［12］。而海馬又是學(xué)習(xí)記憶的高級中樞，海馬的相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)含量直接反映學(xué)習(xí)記憶力［13］。腦缺血后，海馬的相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)合成、儲存障礙，導(dǎo)致與學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)減少，影響學(xué)習(xí)記憶力［12］。本研究證實(shí)，腦缺血后，海馬勻漿與學(xué)習(xí)記憶有關(guān)的ACh和5－HT含量明顯降低，表明海馬ACh和5－HT能神經(jīng)功能降低。當(dāng)使用黃芪多糖治療后，海馬ACh和5－HT含量顯著增加，顯著高于模型組(P＜0.05或P＜0.01)，且呈現(xiàn)明顯的劑量依賴趨勢。這些結(jié)果提示，黃芪多糖改善腦功能狀態(tài)至少與增加海馬神經(jīng)元 ACh、NE、5－HT 含量密切相關(guān)［11］。其增加這些神經(jīng)遞質(zhì)含量的機(jī)制，結(jié)合黃芪多糖對海馬神經(jīng)元病理改變研究的結(jié)果，認(rèn)為有可能是通過部分逆轉(zhuǎn)海馬神經(jīng)元病理改變或通過某種途徑促進(jìn)海馬神經(jīng)元的神經(jīng)遞質(zhì)合成。

當(dāng)腦缺血損傷消除后，受到損傷的神經(jīng)元就會逐漸修復(fù)，其修復(fù)再生過程必然伴隨相關(guān)物質(zhì)的表達(dá)［11］。相關(guān)研究報道，對記憶力具有雙向影響作用的c－fos mRNA在一定范圍內(nèi)的表達(dá)，能改善學(xué)習(xí)記憶力［14］。c－fos早期在腦中參與神經(jīng)元信號的整合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、分析與凋亡，與學(xué)習(xí)記憶及認(rèn)知功能相關(guān)［13］。其中低水平的c－fos表達(dá)，可能直接參與了神經(jīng)元的分化、生長、學(xué)習(xí)記憶以及神經(jīng)突觸的可塑性變化等多種生理過程［8，10］。其機(jī)制是 c－fos基因影響轉(zhuǎn)錄和翻譯控制下游靶基因轉(zhuǎn)錄而合成新的蛋白質(zhì)，影響學(xué)習(xí)記憶編碼，從而有利于學(xué)習(xí)記憶［13］。有研究報道，單純腦缺血再灌注，海馬CA1區(qū)c－fos原癌基因產(chǎn)物Fos有較高的表達(dá)，能促進(jìn)損傷神經(jīng)元的再生與重塑，加速缺血損傷后神經(jīng)元的修復(fù)［14］。這些表明，誘導(dǎo)腦內(nèi)c－fos基因的表達(dá)，都能增強(qiáng)人腦的學(xué)習(xí)記憶能力［9］。本研究發(fā)現(xiàn)，使用黃芪多糖治療大鼠的海馬CA1區(qū)神經(jīng)原纖維病變較模型組明顯減輕，神經(jīng)原纖維隨劑量增加和時間推移逐漸排列有序，密集程度明顯緩解，NFT最后消失，正常神經(jīng)元數(shù)量明顯多于模型組(P＜0.05或P＜0.01)。表明AG呈劑量依賴趨勢地部分逆轉(zhuǎn)海馬神經(jīng)元病理改變。研究還證實(shí)，假手術(shù)組海馬的c－fos mRNA表達(dá)顯著低于模型組(P＜0.05或P＜0.01)，表明腦缺血因素導(dǎo)致海馬c－fos mRNa表達(dá)的增強(qiáng)，通過促進(jìn)下游基因的表達(dá)而保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞。黃芪多糖治療組海馬c－fos mRNA表達(dá)均高于模型組(P＜0.05)，提示黃芪多糖可上調(diào)c－fos mRNA的表達(dá)。由此可以推論，黃芪多糖減少大鼠腦損傷神經(jīng)功能評分，可能是通過上調(diào)c－fos mRNA的表達(dá)，控制下游靶基因轉(zhuǎn)錄而合成新的蛋白質(zhì)，重現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶編碼，從而減輕海馬神經(jīng)元的凋亡，加速神經(jīng)元的分化、生長，促進(jìn)神經(jīng)元的再生與重塑，增強(qiáng)神經(jīng)元信號的整合、轉(zhuǎn)導(dǎo)與分析，最終有利于改善學(xué)習(xí)記憶及認(rèn)知功能［13］。這種上調(diào)c－fos mRNA表達(dá)的機(jī)制，我們將進(jìn)一步研究。

［1］ 焦俊霞，高維娟，錢 濤，等.黃芪有效成分對缺氧缺糖/復(fù)氧復(fù)糖大鼠海馬神經(jīng)元Cyt－c、CcO表達(dá)的影響［J］.中國藥理學(xué)通報，2011，27(2):211－215.

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