高光平，高桂生，張東林，張艷英，史秋梅，梁銀聚，邵欣華

（1.河北科技師范學(xué)院動物科技學(xué)院 河北省預(yù)防獸醫(yī)學(xué)重點實驗室 秦皇島市中獸藥工程技術(shù)研究中心，河北 昌黎 066600；2.河北新華科極獸藥有限公司，河北 石家莊 051430）

近年來，隨著畜牧業(yè)不斷趨向規(guī)?；图s化的發(fā)展，消化道疾病占整個疾病的比例越來越大，其中腹瀉又是最常見的一類疾病，但其病原復(fù)雜，已成為目前獸醫(yī)臨床的一大難題。一直以來，抗生素和化學(xué)藥物是防治本病的常用藥物，但是，由于長期而廣泛的使用，尤其是不合理的濫用，使得西藥對腹瀉的治療效果越來越差，所以選擇具有廣譜、抗菌力強、不易產(chǎn)生耐藥性、毒副作用小的藥物，是獸醫(yī)界亟待需要解決的問題。

我國中藥資源豐富，價格低廉，毒性較低且不易產(chǎn)生耐藥性，在防病、治病的同時，還能促進生長，增強動物的免疫機能，提高機體整體抗病能力，因此研制開發(fā)中藥制劑對腹瀉疾病的臨床治療具有十分重要的意義。文獻報道，多數(shù)是中藥組方對腹瀉臨床效果的觀察以及利用單味藥物提取的某種成分的藥效學(xué)研究［1－2］，中藥口服液抑制動物腹瀉機理的研究較少見于報道。

本試驗通過制備小鼠腹瀉模型，并根據(jù)中獸醫(yī)醫(yī)藥理論、中藥特性以及腹瀉疾病的機理，從抗小鼠試驗性腹瀉作用和對小鼠小腸運動的抑制作用兩個方面，研究了中藥口服液抗小鼠腹瀉的作用機理，為后續(xù)試驗和臨床應(yīng)用奠定了堅實的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 中藥口服液的制備 各味中藥按照方劑組成分別放于無紡布袋中，冷水浸泡30 min，煎煮30 min，過濾，藥渣加水再煎煮20min，過濾，合并兩次濾液，濃縮至1mL口服液相當(dāng)于原生藥1g，4℃冰箱保存?zhèn)溆?。白頭翁口服液：由白頭翁、黃連、大黃、甘草組成，具有清熱解毒，燥濕止痢之功效。大青止瀉口服液：由大青葉、黃柏、烏梅、訶子組成，具有溫中祛寒，澀腸止痢之功效。雙連固腸口服液：由金銀花、穿心蓮、黃芪、秦皮組成，具有清熱除濕，斂陰固腸之功效。上述中藥均購自昌黎老呔醫(yī)藥貿(mào)易有限公司。

1.2 致瀉劑 番瀉葉煎劑：番瀉葉冷水浸泡15 min，加適量水煎煮15min，過濾，藥渣加水再煎煮10min，合并兩次濾液，將濾液在50℃下濃縮成1∶1的煎劑。蓖麻油（分析純）天津市富宇精細化工有限公司090812。

1.3 試驗動物 昆明系健康小鼠體重20±2g，雌雄各半。

1.4 主要器材和試劑 電加熱型中藥煎藥機、自動包裝機、小鼠灌胃器、濾紙、手術(shù)剪、眼科鑷、直尺、碳素墨水。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)用DPS V3.01專業(yè)軟件進行統(tǒng)計學(xué)檢驗和方差分析。

1.6 中藥口服液對番瀉葉所致小鼠腹瀉的影響40只小鼠隨機分為4組，每組10只，禁食12h后，每只小鼠灌服0.3mL相應(yīng)組方的中藥口服液，對照組灌服等量的生理鹽水，0.5h后每只灌服番瀉葉煎劑0.3mL，灌服完畢將小鼠單個放在墊有報紙的鼠籠內(nèi)，觀察腹瀉情況。小鼠大便大致可分為5種：正常便、外形正常但含水分較多的糞便、外形不正常的軟便、水樣便及黏液便，前兩種視為正常便，后3種為腹瀉便。小鼠每腹瀉1次換1次墊紙，每隔1h累積計算小鼠腹瀉次數(shù)，連續(xù)觀察4h。根據(jù)腹瀉頻率及腹瀉發(fā)生率判定3種口服液抗試驗性腹瀉作用的強弱［3］。

1.7 中藥口服液對蓖麻油所致小鼠腹瀉的影響40只小鼠隨機分為4組，每組10只，禁食12h后，每只小鼠灌服0.3mL對應(yīng)組方的口服液，對照組灌服等量的生理鹽水，0.5h后每只小鼠灌服蓖麻油0.2mL，灌服完畢后將小鼠單個放在墊有報紙的鼠籠內(nèi)，觀察腹瀉情況。方法同1.6。

1.8 中藥口服液對小鼠小腸運動的影響 40只小鼠隨機分為4組，每組10只，禁食24h（自由飲水）后，每只小鼠灌服相應(yīng)中草藥煎劑0.3mL，對照組灌服等量生理鹽水，0.5h后每鼠灌服碳素墨水0.1 mL，20min后脫頸椎處死小鼠，然后打開小鼠腹腔剪取小腸腸管，上端至幽門部，下端至回盲部，測量幽門到墨水最遠運行端以及幽門到回盲端的長度，兩者之比即為墨水推進率；對照組推進率和藥物組推進率之差與對照組推進率之比即為藥物抑制率，最后根據(jù)墨水推進率和藥物抑制率來判定中藥口服液對小腸運動的影響［4］。

2 結(jié)果與分析

2.1 中藥口服液對番瀉葉所致的小鼠腹瀉的影響白頭翁口服液和大青止瀉口服液能明顯地減少番瀉葉引起的小鼠腹瀉發(fā)生率和腹瀉頻率，與對照組比較，白頭翁口服液組和大青止瀉口服液組的平均腹瀉次數(shù)均極顯著地低于對照組（P＜0.01），而雙連固腸口服液組的腹瀉平均次數(shù)與對照組差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)果見表1。

表1 中藥口服液對番瀉葉所致小鼠腹瀉的影響結(jié)果

2.2 中藥口服液對蓖麻油所致的小鼠腹瀉的影響

大青止瀉口服液和雙連固腸口服液能明顯地減少蓖麻油引起的小鼠腹瀉發(fā)生率和腹瀉頻率。與對照組比較，大青止瀉口服液組和雙連固腸口服液組的平均腹瀉次數(shù)均極顯著地（低于對照組P＜0.01）；而白頭翁口服液組的腹瀉平均次數(shù)與對照組差異顯著（P＜0.05）。結(jié)果見表2。

表2 中藥口服液對蓖麻油所致小鼠腹瀉的影響結(jié)果

2.3 中藥口服液對小鼠小腸運動的影響結(jié)果 各中藥口服液組均能不同程度地減少小鼠小腸墨汁推進率，其中，大青止瀉口服液組的小腸推進率極顯著低于對照組P＜0.01）；雙連固腸口服液組的小腸推進率顯著低于對照組 （P＜0.05）；而白頭翁口服液組的小腸推進率與對照組差異不顯著。結(jié)果見表3。

表3 中藥提取物對小鼠小腸運動抑制作用

3 結(jié)語

3.1 白頭翁口服液和大青止瀉湯口服液能極顯著地減少番瀉葉所致的小鼠腹瀉頻率，腹瀉發(fā)生率較對照組和雙連固腸口服液組有所降低，且大青止瀉口服液的作用又略優(yōu)于白頭翁口服液。

3.2 大青止瀉口服液和雙連固腸口服液可極顯著地減少蓖麻油所致的小鼠腹瀉頻率，腹瀉發(fā)生率較對照組和白頭翁口服液組低，且大青止瀉口服液又略優(yōu)于雙連固腸口服液的作用。

3.3 大青止瀉口服液能極顯著的抑制小腸運動功能，雙連固腸口服液能顯著的抑制小腸運動功能，白頭翁口服液組與對照組差異不顯著。

4 討論

小鼠藥物性腹瀉試驗和小鼠小腸推進運動試驗是研究藥物抗腹瀉機理常用的方法［4－7］，本試驗中導(dǎo)致試驗性腹瀉的番瀉葉是刺激大腸性致瀉劑，而蓖麻油則是刺激小腸性致瀉劑。

本試驗中，自擬的雙連固腸湯對小鼠番瀉葉性腹瀉的抑制作用不顯著，可能是由于組方的主要藥物配伍不同所致［3，8］，試驗藥液的制備方法不同，導(dǎo)致藥液所含有效成分及含量有差別也可能是引起試驗結(jié)果不同的原因之一。大青止瀉口服液可極顯著地減少蓖麻油所致的小鼠腹瀉頻率，與王留興報道的結(jié)果基本一致［9］。

本試驗僅從小鼠藥物性腹瀉模型和小鼠小腸推進運動試驗兩個方面研究中藥口服液抗腹瀉的機理，為中草藥抗腹瀉機理的研究提供了有價值的資料，為獲得更比較全面、系統(tǒng)的結(jié)論，還應(yīng)從中藥口服液體外抑菌試驗和對腸系膜毛細血管炎性滲出抑制試驗等各個方面對中藥復(fù)方口服液的抗腹瀉機理進行進一步研究。

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