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        中藥指紋圖譜技術(shù)的研究進(jìn)展

        2012-08-15 00:54:11
        科技視界 2012年29期
        關(guān)鍵詞:丹參指紋制劑

        趙 欣

        (陜西國(guó)際商貿(mào)職業(yè)學(xué)院步長(zhǎng)醫(yī)藥學(xué)院 陜西 咸陽(yáng) 712046)

        中藥指紋圖譜的定義分為廣義和狹義兩種,廣義上是指具有相關(guān)指紋特性的中藥的所有化學(xué)特征和生物學(xué)特征的圖譜,同時(shí)可對(duì)其進(jìn)行表征并加以描述。而狹義的指紋圖譜的概念則是指某種或者某個(gè)產(chǎn)地的中藥及其制劑等經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)那疤幚砗螅\(yùn)用一定的研究分析手段,得到的可以標(biāo)示中藥材及其制劑特征成分的共有峰圖譜[1]。

        1 指紋圖譜技術(shù)的形成及發(fā)展

        在19世紀(jì)末20世紀(jì)初,出現(xiàn)了“指紋”鑒定這個(gè)概念,最初指紋鑒定運(yùn)用于法醫(yī)和犯罪領(lǐng)域里,是根據(jù)每個(gè)人的手紋的結(jié)構(gòu)有著絕對(duì)唯一的差別,來(lái)區(qū)分個(gè)體身份的。也因此“指紋”技術(shù)也成了當(dāng)時(shí)一個(gè)標(biāo)志性的詞匯。后來(lái)隨著儀器和分子生物學(xué)的快速發(fā)展,在生命科學(xué)的研究領(lǐng)域里也開(kāi)始使用指紋分析技術(shù)來(lái)進(jìn)行研究,之后發(fā)展了蛋白組學(xué)指紋分析技術(shù),即利用種群和種群間的共性以及種群內(nèi)部個(gè)體間的差異,來(lái)進(jìn)行物種的鑒定的。隨著技術(shù)的迅速發(fā)展,中藥指紋圖譜技術(shù)也應(yīng)運(yùn)而生。早在上個(gè)世紀(jì)70年代,就開(kāi)始有學(xué)者用薄層色譜法指紋圖譜技術(shù)對(duì)中藥的定性鑒定分析進(jìn)行了研究。發(fā)展到上世紀(jì)90年代的時(shí)候,《中華人民共和國(guó)藥典》中很多中藥品種都已經(jīng)收錄了用薄層色譜指紋圖譜的方法用于其品種的鑒定,特別是薄層掃描儀、成像系統(tǒng)、自動(dòng)點(diǎn)樣器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的出現(xiàn)和發(fā)展更使得TLC指紋圖譜的運(yùn)用不在是幻想。到了21世紀(jì),指紋圖譜可以運(yùn)用在生物、食品、環(huán)境、石油、化學(xué)等很多領(lǐng)域的研究中,特別是在中藥和食品質(zhì)量的控制方面,有時(shí)還結(jié)合一定的分子生物學(xué)的知識(shí)。有學(xué)者通過(guò)吸收面積和體積排阻色譜(高效液相色譜法)分離蛋白質(zhì)組分面積的百分比值顯示與品質(zhì)性狀顯著相關(guān)性,說(shuō)明質(zhì)量特性與蛋白質(zhì)的分子量分布的關(guān)聯(lián)[2]。伴隨著更多更新的儀器的出現(xiàn)和發(fā)展,中藥指紋圖譜技術(shù)開(kāi)始向縱向快速發(fā)展,技術(shù)種類(lèi)越來(lái)越多,應(yīng)用范圍越來(lái)越廣。日趨完善的中藥指紋圖譜技術(shù)包括:TLC法指紋圖譜技術(shù)、GC法指紋圖譜技術(shù)、HPLC法指紋圖譜技術(shù)、NMR法指紋圖譜技術(shù)、XRD法指紋圖譜技術(shù)、IR法指紋圖譜技術(shù)、HSCCC法指紋圖譜技術(shù)、HPCE法指紋圖譜技術(shù)等。其中色譜法比較流行,而色譜法中的HPLC法應(yīng)用最為廣泛。

        2 中藥指紋圖譜的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展

        2.1 國(guó)內(nèi)研究進(jìn)展

        中藥是多組分的復(fù)雜體系,化學(xué)成分種類(lèi)豐富,同時(shí)又會(huì)受到中藥品種,產(chǎn)地,運(yùn)輸,加工等諸多方面的影響,所以對(duì)中藥及其制劑的質(zhì)量控制的研究一直是中藥及其制劑現(xiàn)代化和走向國(guó)際的瓶頸,一直是中藥及其制劑研究的一個(gè)重中之重,同時(shí)也是一個(gè)難點(diǎn)。而中藥指紋圖譜技術(shù)現(xiàn)在是國(guó)際社會(huì)公認(rèn)的用來(lái)鑒別中藥品種和質(zhì)量控制的最有效,最準(zhǔn)確,最直接的方法手段。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥相關(guān)領(lǐng)域?yàn)榱私鉀Q中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)方面的問(wèn)題,對(duì)中藥指紋圖譜技術(shù)進(jìn)行了大量深入的研究,也取得了很多值得祝賀的成績(jī)。杜程芳和屠鵬飛[3]以不同產(chǎn)地的白鮮皮藥材為材料,運(yùn)用反相高效液色譜梯度洗脫法建立了白鮮皮藥材的HPLC指紋圖譜,結(jié)果該指紋圖譜可以用來(lái)評(píng)價(jià)白鮮皮藥材的質(zhì)量;王斌等人利用在SGE 30QC3石英毛細(xì)管柱優(yōu)化色譜條件和分離測(cè)定條件的基礎(chǔ)上建立了魚(yú)腥草和金銀花包括這兩種中藥的下游制劑魚(yú)金注射劑的的揮發(fā)性成分GC指紋圖譜,同時(shí)對(duì)其圖譜的各共有峰進(jìn)行了相似性評(píng)價(jià),并對(duì)其中出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行了討論[4]。石榮等以已經(jīng)建立的大豆異黃酮HPLC指紋圖譜的方法為研究方法,選擇5個(gè)極性各異的代表樣品,在不同的儀器上進(jìn)行測(cè)定,研究了大豆異黃酮指紋圖譜中保留時(shí)間飄移及其校正的工作[5]。魏剛研究利用氣相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)石菖蒲的揮發(fā)油成分進(jìn)行了指紋圖譜的研究,得到了具有詳細(xì)數(shù)據(jù)信號(hào)的特征性指紋圖譜,并將其用到石菖蒲制劑的質(zhì)量判斷方面,同時(shí)還建立了廣藿香揮發(fā)油的氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的特征性指紋圖譜[6]。楊東風(fēng)等2007年建立了商洛GAP基地丹參水溶性和脂溶性成分的高效液相色譜指紋圖譜,并對(duì)不同產(chǎn)地,西藏產(chǎn)丹參的指紋圖譜進(jìn)行了研究和比較,他所建立的丹參指紋圖譜專(zhuān)屬性強(qiáng),能準(zhǔn)確的反映丹參的真實(shí)質(zhì)量,為GAP基地的建設(shè)和丹參的質(zhì)量控制提供了參考[7]。梁倩發(fā)表的文獻(xiàn)報(bào)道稱(chēng)已經(jīng)用氣相色譜建立了金銀花的揮發(fā)油成分的指紋圖譜,所建立的指紋圖譜專(zhuān)屬性和穩(wěn)定性都較強(qiáng),同時(shí)比較了不同產(chǎn)地的金銀花指紋圖譜的差異,為金銀花的質(zhì)量控制提供一些依據(jù)[8]。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的研究發(fā)展,中藥指紋圖譜技術(shù)在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)方面的作用和地位得到了業(yè)界廣泛的共識(shí),是否能將指紋圖譜技術(shù)用在中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面成為衡量一個(gè)企業(yè)是否有好的技術(shù)水平和好的管理水平的重要標(biāo)志之一。

        近年來(lái),隨著中藥現(xiàn)代化和國(guó)際化的要求,國(guó)內(nèi)對(duì)中藥進(jìn)行指紋圖譜技術(shù)的研究范圍越加廣泛,越加深入成熟。截止目前已經(jīng)建立了丹參、黃芪、天麻、三七等多種中藥及其制劑的指紋圖譜,尤其是建立了丹參的多元指紋圖譜,更標(biāo)志了中藥質(zhì)量控制的可控性已經(jīng)達(dá)到中藥現(xiàn)代化和國(guó)際化的要求,已經(jīng)具有國(guó)際先進(jìn)水平。

        2.2 國(guó)外研究進(jìn)展

        目前,國(guó)外對(duì)植物藥指紋圖譜研究的成果較豐富,德國(guó)和法國(guó)最先將指紋圖譜技術(shù)用到銀杏葉標(biāo)準(zhǔn)制劑EGB761的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)里,該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)總黃酮、總內(nèi)酯、槲皮素以及異鼠李素以及它們之間的比例等內(nèi)容都做出了明確規(guī)定,這讓植物藥在歐美的地位大幅度提高[9]。緊接著美國(guó)和加拿大的人參制劑也引入指紋圖譜的方法對(duì)其原料藥和標(biāo)準(zhǔn)提取物進(jìn)行分析比較,從原料開(kāi)始控制,以此來(lái)保證生產(chǎn)出來(lái)的人參制劑的品質(zhì),確保藥品的穩(wěn)定性,安全性和有效性。美國(guó)民間組織制定的美國(guó)草藥藥典(AHP)對(duì)已經(jīng)流向市場(chǎng)的熱點(diǎn)中藥和植物藥均進(jìn)行了調(diào)查研究,制定了比較全面的,有較強(qiáng)參考價(jià)值的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[10]。美國(guó)的FDA在植物藥制品指導(dǎo)原則中也允許申報(bào)者可以提交產(chǎn)品的相關(guān)色譜指紋圖譜的資料。英國(guó)草藥典、歐共體草藥質(zhì)量指南和印度草藥典都將指紋圖譜用來(lái)鑒別草藥的種類(lèi)的真實(shí)和質(zhì)量控制的一致。德國(guó)著名的生藥學(xué)家Wagner教授已經(jīng)建立了人參、黃芪等常用的不同產(chǎn)地的指紋圖譜,為其質(zhì)量控制提供科學(xué)的依據(jù)。Areias F M 2001年對(duì)葡萄牙北部產(chǎn)的薄荷葉中的酚類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行了研究,建立了其酚類(lèi)物質(zhì)的指紋圖譜,結(jié)果說(shuō)明薄荷葉的酚類(lèi)物質(zhì)的指紋圖譜可以用來(lái)鑒別薄荷的不同種,同時(shí)可以真實(shí)的反應(yīng)出薄荷的質(zhì)量。Gulnur Toker 2001年通過(guò)對(duì)從葡萄籽中提取出的黃酮物質(zhì)的指紋圖譜的建立,說(shuō)明黃酮指紋圖譜可以用來(lái)控制葡萄籽提取物的質(zhì)量[10]。隨著技術(shù)的不斷革新,中藥指紋圖譜技術(shù)的研究無(wú)論是國(guó)內(nèi)還是國(guó)外,無(wú)論是在技術(shù)上還是在應(yīng)用領(lǐng)域里都會(huì)有更好的發(fā)展,在將來(lái)也會(huì)有更多的技術(shù)手段被應(yīng)用到中藥指紋圖譜的技術(shù)當(dāng)中。

        [1]王永剛,吳忠,魏鳳環(huán),方鐵錚.中藥指紋圖譜研究的現(xiàn)狀與未來(lái)[J].中藥材,2003,26(11):820-825.

        [2]Ohm J B,.Ross A S,Peterson C J,Morris C F.Relationships of Quality Characteristics with Size-Exclusion HPLC Chromatogram of Protein Extract in Soft White Winter Wheats[J].Cereal chemistry,2009,86(2):197-203.

        [3]杜程芳,屠鵬飛.白鮮皮藥材的指紋圖譜研究[J].中國(guó)天然藥物,2003,1(2):94.

        [4]王斌,王燕,徐丹,梁振輝,孫文基.魚(yú)金注射劑指紋 GC圖譜的研究[J].中成藥,2004,25(4):365.

        [5]石榮,王少云,侯準(zhǔn),桑立紅.大豆異黃酮指紋圖譜中保留時(shí)間漂流的校正研究[J].色譜,2006,24(1):65.

        [6]魏剛.廣藿香GC-MS特征指紋圖譜’數(shù)字化”在藥材鑒定中的應(yīng)用模式研究[J].中成藥,2007,29(3):322.

        [7]楊東風(fēng).丹參藥材HPLC指紋圖譜及其質(zhì)量評(píng)價(jià)的研究[D].西北農(nóng)林科技大學(xué),2007:14-50.

        [8]Liang qian,Liang zong suo.Essential oil composition of salvia miltiorrhiza flower[J].Foal chemistry2009,113,592-594.

        [9]戴玉梅.中藥指紋圖譜技術(shù)發(fā)展概況[J].江西醫(yī)藥,2007,42(6):574-575.

        [10]翟宇君.天麻質(zhì)量評(píng)價(jià)及HPLC指紋圖譜的研究[D].西北農(nóng)林科技大學(xué),2009.

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