李東春，尹春博，閻 芳，閻英海

（1.天津市動物疫病預防控制中心，天津 300402；2.天津市獸藥飼料監(jiān)察所，天津 300402）

附紅細胞體病是一種以高熱、貧血、黃疸為主要癥狀的人畜共患病，由專性血液寄生的附紅細胞體寄生于紅細胞表面、血漿及骨髓中而引起。本病雖在人和多種畜禽及野生動物中均有發(fā)生，但以對豬發(fā)病報道的最多。目前報道發(fā)生本病的已有30 多個國家，我國從80 年代初就開始報道豬附紅細胞體病，但當時尚未引起足夠重視。近年來，隨著養(yǎng)豬業(yè)的不斷發(fā)展，該病的發(fā)生逐漸增多。尤其是2001 年以來對豬發(fā)生本病的報道急劇增加，本病不僅引起豬死亡，而且影響豬生長發(fā)育，出欄推遲，甚至引起種豬繁殖障礙，給養(yǎng)豬業(yè)和廣大養(yǎng)豬戶帶來了嚴重的經(jīng)濟損失。

1 病原學

1.1 分類

附紅細胞體是一種多形態(tài)生物體，對其分類一直存有爭議。根據(jù)《伯吉氏鑒定細菌學》（1984 年版）的分類，附紅細胞體屬于立克次體目，無漿體科,附紅細胞體屬[1]。但近年對豬附紅細胞體16S rRNA 基因序列的分析認為，豬附紅細胞體應歸屬于柔膜體目支原體屬，并改名為豬嗜血支原體[2]。

1.2 形態(tài)學特征

豬附紅細胞體呈多態(tài)性，環(huán)形、卵圓形、逗點形或桿狀等形態(tài)不一，大小為(0.3～1.3)×(0.5～2.6) μm。 常單獨或呈鏈狀附著于紅細胞表面，也可圍繞在整個紅細胞上，還有的游離在血漿中。豬附紅細胞體在發(fā)育過程中，大小和形狀也可發(fā)生改變。處于未成熟階段的豬附紅細胞體沒有感染性。

1.3 生物學特性

豬附紅細胞體對于干燥和化學藥劑抵抗力弱，但對低溫的抵抗力強。一般常用消毒藥均能殺死該病原，如在0.5%石炭酸中37 ℃，3 h 就可以被殺死；但在4 ℃時可保存15 d，在冰凍凝固的血液中可存活31 d，在加了15%甘油的血清中-79 ℃可保持感染力80 d，凍干保存可存活數(shù)年。豬附紅細胞體體外培養(yǎng)條件十分苛刻，目前尚不能在非細胞培養(yǎng)基上培養(yǎng)[3]。

2 流行病學

豬附紅細胞體主要在宿主的紅細胞表面、血漿以及骨髓中生存。豬附紅細胞體的生活史至今尚不清楚，故其自然傳播途徑也不十分明確。目前認為本病主要通過血液或含血的物質傳播，如舔食斷尾的傷口，互相斗毆或喝被血污染的尿而發(fā)生附紅細胞體感染。本病多發(fā)于夏秋季節(jié)或多雨天氣，吸血昆蟲(虱、刺蠅、牛虻、蚊子和疥螨等)是豬附紅細胞體病的主要傳播媒介。病原體可通過胎盤垂直傳播給胎兒；交配時，公豬也可通過血污染的精液傳染給母豬；此外，如消毒不徹底的注射、去勢、打耳號等，病原體則可經(jīng)傷口傳播。此外，豬附紅細胞體病的流行與不良的飼養(yǎng)方式、氣候條件等應激因素也有很大關系。

3 發(fā)病機理

豬附紅細胞體的細絲狀結構可嵌入紅細胞的細胞膜，使細胞膜產(chǎn)生小而深的凹陷和變形，通透性和脆性增加而發(fā)生溶血。另外，豬附紅細胞體引起的紅細胞膜結構和形狀的改變，可導致膜上原先被遮蔽的抗原表位暴露出來或者已有抗原發(fā)生變化，引起自身免疫性溶血而導致貧血[4]。據(jù)E.Luwig、Hoelzle等報道，豬附紅細胞體在紅細胞上的定位蛋白為HspA1 和MSG-1。

豬附紅細胞體急性感染可導致嚴重的血液凝固障礙，引起出血。

豬附紅細胞體聚集在紅細胞表面，削弱了紅細胞攜帶氧氣和營養(yǎng)物質的能力，使糖酵解增強，消耗血糖并產(chǎn)生大量乳酸，引起低血糖和酸中毒，從而使患豬出現(xiàn)呼吸、心跳加快和體溫升高等癥狀[5]。

4 臨床癥狀

潛伏期6～10 d，體溫可升高至40～42 ℃。根據(jù)病程長短可分為3 種類型。

4.1 急性型

少見，多表現(xiàn)為突然死亡，全身紅紫，指壓不褪色，有的患豬突然癱瘓，食欲廢絕，無端嘶叫或痛苦呻吟，肌肉顫抖，四肢抽搐。死亡時口、肛門排血。病程1～3 d。

4.2 亞急性型

患豬體溫升高達39.3～42 ℃，死前體溫下降。初期精神委頓，食欲減退但飲水增加，而后食欲廢絕，飲水量明顯下降或不飲，患豬顫抖轉圈或不愿站立，離群臥地，尿少而黃。病初便秘，糞球帶有黏液或黏膜，之后腹瀉，有時便秘和腹瀉交替出現(xiàn)。后期病豬耳朵、頸下、胸前、肢下、四肢內(nèi)側等部位皮膚紅紫，指壓不褪色，有時身體各部位皮膚的紅紫連成一片，整個豬呈紅色，所以常稱為“紅皮豬”。并且毛孔出現(xiàn)淡黃色汗跡，有的病豬流涎，呼吸困難，咳嗽，眼結膜發(fā)炎。病程3～7 d，或死亡，或轉為慢性經(jīng)過。

4.3 慢性型

患豬體溫在39.5 ℃左右，食欲不佳，主要表現(xiàn)為貧血和黃疸。患豬全身被毛粗亂無光澤，皮膚燥裂，層層脫落，但不癢。黃疸程度表現(xiàn)不一，皮膚和眼結膜呈淡黃色，有時皮膚呈現(xiàn)橘黃色。尿呈黃色，大便干如栗狀，表面帶有黑色至鮮紅色血液?；即瞬『螅律胸i因過度貧血而死亡；斷奶仔豬不能發(fā)揮最佳生長性能；肥育豬生長緩慢、出欄延遲；母豬常流產(chǎn)、死胎、不發(fā)情或發(fā)情后屢配不孕，乳頭腫大堅硬；公豬性欲減退，精子活力減低。此時，患豬易繼發(fā)其他疾病，引起全身出現(xiàn)膿腫、潰瘍、丘疹或結節(jié)，兩眼或一側眼結膜長期紅腫、流淚，有灰黃色眼屎，呼吸困難，咳嗽，腹瀉等。病程長，死亡或成為僵豬。

5 剖解變化

尸體消瘦，耳廓、腹下、四肢內(nèi)側有出血性紫斑，皮下脂肪黃染，血液凝固不良、稀薄、呈櫻桃紅色。肝臟土黃色，腫大，切面多汁呈黃色。膽囊腫大，膽汁充盈、黏稠、黃染。脾臟嚴重腫大，暗黑色，質地軟。腎包膜易剝離、外膜有散在的針尖或粟米大小的出血點。胃高度膨脹，胃、腸道、膀胱充血、出血。全身淋巴結充血腫脹。心包積液，心臟冠狀溝水腫。肺部無明顯變化，偶見細小壞死灶。

6 診斷方法

依據(jù)流行病學、臨床癥狀和剖解變化可對本病作出初步診斷，確診必須結合實驗室檢查，方法包括病原鏡檢、血清學方法，以及分子生物學技術等。

6.1 病原鏡檢

多以直接鏡檢為主，常采用鮮血壓片和涂片染色法。

6.1.1 鮮血壓片法

取靜脈血1 滴(可加入3.8%枸櫞酸鈉抗凝血)加到等量生理鹽水壓片鏡檢(400～1 000 倍)，見有紅細胞變形如針芒狀、鋸齒狀、菠蘿狀或不規(guī)則形狀且不停地上下抖動，紅細胞上有圓形或棒狀附著物、或血漿中有若干小顆粒，稱鮮血壓片陽性，可初步診斷為豬附紅細胞體病。

6.1.2 鮮血涂片染色鏡檢法

取鮮血1 滴推片，干燥固定后染色，置于高倍顯微鏡下可觀察到以下情況：瑞氏染色法見紅細胞周圍及血漿中有藍色顆?；蛘酃庑晕镔|，姬姆薩氏染色見紅細胞周圍及血漿中有紫紅色折光性顆粒，吖啶橙染色見紅細胞周圍及血漿中有黃綠色熒光物質。此外還可進行肝臟涂片染色鏡檢。

6.1.3 電鏡檢測

利用掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡可以研究豬附紅細胞體的形態(tài)、結構，侵襲紅細胞的方式，以及受損紅細胞的結構形態(tài)。由于電鏡價格因素以及切片制作等操作技術的復雜性使得該法在基層普及應用較為困難。

6.2 血清學方法

此類方法主要有補體結合試驗、間接血凝試驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗等。

國內(nèi)，張守發(fā)等[6]運用葡聚糖G200 色譜法純化豬附紅細胞體抗原，獲得了不與豬血清發(fā)生交叉反應的、特異性抗原，用該抗原建立的ELISA 方法的敏感性、特異性、穩(wěn)定性均高于間接血凝試驗。然而，該方法對于支原體肺炎、豬霍亂、豬大腸桿菌病和弓形蟲病鑒別性不強，存在交叉反應。Hozole等[7]用豬附紅細胞體重組抗原rMSG1、rHspA1 建立了ELISA 方法，其敏感性和特異性等同或高于天然抗原ELISA。但總的來說，血清學方法難以診斷慢性感染和潛伏期患豬，靈敏性還有待進一步提高。

6.3 分子生物學技術

用于檢測豬附紅細胞體的分子生物學技術主要包括核酸分子雜交技術和PCR方法兩大類，對后者的研究報道較多。

豬附紅細胞體的PCR 檢測技術最早由Gwaltney 于1995 年建立，其后得到較快的發(fā)展。PCR 方法具有快速、靈敏性高、特異性強的優(yōu)點，可以檢出潛伏期豬，是檢測隱性感染豬的一種較好的方法。國內(nèi)外最初多采用豬附紅細胞體的16S rRNA 基因序列作為靶序列進行檢測[8]。由于原核微生物的16S rRNA 基因有較高同源性，基于該序列的PCR 方法特異性往往不太高，易造成假陽性結果。之后研究者又對豬附紅細胞體的其他特異性基因進行了研究應用，以及采用單管巢式PCR 診斷方法提高了檢測的特異性和靈敏性[9-10]。實時熒光定量PCR 技術是近年來研究應用較多的一種分子生物學技術，它實現(xiàn)了對目的基因的擴增和結果檢測同時進行，與常規(guī)PCR 技術相比，自動化程度、靈敏性更高，且可以對病原體定量分析。Hoelzle 等[11]于2007 年利用保守的msg1 基因建立了熒光定量PCR檢測方法，敏感性較常規(guī)PCR 方法提高了4～40 倍，特異性為96.7%。由于國內(nèi)對豬附紅細胞體尚未進行系統(tǒng)的分子生物學分析，因此此類方法用于臨床檢測實踐還有待時日。

7 藥物治療

1）長效土霉素，每千克體重0.1 mL；或附紅優(yōu)，每千克體重12 mg；或錐滅定，每千克體重0.5 mg，一次肌肉注射；或青霉素8×104IU/kg + 鏈霉素5×104IU/kg，一次肌肉注射。此外，慶大霉素和卡那霉素合用也有一定的效果。

2）貝尼爾，每千克體重7 mg，種公豬及空懷母豬、肥豬一次肌肉注射，隔日一次。

3）附紅凈，每千克體重6 mg，妊娠及哺乳母豬一次肌肉注射，嚴重者隔日加強一次。仔豬7 日齡肌肉注射一次(將藥液稀釋，每千克體重0.1 mL)，斷奶時再加強一次。

8 防控措施

1）對病豬及檢測陽性豬應及時進行隔離。

2）加強環(huán)境消毒，發(fā)病期間豬舍內(nèi)每天2 次，場區(qū)及道路每天1 次。

3）加強飼養(yǎng)管理，盡量減少環(huán)境應激。保證飼料優(yōu)質、營養(yǎng)全面，減少中途變動配方。

4）搞好手術器械、針頭、牙鉗和耳號鉗等消毒工作，防止交叉感染。發(fā)病期間應嚴格做到1 頭豬1 個針頭。

9 討論

1）由于痊愈豬和健康豬的鮮血也大多存在鮮血壓片陽性的現(xiàn)象，故鮮血壓片法不宜作為確診豬附紅細胞體病的主要依據(jù)。

2）據(jù)報道，單純豬附紅細胞體感染的情況下，不會對豬群產(chǎn)生太嚴重的后果。但在當今豬病日趨復雜的情況下，豬場發(fā)病多以多因子致病為主，所以豬場在發(fā)生任意一種病時即宜采用聯(lián)合用藥和綜合防治措施。

3）因本病還沒有真正的特效藥可用，一般用藥只能起控制病情的作用，所以本病主要在預防，重在加強飼養(yǎng)管理，保持豬群的合理密度和減少環(huán)境應激。

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