宋士剛 楊在賓 楊維仁 姜淑珍 張桂國 魏建東

（1.東營(yíng)市華譽(yù)飼料有限公司，山東廣饒257300；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東泰安271018）

隨著畜牧業(yè)的發(fā)展，抗生素在畜禽養(yǎng)殖中得到越來越普遍的應(yīng)用，其抑菌促生長(zhǎng)的功效得到廣泛的認(rèn)可，但是抗生素在動(dòng)物機(jī)體中的殘留也逐漸得到社會(huì)的關(guān)注，因此尋找可以代替抗生素且能達(dá)到與抗生素相近效果的添加劑成為研究的熱點(diǎn)。這類添加劑的種類繁多，有抗菌肽類、植物提取物類等，本研究以抗菌肽為試驗(yàn)材料，旨在研究抗菌肽對(duì)肉雞生產(chǎn)性能及抑菌功效影響的研究，為抗菌肽在肉雞養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與設(shè)計(jì)

抗菌肽由上海邦成生物有限公司提供；抗生素為10%硫酸黏桿菌素。

選取1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞480只,隨機(jī)分為6個(gè)處理(每個(gè)處理4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只)。本試驗(yàn)分6個(gè)處理研究不同添加水平的抗菌肽對(duì)肉仔雞應(yīng)用功效的影響。處理1為對(duì)照組(control,無抗生素和抗菌肽)；處理2為抗生素對(duì)照組(control+CS)，即處理1基礎(chǔ)上添加20mg/kg硫酸黏桿菌素(CS)；處理3～6為試驗(yàn)處理組，在處理1基礎(chǔ)上分別添加抗菌肽250、500、1 000、2 000mg/kg（即：control+250mg/kg AP，con?trol+500mg/kg AP，control+1 000mg/kg AP，control+2 000mg/kg AP）。肉雞分兩個(gè)飼養(yǎng)期，即1～21日齡和22～42日齡。日糧參照中華人民共和國肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 33—2004)和AA肉雞推薦飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)(見表1)。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（%）

肉雞在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞試驗(yàn)雞舍進(jìn)行飼養(yǎng)，自由飲水和采食。第一周溫度保持在32℃，之后每周逐漸降低3℃，直至降至26℃為止。另外第一周保持連續(xù)光照，之后每6 h停止光照0.5 h。

1.2 樣本采集

在肉仔雞21和42日齡時(shí)，從每個(gè)重復(fù)中抽取2只與平均體重相近的肉雞進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。先稱重記錄宰前活重，將試驗(yàn)雞宰殺，分離胸肌、腿??；同時(shí)將盲腸端口用細(xì)線結(jié)扎，用鋁箔紙包好后放于0℃恒溫箱保存以待后續(xù)測(cè)定。

1.3 測(cè)定指標(biāo)

1.3.1 生產(chǎn)性能

在肉雞0、21和42日齡時(shí),稱每個(gè)重復(fù)肉雞重；每周記錄每個(gè)重復(fù)采食量,從而計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量（ADFI）和料重比（FCR）。

1.3.2 屠宰性能

21和42日齡進(jìn)行屠宰試驗(yàn)時(shí)，屠體重為肉雞放血去除羽毛后的重量；半凈膛重為肉雞屠體重去氣管、食道、嗉囊、腸、脾、胰、膽和生殖器官。保留心、肝、腎、腺胃、肌胃(去角質(zhì)膜和內(nèi)容物)、腹部板油、肌胃周圍的脂肪和肺、腎的重量；全凈膛重為肉雞半凈膛重去除心、肝、腺胃、肌胃、脂肪及頭、腳的重量。其中全凈膛率、胸肌率和腿肌率的計(jì)算公式如下：

1.3.3 微生物指標(biāo)

在肉雞21和42日齡屠宰試驗(yàn)中分別取盲腸并結(jié)扎盲腸末端后厭氧保存。在無菌條件下將盲腸用手術(shù)刀片刮破盲腸，稱取其內(nèi)容物后置入裝有玻璃珠的100 ml滅菌生理鹽水的三角瓶中，振蕩20 min后進(jìn)行微生物的測(cè)定。測(cè)定前做測(cè)定細(xì)菌總數(shù)（好氧菌）、乳酸菌和大腸桿菌的預(yù)試驗(yàn)，確定最佳稀釋倍數(shù)。

細(xì)菌總數(shù)（好氧菌）用營(yíng)養(yǎng)瓊脂（海博生物科技，HBPM002）測(cè)定。將培養(yǎng)基傾入90 mm培養(yǎng)皿中，37℃預(yù)培養(yǎng)24 h，吸取0.1 ml菌液稀釋液滴注在預(yù)培養(yǎng)的空白培養(yǎng)基上，重復(fù)3次。37℃培養(yǎng)24 h，計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

乳酸菌數(shù)用MRS培養(yǎng)基（海博生物科技，HBPM 0384）測(cè)定。吸取0.1 ml菌液稀釋液注入空培養(yǎng)皿中，然后50℃左右的MRS培養(yǎng)基，搖勻、冷卻后倒置培養(yǎng)，重復(fù)3次。37℃培養(yǎng)48 h，計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

大腸桿菌選擇麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（海博生物科技，HBPM016）測(cè)定。將培養(yǎng)基傾入90 mm培養(yǎng)皿中，37℃預(yù)培養(yǎng)24 h，吸取0.1 ml菌液稀釋液滴注在預(yù)培養(yǎng)的空白培養(yǎng)基上，重復(fù)3次。37℃培養(yǎng)24 h，計(jì)數(shù)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)處理采用EXCEL和SAS9.1軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，方差分析使用One-way ANOVA，顯著性水平P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加不同水平抗菌肽對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響（見表2）

表2 抗菌肽對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知,日糧中添加粘菌素和抗菌肽能夠提高肉仔雞出欄體重、進(jìn)食量，降低料重比。當(dāng)日糧中添加抗生素、1 000和2 000mg/kg抗菌肽時(shí)，肉雞的ADG高于對(duì)照組(P＜0.05，1～21、22～42、1～42 d)，且添加2 000mg/kg抗菌肽時(shí)肉雞ADG高于抗生素對(duì)照組(P＜0.05，1～21 d)；日糧中添加2 000mg/kg抗菌肽時(shí)，肉雞的ADFI高于對(duì)照組(P＜0.05，1～21、22～42、1～42 d)，而與抗生素對(duì)照組差異不顯著；日糧中添加2 000mg/kg降低肉雞1～21 d階段的FCR(P＜0.05)，在22～42 d和1～42 d時(shí)分別添加250、500mg/kg和250、500、1 000mg/kg降低肉雞的FCR(P＜0.05)。

2.2 添加不同水平抗菌肽對(duì)肉雞屠宰性能的影響(見表3)

表3 抗菌肽對(duì)肉雞屠宰性能的影響（%）

由表3可知,添加抗生素和抗菌肽可以影響肉雞屠宰性能。21 d時(shí)日糧中添加500mg/kg抗菌肽提高肉雞的腿肌率(P＜0.05)；42日齡肉雞屠宰時(shí)，添加抗菌肽和抗生素可以提高肉雞的全凈膛率(P＜0.05)；其余添加劑量沒有顯著差異，同時(shí)添加抗菌肽1 000、2 000mg/kg與添加抗生素相比可以提高肉雞的腿肌率。

2.3 添加不同水平抗菌肽對(duì)肉雞盲腸微生物的影響（見表4）

表4 抗菌肽對(duì)肉雞盲腸微生物的影響（lg CFU/g）

對(duì)表4中盲腸微生物數(shù)據(jù)分析表明，添加抗菌肽2 000mg/kg和抗生素可以降低肉雞盲腸中好氧菌總數(shù)(P＜0.05，21、42 d)，添加1 000和2 000mg/kg抗菌肽可以降低肉雞盲腸中大腸桿菌數(shù)量(P＜0.05，21、42 d)，其余添加劑量沒有顯著減低好養(yǎng)菌總數(shù)及大腸桿菌數(shù)量，另外添加抗菌肽和抗生素可以增加乳酸菌數(shù)量但是差異不顯著。

3 討論

3.1 日糧中添加抗菌肽對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能的影響

解決抗生素類藥物殘留的有效途徑是研發(fā)替代物，抗菌肽作為飼料添加劑有著較好的前景。有研究結(jié)果證實(shí)，豬小腸抗菌肽有增加肉雞增重和降低料重比的效果，可提高雛雞生長(zhǎng)速度和飼料轉(zhuǎn)化率；陳曉生（2005）研究報(bào)道顯示，用抗菌肽制劑作為肉鴨飼料添加劑，可有效提高肉鴨生產(chǎn)性能；同時(shí)，抗菌肽飼喂肉仔雞可以促進(jìn)生長(zhǎng)，與中草藥對(duì)比，在平均體重、飼料效率方面效果相當(dāng)（黃永彤等，2004）。

本研究表明，日糧中添加抗菌肽和黏桿菌素可顯著提高肉雞ADG和ADFI，降低FCR，其中日糧添加抗菌肽2 000mg/kg時(shí)肉雞生產(chǎn)性能綜合表現(xiàn)最佳。其中添加低水平抗菌肽時(shí)肉雞FCR與對(duì)照組相比差異顯著，而添加高水平時(shí)差異不顯著，這可能與添加高水平抗菌肽顯著改善肉雞ADG和ADFI有關(guān)。由此可見，添加抗菌肽是通過提高肉雞ADG和ADFI而不影響FCR來達(dá)到改善肉雞生產(chǎn)性能的。

3.2 日糧中添加抗菌肽對(duì)肉仔雞屠宰性能的影響

全凈膛率、胸肌率和腿肌率是衡量家禽產(chǎn)肉性能的主要指標(biāo)。屈賢銘等(1989)研究表明,蠶抗菌肽可以對(duì)脂質(zhì)體產(chǎn)生顯著影響。宋小珍等（2005）研究表明，抗菌肽、糖萜素等可在肉仔雞生產(chǎn)中替代抗生素的使用,并提高肉仔雞的產(chǎn)肉性能。本研究結(jié)果表明，21日齡時(shí)，日糧添加500mg/kg抗菌肽與對(duì)照組相比顯著提高肉仔雞腿肌率；42日齡時(shí)，添加不同梯度的抗菌肽和黏桿菌素均能顯著提高肉仔雞全凈膛率；這與上述研究結(jié)果一致，在肉雞生產(chǎn)中達(dá)到較好的屠宰性能。

3.3 日糧中添加抗菌肽對(duì)肉仔雞盲腸微生物的影響

動(dòng)物機(jī)體內(nèi)有建立一套平衡的微生態(tài)菌群共生系統(tǒng)和維持體內(nèi)菌群穩(wěn)態(tài)的機(jī)制。張熠（2006）研究表明，在日糧中添加外源性抗菌肽能抑制病原菌而對(duì)腸道正常菌群和機(jī)體細(xì)胞則無殺傷作用。馬為明（2004）研究結(jié)果顯示，抗菌肽和抗生素有極為相似的作用，系統(tǒng)研究抗菌肽、腸道微生物和動(dòng)物免疫過程之間的關(guān)系可能是揭示抗菌肽促生長(zhǎng)機(jī)理的關(guān)鍵。本研究結(jié)果表明，添加抗菌肽可以顯著降低肉雞盲腸中有害菌群數(shù)量，增加乳酸菌數(shù)量，與上述研究一致。由此可見抗菌肽可以改善腸道菌群微環(huán)境，減少有害菌群對(duì)腸道的損壞，降低對(duì)腸道消化吸收的影響，進(jìn)而減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的浪費(fèi)及降低腹瀉率；維持腸道菌群平衡及腸道健康，更有利于腸道營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，以達(dá)到改善肉雞生產(chǎn)性能的功效。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)中添加1 000mg/kg抗菌肽時(shí)對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、屠宰性能和盲腸微生物存在改善趨勢(shì)，當(dāng)添加2 000mg/kg抗菌肽時(shí)與對(duì)照組相比差異顯著，而與抗生素對(duì)照組差異不顯著，由此可見當(dāng)添加抗菌肽2 000mg/kg時(shí)可以取得最佳的生物功效。

[1]陳曉生，溫劉發(fā)，張輝華，等.飼料中添加抗菌肽對(duì)肉鴨生產(chǎn)性能及免疫器官、內(nèi)臟器官的影響[J].畜禽業(yè)，2005，2：12-13.

[2]黃永彤，黃自然，黃建清，等.抗菌肽與抗生素飼喂肉雞的效果比較[J].廣東飼料，2004(02).

[3]屈賢銘，唐海倫，Steiner H.柞蠶抗菌肽B、D對(duì)脂質(zhì)體的作用[J].生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào)，1989，21：35.

[4]宋小珍，翟明仁，潘珂，等，寡果糖和糖萜素在泰和雞生產(chǎn)中替代抗生素的研究[J].飼料博覽，2005，1：3-5.

[5]張熠，劉緯，丁漢鳳.抗菌肽的研究進(jìn)展及在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（3）：433-434.

[6]馬為明，佘銳萍，彭芳珍.豬小腸抗菌肽的提取及部分生物學(xué)活性研究[J].科學(xué)技術(shù)與工程，2004，4（3）：202-205.