童光志 (中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所 所長)
2010年冬季至今,我國許多豬場都發(fā)生了非常嚴(yán)重的仔豬腹瀉,造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。該病的主要特點是:易感豬群主要為2~10日齡的新生仔豬;臨床表現(xiàn)為嚴(yán)重腹瀉、嘔吐和脫水等,腹瀉之后部分腸管充氣,腸壁變薄,一些仔豬還出現(xiàn)了膽囊腫脹;發(fā)病率可達(dá)50%~100%,且死亡率較高;在某些豬場會反復(fù)發(fā)作,間隔時間約20天;持續(xù)時間較長,可達(dá)數(shù)月甚至半年;傳統(tǒng)的腹瀉病主要發(fā)生在較寒冷的冬季,而2012年炎熱的7~8月仍有很多腹瀉病發(fā)生。
引起腹瀉的原因分為非傳染性因素和傳染性因素。非傳染性因素包括營養(yǎng)性腹瀉、應(yīng)激、衛(wèi)生條件、環(huán)境因素、母豬無乳或減食等,其中營養(yǎng)性腹瀉主要由換料、霉菌毒素超標(biāo)、生熟料交替等原因引起。傳染性因素包括病毒、寄生蟲、細(xì)菌和真菌等。
由于腹瀉疾病的種類較多,每種病的病因和表現(xiàn)都有所不同 (表1),可參考流行特點、臨床癥狀和病理變化進(jìn)行初步診斷,同時結(jié)合實驗室檢測作出全面診斷。
目前檢測到感染率較高的腹瀉病毒有3種,即流行性腹瀉病毒 (PEDV)、傳染性胃腸炎病毒 (TGEV)和輪狀病毒(RV)。
多次病料檢測結(jié)果顯示PEDV是腹瀉的主要致病原因。2010年12月至2012年3月,使用PCR方法檢測了我國部分省市71個豬場的送檢病料,TGEV陽性率為50.7% (36/71),PEDV為74.6% (53/71),RV為19.7% (14/71), 庫布病毒為28.2% (20/71),其中PEDV陽性率最高,其次是TGEV和RV,庫布病毒的檢出率雖然很高,但健康豬群中的檢出率也很高。2011年2月至2012年4月,對來自4個直轄市和23個省的119個豬場442份病料進(jìn)行檢測,TGEV檢出率為29.2% (129/442), PEDV為73.7% (326/442), RV為6.8%(30/442)。通過對病毒全序列的比對,發(fā)現(xiàn)新流行PEDV的S基因與參考毒株存在5個不連續(xù)氨基酸的插入突變和2個連續(xù)氨基酸的缺失突變,該特征與韓國近年來流行毒株的特征相一致。因此,可以推測,國內(nèi)目前的流行性病毒可能來自于韓國。雖然流行性病毒腹瀉被普遍認(rèn)為是此次腹瀉流行的主因,但由于未分離到病毒,無法進(jìn)行回歸驗證。
表1 豬常見腹瀉病的臨床鑒別診斷
進(jìn)一步應(yīng)用病毒宏基因組學(xué)理論,結(jié)合454高通量測序和生物信息學(xué)以研究潛在的致病因素。雖然該方法不能真實反應(yīng)某一類病毒的真實感染率,但能篩選到很多未知的病原,其原理是將病料中所有病毒的序列都擴(kuò)增出來,利用454進(jìn)行大量測序,將序列結(jié)果在genebank中進(jìn)行比對。結(jié)果顯示,發(fā)病豬的病料中發(fā)現(xiàn)了多種病毒,來自6個省15個豬場的98份腹瀉糞便樣品中陽性率較高的三種病毒分別是庫布病毒 (56.12%)、星狀病毒 (53.06%) 和腸道病毒 (39.79%)。這三種病毒在正常豬群中都不是致病明顯的病毒,但有報道稱它們都可以引起腹瀉。由于沒有健康豬群的數(shù)據(jù)對比,無法肯定這三種病毒就是致病菌。2012年對來自河南、山東、上海、廣西4個省8個豬場的20份發(fā)病豬和9份健康豬的糞便樣品進(jìn)行宏基因組學(xué)方法分析,結(jié)果見表2。從表中可以看出,腹瀉病豬的糞便中流行性腹瀉病毒是優(yōu)勢病毒;庫布病毒在發(fā)病豬和健康豬的糞便中均可檢出,且檢出率相當(dāng)高;X病毒是以前從未檢測到的一種DNA病毒,病豬和健康豬均有檢出,目前此病毒已分離得到,但還未進(jìn)行回歸試驗。
表2 腹瀉仔豬病毒群落分析
引起腹瀉的病毒還有庫布病毒、豬博卡病毒、豬杯狀病毒、豬捷申病毒和星狀病毒等小RNA病毒和DNA病毒,這些病毒在豬群中的感染率非常高,但單獨致病力不強,可能是潛在的腹瀉病原。
庫布病毒于2007年在匈牙利的豬群中首次發(fā)現(xiàn),我國2009年由中國疾病預(yù)防和控制中心的于杰民等首次報道 (97/322)。豬博卡病毒于2009年首次在瑞典患仔豬斷奶多系統(tǒng)衰竭綜合征的豬體內(nèi)被鑒別。上海獸醫(yī)研究所在2010年建立了此病毒的PCR檢測方法,并進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查 (75/191),發(fā)現(xiàn)此病毒在我國豬群中感染率也很高。該病毒從細(xì)小病毒中分離得到,也會引起腹瀉。豬杯狀病毒包括諾如病毒和札幌病毒,屬RNA病毒。諾如病毒早在1968年于美國發(fā)現(xiàn),札幌病毒于1980年在日本札幌首次報道。豬捷申病毒與腸道病毒類似,可引起輕微的腹瀉,2003年和2009年在我國的豬群中均分離到該病毒。該病毒分離后進(jìn)行回歸試驗,結(jié)果顯示能引起輕微的腹瀉癥狀。星狀病毒是無囊膜的單股正鏈RNA病毒,病毒顆粒呈圓形,具有5~6個小角,呈星狀結(jié)構(gòu)。1980年,首次由Bridger通過電鏡在3周齡小豬的腹瀉糞樣中觀察到。Shimizu等 (1980)報道豬星狀病毒在豬群中普遍存在,而且常同冠狀病毒、嵌杯狀病毒、輪狀病毒等混合感染造成豬急性胃腸炎。我國上海交通大學(xué)華修國 (2010)等獲得一株能在PK-15細(xì)胞上生長的星狀病毒,這類病毒也會引起腹瀉。
腹瀉的傳播途徑有兩種,即垂直傳播和水平傳播。垂直傳播就是母豬將疾病傳染給仔豬,切斷此傳播途徑的最好方法是不給仔豬吃母乳,但是可操作性較小。水平傳播是腹瀉最廣泛的傳播方式,且傳播能力很強。目前,我國的生物安全大環(huán)境水平較低,動物的異地運輸和死淘動物的處理措施還不是很規(guī)范,人員流動及豬場的消毒不徹底都存在著傳播疾病的隱患。產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系的相關(guān)研究人員到豬場采樣,豬場將樣品送出檢測,這些都是易出問題的環(huán)節(jié)。一些豬場使用了不合格的疫苗,免疫后反而使其他疾病如牛的病毒性腹瀉的感染率升高,這可能是因為疫苗在制作過程中使用了污染的犢牛血清,引起了病毒的水平傳播。
目前,我國一部分豬場的圓環(huán)病毒病和藍(lán)耳病感染率較高,且藍(lán)耳病活疫苗使用較多后,也可能導(dǎo)致豬群的免疫力低下,引起潛在細(xì)菌和其他病毒的繼發(fā)感染。豬感染這兩種病毒后,也會發(fā)生腹瀉,使腹瀉的臨床表現(xiàn)更加復(fù)雜。因而,控制好藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒病可間接提高豬群的抵抗力,減少腹瀉病的發(fā)生。