朱鳳瓊 吳林鍵

（1.云南省陸良縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陸良 655600；2.云南省陸良縣板橋鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，陸良 655602）

豬圓環(huán)病毒病主要是由豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）引起的豬傳染性疫病，嚴(yán)重影響生豬產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。我國自2000年報(bào)道和明確豬群中存在PCV2感染以來，隨著引種、生豬調(diào)運(yùn)等原因，流行范圍迅速波及全國。陸良縣是全國的養(yǎng)豬大縣和生豬調(diào)出大縣，近年來隨著國家對(duì)生豬養(yǎng)殖扶持力度的增加，各種規(guī)模的養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖小區(qū)不斷涌現(xiàn)，全縣各養(yǎng)殖場、養(yǎng)殖小區(qū)引種頻率加大，在引種過程中出現(xiàn)對(duì)引進(jìn)種豬的免疫情況、疫病流行情況不清楚，缺少嚴(yán)格隔離觀察和血清學(xué)監(jiān)測，為疫病的傳播、流行創(chuàng)造了條件。近年來很多豬場的母豬出現(xiàn)發(fā)情匱乏，仔豬消瘦、皮膚發(fā)白、腹瀉、呼吸困難，有的豬有黃疸，對(duì)豬瘟等疫苗接種形成免疫抑制，免疫抗體監(jiān)測達(dá)不到理想的抗體水平。對(duì)發(fā)情匱乏母豬和消瘦的仔豬進(jìn)行臨床診斷、病理剖解發(fā)現(xiàn)存在豬圓環(huán)病毒2型感染的可能。為摸清我縣豬圓環(huán)病毒病的流行、分布情況，我們從2009年到2011年的3年間應(yīng)用豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體試劑盒對(duì)豬圓環(huán)病毒病進(jìn)行抗體監(jiān)測，初步掌握了本縣豬圓環(huán)病毒病的流行、分布情況和規(guī)律，為制定該病的防治措施，提高母豬的生產(chǎn)情能，促進(jìn)生豬生產(chǎn)提供了依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 血清樣品

隨機(jī)對(duì)全縣未免疫豬圓環(huán)病毒2型疫苗規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶飼養(yǎng)母豬、仔豬和育肥豬前腔靜脈或耳靜脈無菌采血5 ml，靜置過夜自然分離血清，血清不少于1.5 ml、不腐敗、不溶血。

1.2 診斷試劑

豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體試劑盒，購自武漢科前動(dòng)物生物制品有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

用直接ELISA方法檢測豬血清中圓病毒2型抗體。

2 操作步驟

2.1 洗板2次后拍干 用樣品稀釋液將待檢樣品1：40稀釋后加入板孔中，每孔100 μl，同時(shí)將1：4稀釋的陰陽性對(duì)照血清各加2孔，每孔加100 μl，輕輕振勻孔中樣品（注意不要溢出），置37℃溫箱孵育30 min。

2.2 洗板5次后拍干。

2.3 每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗100μl，置37℃溫箱孵育30 min。

2.4 洗板5次后拍干。

2.5 每孔加入底物A液50 μl，再加底物B液50 μl，混勻，室溫避光顯色10 min。

2.6 每孔加終止液50微升，并在15分鐘內(nèi)測定結(jié)果。

2.7 結(jié)果判定 在酶標(biāo)儀上檢測各孔OD 630值。試驗(yàn)成立的條件是陽性對(duì)照孔平均OD 630值大于或等于0.7、陰性孔OD 630值必須小于0.3，待測孔OD 630值大于0.42判定為陽性；OD 630值在0.38和0.42之間，為可疑；OD 630值＜0.38則判定為陰性。

3 監(jiān)測結(jié)果

從2009年到2011年3年間，用豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體試劑盒對(duì)全縣生豬進(jìn)行監(jiān)測，共檢測血清樣品552頭（份），檢出陽性109份，陽性率為19.75%，其中，規(guī)模場樣品326份。其中，陽性73份，陽性率為22.29%；散養(yǎng)戶樣品226份。其中，陽性36份，陽性率為15.93%。平均陽性率為19.75%。詳見表1。

4 結(jié)果分析

目前，陸良縣所有生豬均沒有免疫豬圓環(huán)病毒2型疫苗，3年間的監(jiān)測平均陽性率為19.75%，說明PCV2感染在我縣已廣泛存在，豬群感染率較高；感染率呈逐年上升的趨勢；規(guī)模豬場的感染率高于散戶。針對(duì)本縣PCV2的存在情況，必須制定出科學(xué)合理的防制方法，才能減少生豬生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)損失。詳見圖1。

圖1 2009～2011年陸良豬感染圓環(huán)病毒病檢測陽性率對(duì)比柱形圖（%）

表1 2009年～2011年陸良縣豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測結(jié)果

5 防制措施

5.1 引種時(shí)要了解豬場免疫背景，做好檢疫監(jiān)測工作。不引進(jìn)存在潛伏感染的豬只、引種后嚴(yán)格進(jìn)行隔離觀察，無異常后方可混群。

5.2 做好種豬場、擴(kuò)繁場、供精站點(diǎn)的監(jiān)測，堅(jiān)決淘汰陽性種豬，防止通過精液、母體垂直傳播，切斷母源傳播疫病的機(jī)會(huì)，逐步建立健康的種用體系。

5.3 堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，及時(shí)清理糞污，消滅蚊蠅，并定期進(jìn)行徹底消毒，減少疫病傳入的機(jī)會(huì)。

5.4 按免疫程序做好豬瘟、細(xì)小病毒病、藍(lán)耳病、口蹄疫、豬偽狂犬等病免疫工作，減少繼發(fā)感染，在條件成熟的時(shí)候，通過實(shí)驗(yàn)可以適當(dāng)?shù)膶?duì)風(fēng)險(xiǎn)較大的豬群進(jìn)行豬圓環(huán)病毒疫苗免疫。

5.5 定期監(jiān)測，及時(shí)淘汰陽性豬只。要加強(qiáng)包括豬瘟、口蹄疫、豬偽狂犬、豬細(xì)小病毒、豬乙型腦炎等病的監(jiān)測工作，特別是對(duì)種豬場、擴(kuò)繁場更要做好監(jiān)測工作，依據(jù)監(jiān)測結(jié)果，淘汰陽性種豬，制定科學(xué)合理的免疫程序，通過監(jiān)測來指導(dǎo)免疫，使豬只的各種疫病的抗體保持在一個(gè)較高的水平，有效的防止各種疫病的發(fā)生。及時(shí)淘汰疫病監(jiān)測出的陽性豬只，逐步凈化豬場的疫病，建立良好的疫病防控休系。