王 留 王中華

（商丘職業(yè)技術學院動物工程系，河南省商丘市 476000）

副豬嗜血桿菌病是一種以多發(fā)性漿膜炎、關節(jié)炎及高死亡率為特征，嚴重危害2周齡到4月齡的仔豬和青年豬的傳染病，由副豬嗜血桿菌引起，發(fā)病率一般在10%～15%，嚴重時病死率可達50%，感染豬表現(xiàn)為多發(fā)性漿膜炎、關節(jié)炎、腦膜炎等。由于飼養(yǎng)技術調整不當、突發(fā)新的呼吸道綜合征等原因，使得該病在我國規(guī)?；?、集約化豬場已呈現(xiàn)出流行趨勢，危害日漸嚴重，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經濟損失。副豬嗜血桿菌在我國各地豬場引起多發(fā)性漿膜炎和關節(jié)炎的報道屢見不鮮，已從北京、黑龍江、遼寧、河南、湖南、寧夏、湖北、上海、福建、山東、河北等省市分離出副豬嗜血桿菌[1-3]。

商丘市幾個豬場出現(xiàn)疑似副豬嗜血桿菌病的病例，膘情良好的患病豬體溫可達40.5℃～42℃，精神沉郁，食欲下降，咳喘，鼻流膿涕，呼吸困難，皮膚、粘膜先發(fā)紅，稍后可見發(fā)紺，眼瞼水腫；部分病豬可見腕關節(jié)、跗關節(jié)腫大，行走緩慢或不愿站立，偶見嚴重患病豬出現(xiàn)共濟失調，瀕死期側臥或四肢呈劃水樣動作。

剖檢病死豬，可見多發(fā)性漿膜炎、關節(jié)炎、腦膜炎，胸腹腔積液色紅渾濁，胸腹腔臟器表面有黃白色的纖維素性滲出物，重者可致臟器發(fā)生粘連，見肺部發(fā)生肉樣變或出血，有些肺臟和胸壁發(fā)生粘連，氣管內分泌物明顯增多，心包積液；全身淋巴結尤其是腹股溝淋巴結腫大。

筆者采集病料后，進行病原的分離鑒定與藥敏試驗，并根據藥敏試驗結果選用敏感藥物進行臨床治療，取得很好的治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料

無菌采集病豬肺臟、心血、腹膜和胸腔積液。

1.1.2 試劑

胰蛋白胨大豆瓊脂 （TSA）、NAD、脲酶、氧化酶、接觸酶、吲哚、葡萄糖、半乳糖、果糖、蔗糖和核糖及各種藥敏試紙均購自杭州微生物試劑有限公司，恩諾沙星、環(huán)丙沙星、頭孢菌素、慶大霉素等藥物購自商丘市畜牧獸醫(yī)服務中心。

1.2 方法

1.2.1 細菌鏡檢

取病豬的心血、胸腔積液、肺組織涂（觸）片，干燥固定后進行革蘭氏染色。

1.2.2 分離培養(yǎng)

無菌取肺病變組織、心血、腹膜和胸腔積液劃線接種TSA平板，37℃厭氧培養(yǎng)36～48小時，挑取培養(yǎng)物涂片，革蘭氏染色鏡檢。

表1 生化試驗結果

表2 藥敏試驗結果

1.2.3 生化鑒定

挑取純化菌落接種脲酶、氧化酶、接觸酶、吲哚、葡萄糖、半乳糖、果糖、蔗糖、核糖等添加NAD(1μg/mL)的生化管中，放入含體積分數(shù)5%的CO2培養(yǎng)箱中 37℃培養(yǎng)3天后觀察結果。

1.2.4 藥敏試驗

吸取分離純化的菌液0.2 mL均勻的涂布在TSA平板上，再把圓形的藥敏試紙按一定的比例貼在TSA平板上，置 37℃的 5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48小時，觀察、測定抑菌環(huán)的大小。抑菌環(huán)直徑在15 mm以上為高度敏感,10 mm～15 mm為中度敏感，10 mm以下為低度敏感，無抑菌環(huán)為不敏感。

1.2.5 治療試驗

根據藥敏試驗結果，參考各發(fā)病豬場實際情況，在敏感抗生素中選取治療藥物，進行治療，觀察治療效果。

2 試驗結果

2.1 細菌鏡檢結果

取發(fā)病豬的心血、胸腔積液、肺組織等涂 (觸)片，革蘭氏染色、鏡檢可見革蘭氏陰性的細小桿菌。

2.2 分離培養(yǎng)結果

無菌取發(fā)病豬的肺臟、腹膜、胸腔積液和心血劃線接種TSA平板，置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，48小時后可見有針尖大小、圓形、邊緣整齊、灰白色半透明的小菌落生長。染色鏡檢呈革蘭氏陰性的小桿菌，以纖細桿狀居多。

2.3 生化鑒定結果

分離純化的菌液接種到NAD的生化管中，在5%CO2的培養(yǎng)箱培養(yǎng)（37℃）。結果符合副豬嗜血桿菌生化特性，試驗結果見表1。

共對5個發(fā)病豬場采集的10份病料進行了分離培養(yǎng)，成功分離并鑒定出副豬嗜血桿菌7株。

2.4 藥敏試驗結果

分離株對恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星等氟喹諾酮類及頭孢菌素、慶大霉素等高度敏感，對四環(huán)素、土霉素、林可霉素等藥物有一定的耐藥性，試驗結果見表2。

2.5 治療方案及結果

根據藥敏試驗結果，制定治療用藥方案，對以多發(fā)性漿膜炎為主要癥狀的病豬重點使用恩諾沙星或環(huán)丙沙星進行治療，對以關節(jié)炎為主要癥狀的病豬重點使用頭孢菌素或慶大霉素進行治療，共治療病豬128頭，治愈率89.8%，臨床治療效果良好。

3 討論與分析

通過對疑似副豬嗜血桿菌病的病豬進行病原分離和生化鑒定，成功分離出副豬嗜血桿菌7株，并對分離菌株進行藥敏試驗，發(fā)現(xiàn)發(fā)病豬場此前常用的四環(huán)素、土霉素、林可霉素等抗生素在藥敏試驗中表現(xiàn)最不敏感，而目前已較少使用的卡那霉素對該菌的抑菌效果相對較好，喹諾酮類和頭孢類藥物有較強的抑菌作用。

副豬嗜血桿菌病屬細菌性疾病，可以通過藥敏試驗選用敏感的抗菌藥物進行治療。國內文獻有關副豬嗜血桿菌不同地方分離株對各種抗菌藥物敏感性的報道不一，與不同地區(qū)流行菌株的血清型、耐藥性等因素相關[4-7]。

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[6]蔡旭旺，劉正飛，陳煥春，等.副豬嗜血桿菌的分離培養(yǎng)和血清型鑒定.華中農業(yè)大學學報,2005，24(1):55-58.

[7]黃小波，曹三杰，劉伍梅，等.豬偽狂犬病病毒豬圓環(huán)病毒Ⅱ型副豬嗜血桿菌和豬巴氏桿菌混合感染的診治.中國獸醫(yī)雜志，2009，(01)：21-23.