張庭瑞，牛國(guó)一，李 想，畢俊龍，肖 瓊，李文貴

（云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南昆明650201）

戊型肝炎（Hepatitis E，HE）是由戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus，HEV）引起的人獸共患病毒性傳染病，主要經(jīng)糞-口途徑傳播，也可經(jīng)血液傳播。HE多呈散發(fā)性流行，偶爾也出現(xiàn)暴發(fā)性流行［1-2］。在散發(fā)性病例中，HE占急性肝炎總數(shù)的10%～20%。HEV主要侵害青壯年，孕婦感染后死亡率可以達(dá)到20%，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，是影響發(fā)展中國(guó)家的重要傳染性病原之一［3-4］。隨著對(duì)HEV動(dòng)物宿主研究的開(kāi)展，已在豬、牛、綿羊、山羊、狗、雞、鹿等多種動(dòng)物和病人中檢測(cè)到抗HEV抗體或病毒RNA［5］。

近年來(lái)，昆明市寵物犬的飼養(yǎng)數(shù)量正不斷增加。為了解昆明地區(qū)犬戊型肝炎的感染狀況，本研究采集昆明地區(qū)不同品種、年齡、飼養(yǎng)方式犬的血液樣本，用雙抗夾心ELISA進(jìn)行戊型肝炎病毒抗體（HEV-IgG）的檢測(cè)。研究結(jié)果可為掌握昆明犬群中戊型肝炎的流行情況、影響因素、防控措施等提供依據(jù)，為進(jìn)一步研究HEV的遺傳背景及種間傳播機(jī)制等奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 采集血液置于4℃冰箱中過(guò)夜，3 000r／min離心10min，分離血清置-20℃保存?zhèn)溆谩?011年5月～6月，共采集昆明地區(qū)不同品種、年齡、飼養(yǎng)方式的犬血清樣本91份。

1.1.2 儀器與試劑 戊型肝炎病毒抗體診斷試劑盒（雙夾心抗原ELISA）為北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。

1.2 方法

操作過(guò)程參照說(shuō)明書(shū)，根據(jù)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，分析待檢樣品中HEV的抗體陽(yáng)性率。城市、農(nóng)村飼養(yǎng)犬，不同性別犬間抗體陽(yáng)性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05時(shí)差異顯著，P＜0.01差異極顯著，應(yīng)用SPSS11.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 城市飼養(yǎng)犬與農(nóng)村飼養(yǎng)犬感染情況

檢測(cè)結(jié)果表明，91份血清樣品中18份呈陽(yáng)性，陽(yáng)性率為20%（表1）。農(nóng)村飼養(yǎng)犬感染率為27.0%，明顯高于城市飼養(yǎng)犬（6.0%），差異顯著（P＜0.05）。從HEV在人群、豬群中的流行特點(diǎn)看，應(yīng)與農(nóng)村衛(wèi)生條件較差有關(guān)系。

2.2 不同年齡階段犬感染情況

將91份血清樣品按年齡分為1歲以下、1歲～5歲、5歲～10歲、10歲以上4個(gè)組，比較昆明地區(qū)犬HEV感染的年齡差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)1歲以下組感染率為25.0%、1歲～5歲組感染率為17.0%、5歲～10歲組感染率為12.0%、10歲以上組感染率為0.0%。犬抗體流行率隨著年齡的增長(zhǎng)而降低（表2）。考慮到樣本量年齡分布不均，這一結(jié)論還需進(jìn)一步研究才能證實(shí)其可靠性。

2.3 不同品種犬感染情況

將91份血清樣品按品種分組，比較昆明地區(qū)不同品種犬間HEV感染的差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同品種感染率不同。以昆明犬最高（25.0%），其次為德國(guó)牧羊犬（14.2%），藏犬感染率為0%（表3）。其原因應(yīng)與藏犬品種好、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，飼養(yǎng)管理較為精細(xì)；而其他犬?dāng)?shù)量多，飼養(yǎng)管理粗放，衛(wèi)生條件相對(duì)較差等因素有關(guān)系。

表1 農(nóng)村和城市飼養(yǎng)犬HEV-IgG流行率比較Table 1 Prevalence of HEV-IgG in dogs feeding in Rural and urban areas

表2 不同年齡犬HEV-IgG流行率比較Table 2 Prevalence of HEV-IgG in dogs of different ages

表3 不同品種犬HEV-IgG流行率比較Table 3 Prevalence of HEV-IgG in dogs of different breed

2.4 不同性別感染情況

對(duì)91份樣品按性別進(jìn)行流行率比較的結(jié)果，雄性的HEV感染率為20%，雌性感染率僅為5%（表4），二者差異顯著（P＜0.05）。

表4 不同性別HEV-IgG流行率比較Table 4 Prevalence of HEV-IgG in dogs of different gender

3 討論

戊型肝炎是一種新發(fā)現(xiàn)的人獸共患病，在各種動(dòng)物中的流行較為普遍。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)多種非人靈長(zhǎng)類(lèi)（黑猩猩、短尾猴、恒河猴、梟猴、非洲綠猴等）、豬、野豬、鹿、貓鼬、嚙齒類(lèi)、狗、貓、綿羊、山羊、牛、驢、雞、貝類(lèi)等動(dòng)物可以自然或人工感染HEV。越來(lái)越多的資料表明，與人類(lèi)生活密切相關(guān)的寵物犬、工作犬也有感染［6］。目前，關(guān)于HEV在動(dòng)物之間的傳播機(jī)制，人源HEV與動(dòng)物源之間的進(jìn)化關(guān)系等尚不清楚。

我國(guó)各地犬HEV抗體陽(yáng)性率普遍較高。桑志迪等［7］對(duì)上海市寵物犬的研究表明HEV抗體陽(yáng)性率為21.4%。鞠龔訥等［8］對(duì)上海市徐匯區(qū)、普佗區(qū)采集的101份的犬血清樣的調(diào)查結(jié)果，HEV抗體陽(yáng)性率為17.8%。汪登如等［9］對(duì)昆明流浪犬、養(yǎng)殖場(chǎng)犬和家庭散犬的調(diào)查表明，流浪犬HEV抗體陽(yáng)性率高達(dá)72.5%（29／40），養(yǎng)殖場(chǎng)犬為 33.9%（22／65），家庭散養(yǎng)犬為48.5%。韋獻(xiàn)飛等［10］2005年3月～2006年9月對(duì)廣西柳州市及周邊地區(qū)采集豬、鼠、狗血清標(biāo)本共534份，檢測(cè)結(jié)果犬血清抗HEV IgG陽(yáng)性率為25.7% （27／105）。本次調(diào)查結(jié)果，昆明地區(qū)飼養(yǎng)的各品種犬HEV抗體陽(yáng)性率為20%，與各地流行情況接近，但低于汪登如等［11］對(duì)昆明地區(qū)犬的調(diào)查結(jié)果，調(diào)查中含流浪犬（72.5%）和農(nóng)戶散養(yǎng)犬（48.5%），感染率較高。原因在于戊型肝炎主要經(jīng)消化道傳播，與衛(wèi)生條件密切相關(guān)。而此次調(diào)查的是城區(qū)居民飼養(yǎng)的寵物犬，衛(wèi)生條件和管理水平相對(duì)較好。

由于HE的流行與衛(wèi)生條件有密切的關(guān)系，往往農(nóng)村高于城市、發(fā)展中國(guó)家高于發(fā)達(dá)國(guó)家。豬群中的流行散養(yǎng)豬高于集約化飼養(yǎng)豬。城區(qū)飼養(yǎng)的犬只主要為寵物犬和工作犬，飼養(yǎng)管理規(guī)范，衛(wèi)生條件較好，而農(nóng)村飼養(yǎng)犬衛(wèi)生條件要差得多。可以預(yù)期農(nóng)村飼養(yǎng)犬的感染率應(yīng)該高于城市，本次調(diào)查結(jié)果和前人的調(diào)查結(jié)果都證實(shí)了這一點(diǎn)［12-13］。

犬HE流行具有明顯的品種差異和性別差異。桑志迪等［7］調(diào)查發(fā)現(xiàn)各品種寵物犬中杜賓犬的HEV感染率較高，感染率為33.3%。剛毛犬HEV的感染率為14.3%，雪納瑞犬的感染率為25.0%，德國(guó)牧羊犬與可卡犬的感染率均為20.0%，金毛犬的感染率為11.1%。各寵物犬中雌性HEV抗體陽(yáng)性率為34.4%，雄性HEV抗體陽(yáng)性率為8.5%。本研究結(jié)果表明，昆明犬最高（25.0%），德國(guó)牧羊犬和其他犬次之，藏犬全部陰性。這一結(jié)果應(yīng)與昆明犬?dāng)?shù)量多，飼養(yǎng)管理不規(guī)范，多分布于農(nóng)村地區(qū)飼養(yǎng)，環(huán)境較差等因素有關(guān)。而藏犬、德國(guó)牧羊犬由于品種好，飼養(yǎng)管理較為精細(xì)，管理規(guī)范，所以感染率低。

受樣品數(shù)量等方面的限制，本次調(diào)查結(jié)果不能完全代表昆明市寵物犬中HEV的感染實(shí)際情況，但也證實(shí)昆明地區(qū)各類(lèi)犬只中普遍存在HEV感染。目前，昆明地區(qū)犬的飼養(yǎng)數(shù)量還在不斷增加［9］，日常生活和工作中，犬只和人類(lèi)的接觸也越來(lái)越密切，相關(guān)管理部門(mén)和科研工作者應(yīng)密切關(guān)注HEV在人-犬間傳播的潛在風(fēng)險(xiǎn)。

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