杜超群 楊最素

浙江海洋學(xué)院醫(yī)學(xué)院，浙江省舟山市 316004

用現(xiàn)代分離的方法從天然藥物中提取生物活性物質(zhì)是近年來(lái)研究的熱點(diǎn)。馬鞭草系馬鞭草科馬鞭草屬植物，學(xué)名Verbena officinalis，為一味性味苦的傳統(tǒng)中藥。始載于《名醫(yī)別錄》，列為下品。據(jù)《本草綱目》記載，馬鞭草的苗和葉可用于清熱解毒、利尿消腫，中國(guó)藥典則將其作為清熱、涼血、破血和消腫記載。馬鞭草在民間的應(yīng)用很廣泛，我國(guó)有25個(gè)民族藥用馬鞭草的情況，主要用于治療瘧疾、痢疾、急性胃腸炎、胃腹疼痛、月經(jīng)不調(diào)、閉經(jīng)、痛經(jīng)、白喉、咽喉腫痛、麻疹、感冒發(fā)燒、百日咳、牙周炎、口腔炎、肝炎、絲蟲(chóng)病、尿血、腎炎及水腫、淋病、癰腫瘡毒等多種病癥［1］。本文綜述馬鞭草及提取物在生殖器官疾病治療中作用的研究進(jìn)展。

1 對(duì)男性生殖器官疾病的治療作用

馬鞭草被稱為男科良藥，邱峰［2］將馬鞭草用于治療慢性前列腺炎收到較好的效果，配合其他中藥總有效率達(dá)94%。但用藥時(shí)劑量要大，一般干品用30g，鮮品50g以上。在服藥過(guò)程中未發(fā)現(xiàn)有明顯不良反應(yīng)。近年來(lái)，該藥還作為防治腎癌、前列腺癌等多種疾病的首選藥物，足見(jiàn)馬鞭草治療慢性前列腺炎的功效。

2 對(duì)女性生殖器官疾病的治療作用

王惠珍［3］用馬鞭草治療子宮內(nèi)膜異位癥，不僅能明顯緩解疼痛，還使子宮內(nèi)膜異位引起的包塊縮小，不抑制月經(jīng)來(lái)潮，且價(jià)格便宜，無(wú)毒副作用。若單用，可用馬鞭草30～50g，白米酒及水各半煎服或水煎服（酒水各半煎服者臨床療效更佳）。若加入復(fù)方中，則可用馬鞭草10～15g。并且可用于治療痛經(jīng)、陰癢及念珠菌性陰道炎等疾?。?，5］。

3 抗早孕作用

民間用馬鞭草作避孕藥。為證實(shí)馬鞭草抗早孕活性并確定其有效部位，張濤等［6］用馬鞭草甲醇滲漏粗提取物及其經(jīng)硅藻土柱分離的各部分提取物作了抗大鼠早孕作用的研究。結(jié)果證實(shí)馬鞭草甲醇粗提取物及其甲醇部分提取物具有非常顯著的抗大鼠早孕作用；而石油醚部分提取物、氯仿部分提取物組在實(shí)驗(yàn)中未顯示出抗大鼠早孕的作用。由此確定馬鞭草抗早孕作用的有效部位為其甲醇部分提取物。為探索馬鞭草抗早孕的有效成分，該學(xué)者將馬鞭草甲醇滲境提取物反復(fù)硅膠柱層析分離，理化常數(shù)和光譜分析鑒定化合物結(jié)構(gòu)，結(jié)果從馬鞭草甲醇提取物中分離并鑒定了3個(gè)環(huán)烯醚萜苷，分別為馬鞭草苷（Ⅰ），3，4－二氨馬鞭草苷（Ⅱ）和5－羥基馬鞭草苷（Ⅲ）。其中Ⅱ?yàn)樾碌奶烊换衔铮?］。并且發(fā)現(xiàn)該3個(gè)化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ均能興奮大鼠離體子宮平滑肌條，表現(xiàn)為收縮波頻率和振幅的同時(shí)增加，化合物Ⅰ較高濃度時(shí)對(duì)子宮肌條呈現(xiàn)先短暫興奮后持續(xù)抑制的作用，但它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上僅有取代基團(tuán)不同或母核還原程度的差異［8］。

為研究馬鞭草抗早孕是否通過(guò)蛻膜細(xì)胞的凋亡來(lái)實(shí)現(xiàn)的，張曙萱等［9］將馬鞭草的不同提取部位用于6～8周的早孕蛻膜組織，發(fā)現(xiàn)馬鞭草的石油醚提取液、氯仿提取液和乙酸乙酯提取液能抑制蛻膜細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，促進(jìn)蛻膜細(xì)胞凋亡，提示具有抗早孕的作用。這與張濤等的結(jié)果完全不同。而馬鞭草的甲醇提取液對(duì)蛻膜細(xì)胞無(wú)明顯影響，由此推測(cè)其抗生育的作用靶細(xì)胞可能不是蛻膜細(xì)胞。該實(shí)驗(yàn)為流產(chǎn)的機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并為開(kāi)發(fā)新型的避孕藥和抗早孕手段拓寬了視野。

4 抗子宮頸癌作用

沙灘馬鞭草為馬鞭草科馬鞭草屬植物的干燥地上部分，主要產(chǎn)于南美的巴拉圭，為中國(guó)產(chǎn)馬鞭草的同屬植物。在南美洲，民間將全草用于腹瀉、傷寒、發(fā)熱和一些性傳播疾病的治療。而有關(guān)沙灘馬鞭草及其提取物的相關(guān)藥理學(xué)作用研究主要集中在對(duì)神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）的增強(qiáng)作用方面。吳佳梅［10］從沙灘馬鞭草甲醇提取物中利用硅膠吸附柱色譜、Sephadex LH－20柱色譜和半制備型HPLC等方法分離，通過(guò)理化常數(shù)和光譜數(shù)據(jù)分析其結(jié)構(gòu)，分離提取到了16個(gè)單一成分的單體化合物，并進(jìn)行抗腫瘤初步篩查。發(fā)現(xiàn)16?；衔飳?duì)HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，出現(xiàn)了典型的凋亡形態(tài)改變，主要表現(xiàn)為細(xì)胞膜皺縮，表面有泡狀突起，胞核固縮變形，并可見(jiàn)典型的凋亡小體。該研究首次證實(shí)從馬鞭草種屬中提到的琨類16?；衔锞哂袕V譜的抗腫瘤活性，其對(duì)HeLa細(xì)胞有很強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制和誘導(dǎo)凋亡的作用及其分子量小等優(yōu)勢(shì)使其具有潛在的治療相關(guān)癌癥的藥用價(jià)值。

5 抗絨毛膜癌作用

經(jīng)徐珊［11］等研究發(fā)現(xiàn)馬鞭草醇提液（EV）對(duì)絨毛膜JAR細(xì)胞具有抑制作用且有特異性。而馬鞭草醇提液的氯仿部位，有明顯抑制作用，命名為有效C部位。研究表明一定濃度的馬鞭草C部位對(duì)JAR細(xì)胞具有抑制作用，其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制與Fas L的表達(dá)下調(diào)，Bax表達(dá)水平增加和Bcl－2表達(dá)水平下降有關(guān)［12］。有效C部位經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，得出黃色針晶化合物，鑒定為黃酮類化合物。經(jīng)紫外光譜、核磁共振氫譜及碳譜，并進(jìn)行文獻(xiàn)檢索，確定為4’－甲醚－黃芩素（4’－methyl ether－scutellarein，4－MS）。實(shí)驗(yàn)表明，4－MS能抑制人絨毛膜癌JAR細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)凋亡，阻滯細(xì)胞生長(zhǎng)于G2/M期、能提高JAR細(xì)胞內(nèi)Ca2＋濃度、降低hTERT mRNA和c－myc mRNA的表達(dá)，并與抑制Survivin抗凋亡活性，直接激活p38MAPK信號(hào)通路，活化Caspase 3有關(guān)［13～15］。

6 抗小鼠移植瘤作用

李卓等［16］將4－MS作用于人絨癌JAR/VP16耐藥細(xì)胞裸鼠移植瘤，其可顯著抑制耐藥性人絨毛膜癌裸鼠移植瘤體積的增長(zhǎng)，改善荷瘤鼠生存質(zhì)量并延長(zhǎng)裸鼠存活時(shí)間；形態(tài)學(xué)觀察瘤細(xì)胞有早期凋亡的形態(tài)學(xué)改變，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞凋亡率明顯增高；結(jié)果4－MS能有效逆轉(zhuǎn)裸鼠移植瘤組織對(duì)化療藥物VP16的耐受性，其機(jī)制可能與4－MS誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和下調(diào)耐藥相關(guān)基因mdrl mRNA、lrpmRNA及相應(yīng)蛋白P－gP和LRP的表達(dá)有關(guān)。

7 展望

馬鞭草是一種較常用的中草藥，馬鞭草全草中主要含有馬鞭草苷、5－二氫馬鞭草苷、桃葉珊瑚、熊果酸、2，4－二羥基齊墩果酸、β－胡蘿卜素等多種成分，廣泛分布于我國(guó)中南、西南及山西、甘肅、新疆、江蘇和浙江等地，價(jià)格低廉，因而廣泛應(yīng)用于基層醫(yī)療單位。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)其在臨床上的獨(dú)特藥效而備受關(guān)注，其應(yīng)用前景非常廣闊。

［1］王夢(mèng)月，賈敏如.25個(gè)民族藥用馬鞭草情況概述〔J〕.中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2002，8（2）：20.

［2］邱峰.馬鞭草治療慢性前列腺炎36例療效觀察〔J〕.吉林中醫(yī)藥，2002，22（6）：28.

［3］王惠珍.馬鞭草治療子宮內(nèi)膜異位癥〔J〕.中醫(yī)雜志，2001，42（6）：331.

［4］朱玲.馬鞭草治療念珠菌性陰道炎及流行性結(jié)膜炎〔J〕.中醫(yī)雜志，2001，42（6）：330.

［5］呂淑民.馬鞭草治療痛經(jīng)、陰癢〔J〕.中醫(yī)雜志，2001，42（6）：330.

［6］張濤，謝虹，李萬(wàn).馬鞭草提取物抗大鼠早孕作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中國(guó)中醫(yī)藥科技，2001，8（1）：30.

［7］張濤，阮金蘭，呂子敏.馬鞭草環(huán)烯醚萜苷類成分的研究〔J〕.中草藥，2000，31（10）：721－723.

［8］張濤，李萬(wàn)，阮金蘭.馬鞭草化學(xué)成分對(duì)大鼠離體子宮平滑肌條作用的研究〔J〕.中國(guó)中醫(yī)藥科技，2001，8（5）：313.

［9］張曙萱，王海琦，歐寧.馬鞭草提取液對(duì)體外培養(yǎng)人早孕蛻膜細(xì)胞的影響〔J〕.中國(guó)天然藥物，2004，2（4）：242－246.

［10］吳佳梅，方瑾.沙灘馬鞭草提取物對(duì)HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制及誘導(dǎo)凋亡作用的實(shí)驗(yàn)研究〔D〕.沈陽(yáng)：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，2010.

［11］徐珊，焦中秀，徐小晶，等.馬鞭草醇提液對(duì)絨毛膜癌JAR細(xì)胞增殖及表皮生長(zhǎng)因子受體表達(dá)的影響〔J〕.中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，31（4）：281，284.

［12］王家俊，羅莉，張立平，等.馬鞭草C部位使人絨癌JAR細(xì)胞阻滯于G2/M期并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡〔J〕.南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，24（6）：598－601.

［13］楊最素，羅莉，朱利群，等.4’－甲醚－黃芩素誘導(dǎo)絨毛膜癌JAR細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中草藥，2007，38（8）：1203－1206.

［14］楊最素，馮播，徐昌芬.4’－甲醚－黃芩素對(duì)絨毛膜癌JAR細(xì)胞c－myc表達(dá)的影響〔J〕.中藥新藥與臨床藥理，2011，22（5）：501－505.

［15］楊最素，馮播，徐昌芬.4’－甲醚－黃芩素誘導(dǎo)人絨毛膜癌細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理研究〔J〕.中藥藥理與臨床，2011，10：20－23.

［16］李卓，徐珊，徐昌芬.4’－甲醚－黃芩素對(duì)耐藥性人絨毛膜癌體內(nèi)逆轉(zhuǎn)作用的研究〔D〕.南京：南京醫(yī)科大學(xué)，2008.