楊鑒冰 楊東艷 陜西中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦科（咸陽(yáng) 712000）

子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，EMT簡(jiǎn)稱內(nèi)異癥）是育齡婦女的高發(fā)病。文獻(xiàn)報(bào)道，在盆腔疼痛婦女中40%～60%有內(nèi)異癥［1］。本研究針對(duì)經(jīng)驗(yàn)方祛異康作用于內(nèi)異癥模型大鼠在達(dá)到治療作用的同時(shí)觀察對(duì)大鼠肝、腎臟器影響，從而為祛異康的臨床用藥提供可靠的依據(jù)。

1 材料與方法 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康SD雌性大鼠40只，體重150～180g，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供（動(dòng)物合格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字第08－005號(hào)）。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物 祛異康：由當(dāng)歸、赤芍、川芎、三棱、桂枝、丹參等中藥組成，購(gòu)于陜西中醫(yī)學(xué)院金秋門診，將上藥煎煮濃縮制備成2g／mL，藥液塑封儲(chǔ)于4℃冰箱；丹那唑（上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H31021681），用1%的甲基纖維素納溶解成8mg／mL的溶液。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 1.3.1 動(dòng)物模型制作與分組：大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后隨機(jī)分成4組，每組10只。空白對(duì)照組（A組）：只行開腹關(guān)腹術(shù)；模型組（B組）、丹那唑組（C組）、祛異康組（D組）均采用種植內(nèi)膜方法建立子宮內(nèi)膜異位癥動(dòng)物模型［2－3］。造模當(dāng)天肌注青霉素20萬U／次，2次／d，連續(xù)3d，造模后7d打開腹腔觀察異位內(nèi)膜生長(zhǎng)情況，以異位病灶呈米粒大小之結(jié)節(jié)，切面可見一線形閉合水孔，異位內(nèi)膜組織均形成囊狀，囊內(nèi)為無色透明液體，或囊內(nèi)形成多個(gè)串珠狀，周圍可見豐富血管形成，表明造模成功。術(shù)后第8dA組、B組用生理鹽水1mL／100g灌胃，1次／d；C組用丹那唑混懸液，含生藥8mg／（mL·100g）灌胃，1次／d；D組用祛異康煎劑，含生藥2g／（mL·100g）灌胃，1次／d，各組均連續(xù)灌胃28d，擇動(dòng)情期處死。

1.3.2 取材：各組動(dòng)物處死后分別取肝、腎臟稱重，并計(jì)算肝、腎臟臟器指數(shù)（臟器指數(shù)＝臟器重量／體重×100%）；將肝、腎臟固定于福爾馬林溶液中，石蠟包埋切片，HE染色。

1.3.3 判斷方法：肝臟病變程度分為5個(gè)等級(jí)：“－”：肝組織結(jié)構(gòu)正常；“＋”：肝細(xì)胞核濃縮，核分裂增多，枯否細(xì)胞增生；“＋＋”：肝細(xì)胞核濃縮、氣球樣變及嗜酸性變、中央靜脈擴(kuò)張，膽管輕度增生，少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；“＋＋＋”：肝細(xì)胞變性，有片狀肝壞死，膽管明顯增生，較多炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；“＋＋＋＋”：肝細(xì)胞變性壞死，肝索排列紊亂，膽管明顯增生，有少量纖維組織增生，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。腎臟病變程度分為4個(gè)等級(jí)：“－”：腎組織結(jié)構(gòu)正常；“＋”：少量腎曲管輕度腫脹，間質(zhì)未見炎癥浸潤(rùn)；“＋＋”：部分腎曲管腫脹，可見蛋白管型，間質(zhì)少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；“＋＋＋”：大部分腎曲管腫脹變性，間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。

1.3.4 統(tǒng)計(jì)方法：采用spass13.0軟件進(jìn)行檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用Wilcoxon等級(jí)分組秩和檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用（），兩組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果 2.1 各組大鼠肝臟重量及系數(shù)比較 模型組、祛異康組與對(duì)照組肝臟重量及系數(shù)比較均無明顯差異（P＞0.05），丹那唑組與對(duì)照組比較有顯著性差異（P＜0.05），見表1。

表1 各組大鼠肝臟重量及系數(shù)的比較（）

表1 各組大鼠肝臟重量及系數(shù)的比較（）

組 別 劑量（g／mL） n 肝臟重量（g） 肝臟指數(shù)對(duì)照組 － 97.77±0.643.89±0.33模型組 － 98.00±0.543.67±0.71丹那唑組 0.008 89.00±0.634.50±0.53祛異康組2 108.00±0.583.90±0.32

2.2 各組大鼠腎臟重量及系數(shù)比較 模型組、丹那唑組、祛異康組與對(duì)照組腎臟重量及系數(shù)比較均無明顯差異（P＞0.05）。見表2。

表2 各組大鼠腎臟重量及系數(shù)的比較（）

表2 各組大鼠腎臟重量及系數(shù)的比較（）

組 別 劑量（g／mL） n 腎臟重量（g） 腎臟指數(shù)對(duì)照組 － 92.44±0.531.22±0.44模型組 － 92.33±0.501.11±0.33丹那唑組 0.008 82.50±0.531.25±0.47祛異康組2 102.40±0.521.20±0.42

2.3 祛異康、丹那唑?qū)Υ笫蟾闻K病變程度的影響見表3。

表3 祛異康、丹那唑?qū)Υ笫蟾闻K病變程度的影響

2.4 祛異康、丹那唑?qū)Υ笫竽I臟病變程度的影響 見表4。

表4 祛異康、丹那唑?qū)Υ笫竽I臟病變程度的影響

2.5 大鼠肝、腎臟組織形態(tài)學(xué)變化 肉眼觀察對(duì)照組肝臟質(zhì)地柔軟、紅潤(rùn)有光澤，大小形態(tài)正常。鏡下見肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝板由單房肝細(xì)胞堆砌，肝細(xì)胞無腫脹變性，中央靜脈未見擴(kuò)張，匯管區(qū)膽管無增生（見圖1）。丹那唑組肝臟腫脹，個(gè)別肝臟呈暗紅色。鏡下見肝細(xì)胞水腫，部分肝板界不清，失去正常的組織結(jié)構(gòu)，肝竇枯否氏細(xì)胞增生，部分匯管區(qū)小血管周圍少量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等炎細(xì)胞浸潤(rùn)，周圍肝細(xì)胞水腫（見圖2）。祛異康組肝臟大小形態(tài)正常，鏡下見肝臟結(jié)構(gòu)大致正常，膽小管未見改變，匯管區(qū)未見炎細(xì)胞浸潤(rùn)，僅部分匯管區(qū)小膽管稍擴(kuò)張（見圖3）。對(duì)照組肉眼見腎臟色澤紅潤(rùn)，質(zhì)地柔軟，大小形態(tài)正常。鏡下見腎曲管及腎小球未見腫脹變性，間質(zhì)無炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，組織結(jié)構(gòu)正常（見圖4）。丹那唑組肉腎臟輕度腫大，鏡下見部分腎小管上皮細(xì)胞腫脹、增生，核深染，胞質(zhì)嗜堿，腎小管間毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血，腎小管腔內(nèi)蛋白滲出物，間質(zhì)未見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，部分腎小管內(nèi)伊浸紅色分泌物，腎小球大小形態(tài)基本正常，未見明顯病變（見圖5）。祛異康組腎臟大小形態(tài)正常。鏡下見個(gè)別腎小管內(nèi)伊紅色分泌物，間質(zhì)未見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)病，腎小球未見明顯改變（見圖6）。

3 討 論 子宮內(nèi)膜異位癥（EMT）是好發(fā)于生育年齡婦女的婦科疑難雜癥，近年來子宮內(nèi)膜異位癥的多發(fā)以及易發(fā)性已經(jīng)引起醫(yī)學(xué)界的廣泛重視，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)多采用激素療法或手術(shù)治療，療效不甚滿意［4］。祛異康方系三十多年的臨床治療經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，主要針對(duì)EMT瘀血內(nèi)阻，沖任氣血不通的病機(jī)所表現(xiàn)出的痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)、不孕、癥瘕等婦科病癥而設(shè)。在前期的臨床實(shí)踐觀察中已證明該方療效確切，可明顯改善臨床癥狀及體征［5－6］。為確保臨床用藥的安全性，故在前期工作基礎(chǔ)上，以治療EMT的西藥丹那唑作對(duì)比，進(jìn)一步研究祛異康方對(duì)大鼠肝、腎病理學(xué)的影響。

圖1 對(duì)照組正常肝臟組織 ×400

圖2 丹那唑組肝臟損害組織 ×400

圖3 祛異康組肝臟組織 ×400

圖4 對(duì)照組正常腎臟組織 ×400

圖5 丹那唑組腎臟組織 ×400

圖6 祛異康組腎臟組織 ×400

臟器系數(shù)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物某臟器的重量與其體重之比值。正常情況下各臟器與體重的比值相對(duì)恒定，動(dòng)物染毒后，受損臟器重量可以發(fā)生改變，故臟器系數(shù)也隨之而改變。臟器系數(shù)是毒理實(shí)驗(yàn)中常用的指標(biāo)。肝臟是動(dòng)物重要的代謝器官，來自體內(nèi)和體外的許多非營(yíng)養(yǎng)性物質(zhì)均需經(jīng)過肝臟的生物轉(zhuǎn)化作用；腎臟是毒物的主要排泄器官，易受到損害，往往是許多毒物的作用器官或靶器官［7］。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：丹那唑組作用于子宮內(nèi)膜異位癥動(dòng)物模型，連續(xù)用藥4周后，可造成大鼠肝臟中等程度的損害，如果用藥時(shí)間更長(zhǎng)，對(duì)肝臟損害更嚴(yán)重；而祛異康組對(duì)肝、腎無明顯組織形態(tài)學(xué)改變，祛異康與丹那唑相比，在治療子宮內(nèi)膜異位癥短期臨床用藥具有相對(duì)安全性。同時(shí)結(jié)合兩藥治療作用的研究，祛異康經(jīng)驗(yàn)方具有丹那唑不可比擬的優(yōu)勢(shì)，更適合于臨床選用治療子宮內(nèi)膜異位癥。

［1］宋作林.子宮內(nèi)膜異位癥的研究與臨床指南［M］.成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，2005：28－68.

［2］楊鑒冰，張朝紅.血瘀型子宮內(nèi)膜異位癥大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)雜志，2007，13（10）：774.

［3］鄭澄宇，楊冬梓，謝梅青，等.大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型的建立及其組織學(xué)觀察［J］.中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，22（2）：107.

［4］郎景和.子宮內(nèi)膜異位癥的研究和設(shè)想［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，2004，（38）：478－480.

［5］楊鑒冰，崔曉萍，孟巧絨，等.中藥?kù)町惪抵委熥訉m內(nèi)膜異位癥45例臨床觀察［J］.中國(guó)中醫(yī)急癥，2006，15（1）：35－36.

［6］楊鑒冰，樸芳姬.祛異康治療子宮內(nèi)膜異位癥30例臨床研究［J］.云南中醫(yī)中藥雜志，2006，27（5）：32－34.

［7］施新猷.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)［M］.陜西：陜西科技出版社，1998：37.